柯志勇
- 作品数:27 被引量:48H指数:4
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学化学工程更多>>
- TGF-β1诱导的肿瘤细胞CSRNP1/AXUD1基因的表达及转录调节机制被引量:2
- 2013年
- 目的探讨TGF-β1诱导的肿瘤细胞中CSRNP1/AXUD1基因的表达及其调控机制。方法分别用不同浓度的TGF-β1或相同浓度下不同处理时间处理指数生长期的人肺腺癌细胞A549和人前列腺癌细胞PC-3,荧光定量RT-PCR检测TGF-β1对两种肿瘤细胞中半胱氨酸-丝氨酸蛋白(cystein-serine-rich nuclear protein,CSRNP1)基因表达的剂量和时间依赖性效应;培养的A549细胞血清饥饿后,分别在有无TGF-β1(20 ng/ml)和环己亚胺(30μg/ml)作用下处理24 h,检测TGF-β1诱导的CSRNP1基因的表达是否需要新蛋白的合成;最后,分别将SMAD3表达质粒flag-SMAD3和显性失活突变体表达质粒(flag-SMAD3-mu转染A549细胞中,并以空质粒pcDNA3.1作为对照。血清饥饿后,进行有无TGF-β1(20 ng/ml)处理24 h,Western blot确定外源性SMAD3的过表达,荧光定量RT-PCR检测SMAD3的过表达对TGF-β1诱导的CSRNP1基因表达的影响。结果 TGF-β1以浓度和时间依赖的方式诱导肿瘤细胞中CSRNP1基因的表达,并需要新的蛋白合成。SMAD3的过表达增加TGF-β1诱导的CSRNP1的表达,而显性失活的SMAD3突变体(SMAD3-mu)的过表达则显著降低TGF-β1诱导的CSRNP1的表达。结论肿瘤细胞中TGF-β1可能通过激活SMAD3及其下游信号通路而诱导CSRNP1基因的表达。
- 邓凡李松玉许万福邹志鹏柯志勇曾方银
- 关键词:TGF-Β1SMAD3基因表达肿瘤细胞
- 一种水溶性抗菌不饱和脂肪族聚酯及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种水溶性抗菌不饱和脂肪族聚酯,该聚酯是化学式(I)所示的结构单元线性排列的聚酯,其数均分子量为5000~8000,分散性指数为1.66~2.03;所述的水溶性抗菌不饱和脂肪族聚酯是将十二烷基二甲基环氧丙基氯化...
- 柯志勇黄文华陈宇李航张晟
- 肢芽间充质干细胞条件性FKBP38基因敲除小鼠模型的构建
- 2019年
- 目的构建并鉴定条件性肢芽间充质干细胞FKBP38基因敲除小鼠,为研究FKBP38基因在骨发育及骨关节炎中的作用机制提供动物模型。方法将Prrx1-Cre小鼠与FKBP38^(flox/flox)交配繁殖出F1代小鼠,得到基因型为Prrx1-Cre(Fkbp38^(flox/+))小鼠;选基因型Prrx1-Cre(Fkbp38^(flox/+))的小鼠与FKBP38^(flox/flox)小鼠杂交获得F2代小鼠;基因型为Prrx1-Cre(Fkbp38^(flox/flox))的小鼠即为本实验所需要构建模型小鼠。3周龄鉴定小鼠基因型,4周龄时用Western blot验证FKBP38基因敲除效果。结果 F2代小鼠中包含基因敲除鼠,PCR结果显示基因型为Cre/FKBP38^(flox/flox),Western blot结果显示FKBP38基因敲除效果明显。结论基于Cre/loxp重组酶系统,繁殖出肢芽间充质干细胞FKBP38基因敲除鼠,为在动物水平上探究FKBP38在骨发育及骨关节炎的作用机制提供模型基础。
- 胡乐李禹杨柯志勇张月张武锔
- 医学细胞生物学个性化教学法初探被引量:1
- 2010年
- 探索在医学基础课医学细胞生物学教学中,如何进行个性化教育,其具体实施过程包括提高认识、分组教学等环节。个性化教学的目的是尽量开发学生的个性特长,主动而牢固地掌握医学细胞生物学知识。
- 罗深秋柯志勇王宏杨翠兰徐昕
- 关键词:医学细胞生物学教学方法个性化教学
- 下颌后缩畸形的三维重建及模拟手术的研究
- 下颌骨后缩畸形是东方人群中常见的牙颌面畸形,在我国南方省份人群中更为多见。患者开唇露牙,上下唇不能自然闭合,微笑露龈,前牙深覆/(牙合/)、深覆盖,咬合功能异常,严重影响其外貌和心理。通过正颌外科手术移动患者位置异常的上...
- 柯志勇
- 关键词:下颌后缩畸形三维模型参数测量
- 文献传递
- 蛋白激酶D1在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用被引量:4
- 2013年
- 目的研究蛋白激酶D1(PKD1)在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用,为进一步探讨PKD1在烟曲霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和HEK293细胞中,分别将灭活的烟曲霉分生孢子(1×105CFU/ml)于不同时间处理上述两组细胞,Western blotting证实PKD1的过表达,并检测PKD1的磷酸化活性;其次在A549细胞中分别转染GFP-PKD1、siRNA-PKD1并以灭活的烟曲霉分生孢子处理细胞30 min,分别检测下游NF-κB通路相关信号分子的磷酸化活性;最后,将NF-κB-luc荧光素酶报告基因及内参照报告质粒海肾荧光素酶(pRL-SV40)共转染入表达GFP、GFP-PKD1的A549细胞中,两组细胞在有无烟曲霉分生孢子的作用下处理24 h,收集细胞裂解液,进行双色荧光素酶活性检测。结果 Western blotting证实PKD1的过表达时间依赖性地增强烟曲霉刺激的A549细胞和HEK293细胞中PKD1的磷酸化活性及NF-κB通路中IКB和p65(pS276)的磷酸化活性,反之,敲低PKD1的表达则抑制烟曲霉介导的NF-κB通路中IКB和p65(pS276)的磷酸化活性。过表达PKD1明显增加NF-κB-luc荧光素酶的转录激活活性。结论 PKD1可能在烟曲霉刺激的NF-κB通路的激活及转录活性中起重要作用。
- 牛晓璐许万福李松玉柯志勇曾方银罗深秋邓凡
- 关键词:NF-ΚB转录激活磷酸化
- 医学细胞生物学实验教学改革的探索被引量:1
- 2009年
- 医学细胞生物学是在细胞生物学的基础上重点探索人体细胞结构、功能及其生命活动规律、病理变化的基础等。它是生物、医学高等院校学生的一门重要基础学科。而医学细胞生物实验的教学是完成医学细胞生物学整个课程教学必不可少的环节。针对学校各专业设置的特点,文章就如何组织和分配课程的实验内容、学时加以探讨。
- 柯志勇罗深秋邓凡杨翠兰
- 关键词:医学细胞生物学实验教学教学改革
- 研究生动物细胞培养技术课程的教学改革被引量:7
- 2007年
- 细胞培养技术是当代生命科学研究领域的重要技术,广泛应用于基础研究、基因工程、遗传工程、细胞工程、干细胞研究等方面。它是高等医科院校的研究生基本技能培养中一门不可缺少的课程。就该课程在硕士研究生扩招后教学实践中教学内容及方法的改革做一探索。
- 柯志勇罗深秋邹霞凌朝晖
- 关键词:细胞培养技术教学改革教学方法
- 硕士研究生细胞培养教学改革探讨被引量:1
- 2011年
- 细胞培养技术是医学研究生从事课题研究必备的知识和技能。本校细胞生物学教研室对硕士研究生细胞培养教学进行了改革,通过编写优秀教材,录制配套多媒体教学光盘,合理安排教学内容和设置灵活的课程考核体系,提高了教学效果。
- 李明刘俊柯志勇白晓春罗深秋
- 关键词:细胞培养技术硕士研究生教学改革
- 血管内皮生长因子受体启动子驱动重组腺病毒双自杀基因系统选择性杀伤大肠癌细胞被引量:7
- 2005年
- 目的探讨血管内皮生长因子受体(KDR)启动子驱动重组腺病毒CDglyTK融合基因体系对结直肠癌细胞株LOVO及人脐血管内皮细胞株ECV304的选择性杀伤作用。方法将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的LoVo、ECV304细胞和对照组不表达KDR的LS174T细胞,并给予不同浓度的前药GCV(ganciclovir)和/或5-FC(5-fluorocytosine),观察该体系对细胞株的杀伤效应。结果制备的病毒滴度为2.0×1012pfu/ml。3种细胞的感染率相似,且感染率随腺病毒滴度的递增而增加,当MOI为200时,所有细胞株均接近100%感染。以MOI为100的重组体分别感染各细胞株,发现其对前药的敏感性不同:表达KDR的LoVo和ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,且二者敏感性无显著差异(P>0.1);与前二者相比,LS174T细胞对前药不敏感(P<0.001)。同时,CDglyTK双自杀基因的疗效优于任一单自杀基因(P<0.001)。流式细胞术检测表明该体系抑制LoVo细胞DNA的合成,表现为S期细胞比率增多及G1期细胞减少(P<0.001)。结论KDR基因启动子调控的CDglyTK融合基因体系可选择性杀伤结直肠癌LoVo细胞和血管内皮细胞。
- 林荣凯黄宗海苏国强柯志勇陈建雄周俊杰
- 关键词:血管内皮KDR启动子自杀基因治疗