柯志勇
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- EGFR反义RNA的转染对人类鼻咽癌CNE-2细胞EGFR的表达下调及恶性表型的抑制(英文)被引量：1
- 2003年
- 目的利用反义RNA 抑制靶基因表达的策略,下调EGFR的表达而探讨对人类低分化鼻咽癌CNE-2细胞的恶性表型的抑制性效应。方法将人EGFR的N-端1.35kb片段反向构建入逆转录病毒表达载体pLXSN中,并用脂质体介导转染人鼻咽癌CNE-2细胞,G418筛选并分离阳性克隆,将两个EGFR 反义cDNA转染的克隆细胞命名为CNE-2/AS4 和CNE-2/AS8,而空载体转染的细胞命名为CNE-2/pLXSN。125I-EGF配体结合分析细胞膜上EGFR的表达,台盼蓝染色法测定细胞生长的改变,并用软琼脂集落形成实验检测细胞转化,最后,将筛选的各组阳性克隆细胞分别注射入裸鼠皮下,不同时间观察肿瘤生长的抑制改变及肿瘤的转移状况。结果配体结合实验结果显示,两个选择的克隆CNE-2/AS4 和CNE-2/AS8细胞表面EGFR的数量分别较未转染细胞CNE-2下降18%、45%,表明EGFR反义RNA的表达下调了细胞膜上EGFR的表达;同时,EGFR反义RNA表达的CNE-2细胞生长速率和软琼脂生长能力也较对照组细胞明显降低。注射入裸鼠皮下后,EGFR反义RNA表达的阳性克隆细胞表现出肿瘤生长减慢,淋巴结和肺转移能力也明显降低。结论这些实验结果提示EGFR 反义cDNA转染的CNE-2细胞能下调EGFR的过量表达并部分抑制鼻咽癌的恶性表型,这为进一步阐明EGFR在鼻咽癌的发生。
- 邓凡王瑜曾方银邹志鹏白晓春陆地柯志勇罗深秋
- 关键词：鼻咽癌CNE-2细胞EGFR反义RNA
- HA表位标记的人Axud1基因的构建及在肺腺癌SPC-A1细胞中的表达被引量：1
- 2003年
- 构建在哺乳动物细胞中表达的血凝素HA表位标记的人Axud1融合蛋白表达载体。RT PCR从人外周血淋巴细胞中扩增Axud1全长cDNA ,用含HA序列的特异引物PCR扩增HA Axud1,经BamHⅠ、XbaⅠ酶切后插入到经BamHⅠ、XbaⅠ酶切的真核表达载体pcDNA3 .1(+) 中 ,重组质粒PCR、酶切和测序鉴定正确 ,最后将该质粒转染入肺腺癌SPC A1细胞中 ,Westernblot检测HA Axud1融合蛋白的表达。结果显示 ,筛选的G418抗性克隆SPC A1细胞中均有HA Axud1融合蛋白的表达 。
- 邓凡邹志鹏杨春露曾位森杨翠兰柯志勇罗深秋
- 关键词：基因融合蛋白基因表达
- 学生对细胞生物学“三卷制”考试方法反映的调查被引量：1
- 1999年
- 本文对硕士研究生细胞生物学“三卷制”考试方法的反映进行了调查。结果表明学生对该方法的总体感觉、考题量、考题难度比较满意，对考题难度与得分权重的标准则不很满意。
- 罗深秋关勋强柯志勇
- 关键词：考试方法考题得分题量细胞生物学
