杨银辉
- 作品数:125 被引量:234H指数:9
- 供职机构:军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 高致病性禽流感病毒血凝素基因定点突变及其原核表达被引量:5
- 2006年
- 目的改构高致病性禽流感病毒血凝素基因,建立有效的原核表达体系。方法利用位点特异PCR突变技术同义突变HA1基因中的稀有密码子,将改构的HA1基因克隆到pGEX-4T-1载体中建立4T-1-HA1-m+重组表达质粒,然后转入E·coliBL21DE3中并用IPTG诱导表达HA1-GST融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测目的蛋白,Western印迹分析表达产物的免疫活性。结果改构的HA1基因能够在大肠埃希菌中有效表达,表达产物能与H5N1亚型高致病性禽流感病毒免疫鼠血清特异性结合。结论提示高致病性禽流感病毒血凝素基因经位点特异PCR突变技术改构后,可以在大肠埃希菌中表达出有免疫活性的血凝素蛋白。
- 李靖刘伯华夏玉坤户义杨保安杨银辉秦鄂德祝庆余
- 关键词:高致病性禽流感病毒血凝素基因定点突变原核表达
- 一种以痘苗病毒载体为基础的反向遗传学系统建立及应用
- 本发明涉及以痘苗病毒载体为基础的反向遗传学系统建立及应用,尤其涉及一种重组冠状病毒及其应用。本发明提供的蛋白,来源于含鼠肝炎冠状病毒(mouse hepatitis virus,MHV)A59株,命名为mNSP1,是如下...
- 常国辉林磊吴晓燕柳洪涛李靖户义罗彦军张雨孙伟康晓平杨银辉祝庆余
- 基孔肯亚病毒特异性检测抗原及其应用
- 本发明公开了一种基孔肯亚病毒特异性检测抗原及其应用。本发明所提供的基孔肯亚病毒特异性检测抗原为如下任一所示多肽:(a1)序列1或序列1的第166‑378位所示的多肽;(a2)序列2或序列2的第166‑392位所示的多肽;...
- 康晓平杨银辉吴晓燕李裕昌姜涛李靖户义冉鑫贾佳
- 利用基因芯片技术对新分离病毒的筛查与鉴定
- 乙型脑炎是一种由蚊子传播的传染性疾病,一般病死率在5%—10%,在我国属于乙类传染病。乙型脑炎是由日本脑炎病毒(Japanese Encephalitis virus,JEV)引起的,分类上属于黄病毒科(Flavivir...
- 杨银辉朱晓光张永国刘伯华康晓平刘洪祝庆余
- 关键词:乙型脑炎病毒基因芯片技术未知病毒
- 一种基于RPA技术的黄热病毒检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种基于RPA技术的黄热病毒检测试剂盒及其应用。通过实验证明:黄热病毒的RPA引物和探针可有效扩增靶基因,特异性达100%,灵敏度为1×10<Sup>2</Sup>copies/反应,且在临床模拟样本中可检测...
- 杨银辉康晓平吴晓燕李裕昌姜涛曹雪峰李靖户义
- 检测黄病毒属病毒的基因芯片探针及基因芯片检测方法
- 本发明提供一组检测黄病毒属病毒的基因芯片探针及一种通用的检测方法。包括森林脑炎病毒(Tick borne encephalitis)探针、登革病毒(Dengue virus)探针和乙型脑炎病毒(Japanese ence...
- 康晓平杨银辉李永强刘洪孙庆歌祝庆余
- 检测五种人兽共患病病毒的方法及专用试剂盒
- 本发明公开了一种检测五种人兽共患病病毒的方法及专用试剂盒。该检测病毒的试剂盒,包括用于检测口蹄疫病毒的引物对A:序列表中序列1所示的DNA,序列表中序列2所示的DNA。用本发明试剂盒检测病毒的方法,特异性强,检测结果可靠...
- 杨银辉孙庆歌吴东来康晓平李永强刘洪祝庆余
- 利用基因芯片技术对新分离病毒的筛查与鉴定
- 目的:利用本研究室已建立的人类医学病毒属水平基因芯片筛查技术及主要虫媒病毒基因芯片检测技术,对2006年7月从山西临沂地区猪脑组织中分离到的未知病毒进行筛查与鉴定,确定其病原体。方法:状态从猪脑组织中分离到病原体,接种B...
- 杨银辉朱晓光张永国刘伯华康晓平刘洪祝庆余
- 关键词:基因芯片虫媒病毒细胞病变芯片检测
- 黄热病毒特异性检测抗原及其应用
- 本发明公开了一种黄热病毒特异性检测抗原及其应用。本发明所提供的黄热病毒特异性检测抗原为如下任一所示多肽:(a1)序列1;(a2)序列1的第166‑320位所示的多肽;(a3)将以上任一限定的多肽的氨基酸序列经过一个或几个...
- 杨银辉康晓平吴晓燕李裕昌姜涛李靖户义霍耐凡
- 乙型脑炎病毒 EDⅢ蛋白的表达纯化及在 Array-ELISA 方法中的应用
- 2013年
- 目的:拟在大肠杆菌中高效表达纯化乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白,希望能为乙型脑炎(乙脑)病毒( JEV)感染血清的诊断试剂盒提供候选抗原。方法针对乙脑病毒的EDⅢ蛋白设计特异的PCR扩增引物,对提取的乙脑病毒RNA进行RT-PCR扩增,获取目的基因并构建重组质粒,将重组质粒转入E.coli BL21中并在IPTG作用下表达目的蛋白。将表达的乙型脑炎病毒EDⅢ抗原系列稀释后与对照抗原同时点制在ELISA微孔板中,采用Array-ELISA技术同时检测临床JEV感染患者及正常人血清,并与间接免疫荧光方法的检测结果进行比较。结果成功克隆了JEV EDⅢ蛋白基因段,并在E.coli BL21中表达,成功获得EDⅢ蛋白。该重组蛋白可用于Array-ELISA方法,进行JEV感染血清的检测,并且与传统免疫学检测方法---间接免疫荧光法结果一致。结论该重组抗原可作为JEV感染血清检测的候选抗原。
- 郑旸康晓平李裕昌吴晓燕张晓松杨银辉
- 关键词:乙型脑炎病毒克隆