柳满然
- 作品数：76 被引量：226H指数：7
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 癌相关成纤维细胞在肿瘤发生发展中的作用被引量：3
- 2013年
- 肿瘤微环境在肿瘤发生、浸润、转移过程中扮演着十分重要的角色,癌相关的成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境中最主要的基质细胞,在肿瘤的发生发展中有不可忽视的作用。CAFs对肿瘤的起始创造良好的"土壤",又分泌大量生长因子促进肿瘤的生长,分泌血管生成因子促进肿瘤血管的生成,并招募大量的炎症因子和分泌大量的可溶性产物到微环境中促进肿瘤细胞浸润和转移。因此,CAFs成为肿瘤靶向治疗的新目标,为临床肿瘤的综合治疗提供新的思路。
- 彭琼乐孙艳赵浏阳王黎阳彭惠民柳满然
- 关键词：肿瘤微环境肿瘤靶向治疗
- 调控一碳代谢影响肿瘤干细胞干性的物质的应用
- 本发明属于生物医药领域，具体涉及一种调控一碳代谢影响肿瘤干细胞干性的物质在制备产品中的应用，一种药物组合物及一种体外非治疗性抑制癌细胞生长的方法。所述抑制调控一碳代谢影响肿瘤干细胞干性的物质为miRNA6778‑5p s...
- 柳满然侯懿烜赵茂嘉杜燕娥
- 文献传递
- 他莫昔芬抑制G蛋白偶联雌激素受体沉默的乳腺癌相关成纤维细胞的增殖并促进其凋亡被引量：6
- 2015年
- 目的通过构建G蛋白偶联雌激素受体(GPER)的慢病毒短发夹RNA(shRNA)表达载体,感染人乳腺癌相关成纤维细胞(BCAF)后,探讨他莫昔芬对BCAF增殖及凋亡的影响。方法构建GPER-RNAi慢病毒载体及对照病毒载体后,进行病毒包装,实时定量PCR检测GPER mRNA水平,Western blot法检测GPER蛋白水平;将BCAF分为4个组,包括阴性对照组、GPER-RNAi组、阴性对照联合10-8mmol/L他莫昔芬组和GPER-RNAi联合10-8mmol/L他莫昔芬组,CCK-8法检测他莫昔芬处理后细胞增殖,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测他莫昔芬处理后的细胞凋亡情况。结果 Western blot结果显示感染慢病毒的BCAF中,GPER表达显著降低。与阴性对照相比,CCK-8法检测结果显示他莫昔芬显著促进BCAF增殖。GPER敲低的BCAF,他莫昔芬的促增殖作用减弱;流式细胞术检测结果显示,他莫昔芬抑制BCAF凋亡,但在GPER敲低的BCAF,他莫昔芬的抑制细胞凋亡作用减弱。结论 Lenti-GPER-shRNA慢病毒感染BCAF,可有效沉默GPER表达;GPER敲低的BCAF,他莫昔芬刺激细胞增殖和抑制凋亡作用减弱。
- 严玉钊余腾骅涂刚柳满然袁杰杨光伦
- 关键词：他莫昔芬
- 胃癌组织mtDNA突变与癌变关系的探讨被引量：9
- 2002年
- 为了进一步明确mtDNA突变与胃癌发生、发展的关系,利用变性高效液相色谱（DHPLC）和DNA测序技术,对30例胃癌组织和对应的正常组织mtDNA基因组全序列进行了筛查.研究结果确定胃癌中mtDNA存在高频率的突变,突变频率为66.7％（20/30）,其中56.7％（17/30）的突变仅见于癌组织.突变频率较高的基因为ND4,ND5和D-loop,分别为36.7％,26.7％和30％.与组成电子传递链复合体Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ的基因相比,复合体Ⅰ基因在被检测的癌组织mtDNA中的突变率最高（43.3％）.突变类型以碱基替代为主（85.4％）.研究结果提示,复合体Ⅰ基因,特别是ND4,ND5和ND3基因突变在胃癌的发生、发展中起重要作用.
- 柳满然吕有勇
- 关键词：胃癌组织癌变DHPLC胃癌发生基因序列测定
- TGF-β信号通路调节乳腺肿瘤干细胞样细胞富集及迁移
- 目的探讨TGF-β信号通路对乳腺肿瘤干细胞样细胞富集及其迁移的影响。方法在乳腺细胞小球（Mammosphere）形成实验的基础上,加入TGF-β信号通路特异性抑制剂IY2109761并计算其成球效率;Western bl...
- 周明莉柳满然刘华伟
- 关键词：TGF-Β信号通路细胞迁移
- 文献传递
- c-Ski癌基因对肿瘤相关成纤维细胞活化的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:研究癌基因c-Ski对乳腺癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)活化的影响。方法:应用基因重组技术,将c-Ski基因克隆到载体p BABE-puro,转染至永生化的正常乳腺成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),嘌呤霉素药物筛选稳定转染细胞株;Western blot检测转染后c-Ski、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)的表达;通过MTT法、流式细胞术、细胞划痕实验及Transwell细胞侵袭实验研究转染前、后成纤维细胞增殖、迁移、侵袭能力的差异;收集细胞上清制备条件培养基,用Transwell细胞侵袭实验分析转染后成纤维细胞对MD-MB-231细胞侵袭能力的影响。结果:成功构建重组质粒p BABE-puro-Ski;Western blot检测结果显示,p BABE-puro-Ski转染组细胞中c-Ski、α-SMA和FAP表达明显高于空白对照组细胞(P=0.000,P=0.001,P=0.002);MTT法结果显示转染组细胞增殖能力高于空白对照组细胞(P=0.011);转染组细胞的S期含量(38.58±1.28)明显高于空载体组(25.05±0.52)和空白对照组(26.01±0.86),差异具有统计学意义(P=0.000);细胞划痕实验及Transwell细胞侵袭实验结果表明转染组细胞的迁移、侵袭能力均高于空载体组和空白对照组细胞;转染组细胞条件培养基能明显促进MD-MB-231细胞的侵袭能力。结论:c-Ski癌基因表达上调能促进NFs活化为CAFs,并进一步促进乳腺癌细胞MD-MB-231的侵袭能力。
- 杨得志王黎阳柳满然
- 关键词：乳腺癌成纤维细胞
- 结直肠癌循环血游离miRs分子诊断标志物研究进展被引量：1
- 2014年
- 微小RNAs(microRNAs,miRs)是一类非编码小分子单链RNA,主要在翻译水平负性调控基因表达。近年来研究发现,循环血游离miRs对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)具有潜在的诊断作用。CRC患者具有特异性的循环血游离miRs表达谱,其中,miR-18a、miR-21、miR-29a和miR-92a等miRs均具有潜在的CRC诊断价值,而miR-7具有潜在的CRC早期诊断价值。这些研究结果表明,循环血游离miRs有可能成为新的CRC分子诊断标志物。
- 杨得志唐石伏柳满然
- 关键词：结直肠癌
- 低氧下氧化型ATM通过胞内柠檬酸累积促进人乳腺癌细胞的迁移和侵袭被引量：1
- 2020年
- 该研究主要探讨低氧下共济失调毛细血管扩张突变(ataxia-telangiectasia mutated,ATM)蛋白激酶活化通过糖代谢重塑对人乳腺癌MCF7及MDA-MB-231细胞迁移和侵袭的影响。构建靶向ATM基因的慢病毒载体(shATM)及其阴性对照病毒(shNC),感染人乳腺癌MCF7和MDA-MB-231细胞,建立ATM基因稳定沉默细胞系。实验设阴性对照组(shNC)、ATM基因沉默组(shATM)以及ATM特异性抑制剂KU60019处理组,利用实时荧光定量PCR检测ATM下调效果;Western blot检测常氧及低氧下ATM、p-ATM、γ-H2AX、p-CHK2(T68)的蛋白表达水平,利用伤口划痕愈合及Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力的改变,用糖代谢相关试剂盒检测糖代谢过程中相关底物的变化。结果表明,低氧处理12 h时(此时尚未发生DNA损伤),人乳腺癌MCF7和MDA-MB-231细胞p-ATM(即氧化型ATM)表达量显著增加,其迁移和侵袭能力增加。糖代谢改变表现为葡萄糖消耗量、丙酮酸产量、乙酰辅酶A产量明显高于乳酸生成量;进而检测三羧酸循环(tricarboxylic acid cycle,TCA)产物,发现与柠檬酸相比,下游琥珀酸和延胡索酸产生了较大程度的累积。而shATM和KU60019细胞处理组能有效抑制p-ATM的表达量、细胞迁移和侵袭能力、葡萄糖消耗、丙酮酸产量、乙酰辅酶A产量,但对于乳酸产量的抑制作用并不明显;TCA中柠檬酸的产量的降低程度明显大于其下游琥珀酸和延胡索酸的降低量。在低氧下,shATM细胞中补充外源性柠檬酸,肿瘤细胞的迁移侵袭能力均得到一定程度回补。研究结果揭示,低氧情况下,氧化型ATM的表达量明显增加,并通过胞内柠檬酸的累积促进人乳腺癌细胞的迁移和侵袭。
- 万雪颖彭美茜秦旖璐朱鹏鹏乔伊娜杨丽萍曾欢柳满然
- 关键词：乳腺癌柠檬酸细胞侵袭
- GPR30介导雌激素对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞系增殖的影响被引量：5
- 2014年
- 目的探讨雌激素受体GPR30(或称G蛋白偶联雌激素受体G protein-coupled estrogen receptor,GPER)介导雌激素对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468增殖的影响。方法免疫荧光法及Western blot法检测MDA-MB-468细胞中受体GPR30的定位及表达量,流式细胞术及CCK-8法检测药物处理后的细胞周期和细胞生长变化,Western blot法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-extracellular regulate kinase,p-ERK)以及周期蛋白CyclinD1的蛋白表达。结果雌激素受体GPR30在MDA-MB-468细胞中高表达,且主要表达于细胞质。17-β雌二醇(E2)、GPR30特异性激动剂(G1)与他莫昔芬(TAM)处理细胞后,均显著促进细胞周期进展和细胞增殖。其中处于DNA合成期(S期)的DNA量分别为空白对照组的(2.81±0.11)、(2.82±0.21)、(2.70±0.20)倍,相对细胞数分别为空白对照组的(1.83±0.18)、(1.94±0.12)、(1.92±0.16)倍,其促生长效应被GPR30特异性拮抗剂(G15)显著抑制(P<0.05)。E2、G1及TAM处理组中p-ERK及CyclinD1的蛋白相对表达量分别是空白对照组的(2.59±0.21)、(2.43±0.25)、(2.26±0.34)倍以及(1.67±0.06)、(1.51±0.08)、(1.90±0.07)倍,G15可抑制E2、G1及TAM所引发的相应变化(P<0.05)。结论雌激素活化GPR30刺激下游ERK信号通路上调p-ERK及周期蛋白CyclinD1的表达,促进细胞周期的进展,导致三阴性乳腺癌细胞系MDAMB-468异常增殖。
- 余腾骅罗浩军严玉钊吴诚义柳满然涂刚
- 关键词：GPR30雌激素三阴性乳腺癌细胞增殖
- MCF-7细胞他莫昔芬耐药过程中F-actin细胞骨架的重构促进细胞迁移被引量：4
- 2013年
- 目的研究人乳腺癌细胞MCF-7获得他莫昔芬(tamoxifen,TAM)耐药过程中发生的肌动蛋白细胞骨架重构及其对细胞迁移能力的影响,并探讨相关分子机制。方法采用高浓度短时间4-羟基他莫昔芬(4-hydroxytamoxifen,OHT)冲击法诱导人乳腺癌MCF-7/TAM耐药细胞株(Tam-R)。运用FITC标记的鬼笔环肽染色观察纤维状肌动蛋白(F-actin)动态变化,免疫荧光分析E-钙粘蛋白在野生型MCF-7细胞(MCF-7W)及Tam-R细胞中的表达及分布,pull-down和Westernblot检测小GTP酶Rac1活性,Transwell细胞迁移实验评估F-actin骨架重构对Tam-R细胞迁移能力的影响。结果 MCF-7W细胞中F-actin富集于毗邻细胞膜周边,呈典型鹅卵石形态,E-钙粘蛋白分布与F-actin相似,可在毗邻细胞膜周边形成完整的黏附连接;而Tam-R细胞中F-actin纤维出现板状伪足和应力纤维两种异常形态,细胞外围不能通过E-cadherin与周围细胞形成完整的黏附连接。在Tam-R细胞中,PI3K抑制剂Wortmannin(WM)可抑制OHT引起的F-actin骨架重构、Rac1的活化和细胞迁移(P<0.05),而ERK1/2抑制剂U0126对OHT引起的F-actin骨架重构无明显影响。结论 OHT可能激活PI3K,促进Rac1活化,通过诱导F-actin骨架重构促进Tam-R细胞迁移。
- 李振华涂刚李维东莫志强杨光伦罗浩军柳满然
- 关键词：乳腺癌他莫昔芬肌动蛋白迁移
