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利用CRISPR/Cas9技术制备敲除Myostatin基因牛胎儿成纤维细胞株: 2015年; CRISPR/Cas9系统作为第3代人工核酸内切酶,是一种具有广阔应用前景的基因定点修饰工具。肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因能够负向调节肌肉的生长,影响动物的产肉量。为了获得MSTN基因敲除的细胞株,给转基因动物的制备提供材料,试验利用CRISPR/Cas9系统的不同类型的表达载体对牛MSTN基因外显子序列随机设计靶位点,利用T7核酸内切酶I(T7EI)从中挑选出敲除效率最高的靶位点的表达载体,在无筛选标记条件下对牛胎儿成纤维细胞进行基因敲除。结果表明:经过长时间培养获得了基因敲除的细胞株。说明CRISPR/Cas9技术用于基因敲除方面的研究应用前景广阔。; 杨宇张伟伟胡倩佟慧丽严云勤; 关键词：细胞株

利用TALEN技术在牛胎儿成纤维细胞中敲除Myostatin基因被引量：8: 2014年; 肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因能够负向调节骨骼肌的生长和发育,牛MSTN基因突变会出现"双肌"特征。文章利用转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)靶向敲除牛胎儿成纤维细胞的MSTN基因,获得敲除MSTN基因的细胞系,为制备MSTN基因敲除牛提供材料。构建一对MSTN基因的TALENs真核表达载体,分别采用PEI转染试剂和电穿孔法进行牛胎儿成纤维细胞的转染,测序结果表明TALEN技术可用于敲除牛MSTN基因,利用T7核酸内切酶1(T7E1)检测其突变效率,结果显示电穿孔转染的敲除效率为20.4%。通过有限稀释法,共获得10个MSTN基因敲除的细胞克隆(包括MSTN-/-和MSTN+/-),其靶位点敲除的碱基数分别是1～20不等,部分会出现移码突变。出现移码突变的细胞系可用于MSTN基因敲除的转基因肉牛的制备。; 杨翠翠佟慧丽马兴红杜巍刘丹杨宇严云勤; 关键词：MYOSTATIN 转染

松花江吉林--松原段水生生物多样性及环境因子相关性分析: 松花江吉林-松原段隶属于西流松花江，是松花江的重要组成部分。流域内年平均降水量比较充沛，水资源较为丰富。中游沿岸耕地、人口较集中，土质肥沃，是吉林省内主要的商品粮基地。但近年来受水利水电兴建、人类活动的影响，河段内生态环...; 杨宇; 关键词：水生生物群落结构丰度生物量环境因子

MPO奶牛隐性乳房炎检测试剂盒: 本实用新型的目的在于公开一种以髓过氧化物酶MPO为检测指标，运用双抗体夹心BA-ELISA法为检测方法，更符合快速、简便、高灵敏度、高特异性的现代诊断方法要求，适合工业化生产，保存期更长的MPO奶牛隐性乳房炎检测试剂盒。...; 李庆章石晶吕英杨宇高学军边艳杰; 文献传递

CRISPR/Cas9技术在制备牛Myostatin基因敲除细胞株上的应用: 近年来，基因编辑技术已经得到了迅速的发展。与传统的基因克隆技术不同，通过基因编辑技术，人们可以对基因进行敲除、插入、定点突变等修饰操作，从而实现基因功能与调控元件的研究。基因编辑技术在基因制药、基因诊断、基因治疗等技术方...; 杨宇; 关键词：打靶载体肌肉生长抑制素基因敲除细胞株; 文献传递

Hp奶牛隐性乳房炎检测试剂盒: 本实用新型的目的在于公开一种具有检测奶牛隐性乳房炎符合率高于90％，以单克隆抗体为基础建立起来的，检测成本低廉，取样容易，反应速度快，结果灵敏可靠，而且可以稳定、方便地提供标准化试剂，便于实现工业化生产，试剂盒保质期较长...; 李庆章杨宇吕英高学军石晶边艳杰; 文献传递

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杨宇