汪蕴
- 作品数：14 被引量：27H指数：2
- 供职机构：中国科学院动物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 一种用于大规模培养细胞的微载体
- 本发明涉及一种用于大规模培养细胞的微载体。该微载体是将壳聚糖和明胶按下述步骤制得：首先将壳聚糖醋酸水溶液和明胶水溶液按一定比例混合均匀，制备成复合的壳聚糖—明胶水溶液；然后在搅拌下加入一定司班的矿物油，形成稳定的壳聚糖—...
- 李克国丰美福汪蕴苗振川徐大勇
- 文献传递
- 造血干细胞自我更新调控及wnt信号在其中的作用
- 2004年
- 干细胞生物学最为重要的问题之一就是干细胞自我更新的调控机制 .造血干细胞具有自我更新和分化为各血细胞世系的能力 ,但目前对其自我更新的调控机制尚未明确 .大量的研究表明 ,造血干细胞的自我更新受到来自其所处微环境和自身内在基因的共同调控 .经典的发育调控通路———wnt信号通路在造血干细胞自我更新调控中起着至关重要的作用 .就造血干细胞自我更新及其调控 ,特别是wnt信号通路在其中的作用作一综述 ,并对其应用前景和今后的研究方向作了展望 .
- 张好建苗振川汪蕴丰美福
- 关键词：造血干细胞自我更新WNT信号通路基因
- 可溶性HLA-G1与NK-92细胞表面ILT2及KIR2DL4受体相互作用的研究
- 2007年
- 目的探讨可溶性HLA-G1(sHLA-G1)对人NK-92细胞杀伤活性的抑制与细胞表面免疫球蛋白样转录分子2(ILT2)和杀伤细胞免疫球蛋白样受体2DL4(KIR2DL4)受体的关系。方法①通过原核表达技术获得sHLA-G1重组蛋白(重组蛋白),并采用蛋白质印迹法进行鉴定。②取NK-92细胞,加入终浓度20μg/ml的重组蛋白分别培养10、30min,再分别加入抗HLA-G1/G5、抗ILT2和抗KIR2DL4抗体,采用流式细胞术检测各组NK-92细胞表面sHLA-G1和ILT2、KIR2DL4受体表达阳性率;以NK-92细胞单独培养作为对照组。③以人白血病K562细胞为靶细胞,以经不同方式处理的NK-92细胞为效应细胞,效靶比为5:1,共同培养2h,采用流式细胞术检测NK-92细胞对K562细胞的杀伤率。NK-92细胞处理方式为单纯重组蛋白处理(分别加入终浓度为0、10、20μg/ml的重组蛋白培养30min)和表面受体封闭+重组蛋白处理(分别加入抗ILT2、抗KIR2DL4、抗LT2+抗KIR2DL4抗体培养30min,再分别加入终浓度为0、10、20μg/ml的重组蛋白培养30min)。结果①蛋白质印迹分析表明所获重组蛋白为带有组氨酸标签的特异蛋白。②NK-92细胞与20μg/ml重组蛋白共培养30min后,sHLA-G1表达阳性率明显高于而ILT2、KIR2DL4受体表达阳性率均明显低于对照组(均P<0.05)。③以终浓度0、10、20μg/ml的重组蛋白处理的NK-92细胞对K562细胞的杀伤率分别为39.79%±2.00%、27.79%±0.75%、21.36%±0.67%(两两比较,均P<0.01);单独封闭ILT2受体,杀伤率分别为23.09%±1.63%、21.13%±0.38%、18.42%±0.47%(两两比较,均P<0.01);单独封闭KIR2DL4受体,杀伤率分别为30.74%±0.44%、26.03%±0.38%、21.15%±0.35%(两两比较,均P<0.01)。结论sHLA-G1通过与NK-92细胞表面ILT2和KIR2DL4受体直接结合而抑制NK-92细胞的杀伤活性。
- 韦娇张海泉鱼艳荣Muti-Ur-Rehman Khan汪蕴邓力丰美福
- 关键词：HLA抗原重组融合蛋白质类
- 人肝癌组织细胞的激光光镊拉曼光谱研究被引量：12
- 2009年
- 激光光镊与拉曼光谱相结合形成的激光光镊拉曼光谱系统(LTRS)已用于分析生物组织标本,可对单个活细胞进行操控和光谱收集。从拉曼光谱特征峰位置、强度和线宽可得到有关细胞的组成、结构及细胞内物质相互作用的信息。文章应用LTRS系统,分析了来自人的恶性肝癌组织的不同病变部位标本,包括肝癌组织细胞、肝癌癌旁细胞和远离肝癌组织的肝脏正常的组织细胞,观察到了随肝癌的病变部位变化所出现的一些有趣的拉曼光谱峰的变化。正常的肝组织细胞在1 070和1 266 cm-1处的峰很明显,而肝癌和肝癌癌旁组织细胞的这两个峰则不明显,肝正常组织细胞的1 445 cm-1峰明显高于肝癌和肝癌癌旁组织细胞。已知1 070 cm-1峰代表脂类和核酸,1 266和1 445 cm-1峰代表脂类和蛋白。引起这些峰变化的物质很可能参与了肝癌的发生。上述初步研究结果表明:单细胞激光光镊拉曼光谱可以区分肝癌的不同病变部位,将是检测和分析肝癌组织标本的一种很好的方法。
- 王雁军姚辉璐王桂文汪蕴丰美福
- 关键词：人肝癌细胞拉曼光谱
- HepG2细胞在模拟微重力条件下的生长研究——体外细胞三维生长模型构建被引量：10
- 2007年
- 将人肝癌细胞(HepG2)接种于生物可降解支架聚羟基乙酸(polyglycolicacid,PGA)上,采用模拟微重力方法,在具有低剪应力和适宜气体扩散的旋转细胞培养系统(RCCS)中培养,构建体外三维培养模型.通过扫描电镜、透射电镜、RT-PCR、流式细胞术等方法观察分析.结果表明,细胞在此模型中生长良好,细胞呈多面体,含有丰富的微绒毛、线粒体以及胞间有紧密连接形成.该系统有利于细胞形成三维结构,更接近于体内细胞实际生长状况.另外,通过黏附分子表达分析,表明该模型重现了肝癌细胞某些体内侵袭转移特征.一些在肿瘤细胞侵袭和转移过程中具有重要作用的细胞黏附分子(celladhesionmolecules,CAMs)表达有了显著的变化,其中E-钙粘素(E-cadherin)表达降低,CD44、细胞间黏附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1,CD54)以及整合素β1(integrinβ1,CD29)表达增高.在体外实验中,对实验模型的适当选择是得到理想客观实验结果的必要前提,采用模拟微重力的方法构建的体外细胞三维培养模型,将为肿瘤生物学研究、药物敏感性试验等提供更为理想的研究模型.
- 徐大勇汪蕴丰美福
- 关键词：HEPG2模拟微重力聚羟基乙酸细胞黏附分子
- 人白细胞抗原-G1对NK92效靶识别过程的影响
- 2002年
- 人白细胞抗原G (humanleukocyteantigen G ,HLA G)属非经典的主要组织相容性复合体 (majorhistocompatibilitycomplex ,MHC)Ⅰ类分子 ,为自然杀伤细胞 (naturalkiller,NK)抑制性受体的识别配体 ,可以向NK细胞传递抑制性信号 ,从而抑制NK细胞的细胞毒作用 .为了研究HLA G对NK与靶细胞识别作用的影响机制 ,采用激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞术对全长HLA G1的表达和功能进行了探讨 ,并对效靶识别过程中靶细胞 [Ca2 + ]i (胞内自由钙离子浓度 )进行了实时检测 .结果发现 ,全长的HLA G1表达于K5 6 2、JAR和CHO细胞的胞浆和胞膜上 ,它能够部分地抑制NK92的细胞毒作用 .NK92与CHO和GFP CHO细胞作用后 ,靶细胞 [Ca2 + ]i 出现了明显的升高 ,HLA G1的表达则抑制了靶细胞 [Ca2 + ]i的升高 .结果提示 :靶细胞[Ca2 + ]i 的升高是有效的细胞杀伤作用的必要条件 ,HLA
- 田兴辉周建军方贞付娄黎明汪蕴丰美福
- 关键词：胞内钙离子免疫抑制
- 母胎界面MHC-Ⅰ类分子及其与蜕膜淋巴细胞的相互作用被引量：2
- 2004年
- 人类和哺乳动物的妊娠过程是自然界存在的同种半异体移植免疫耐受的天然模型,母体和胎儿的免疫学关系是双向的交流,一方面由胎儿提呈的抗原来决定,另一方面依赖于母体对这些抗原的识别和反应。母胎界面滋养层上的MHC-I类分子和蜕膜淋巴细胞在这一过程中起重要作用。人胎盘滋养层细胞不表达经典的HLA-A和HLA-B,只表达少量的HLA-C分子,但高表达非经典的HLA-G和HLA-E,它们是主要的免疫耐受分子。蜕膜淋巴细胞群也趋向于天然免疫,主要由NK细胞组成。同时它们之间的相互作用为母胎免疫耐受的建立提供了重要的分子机制,对其机制的研冤和阐释必将会对生殖生物学、移植免疫学及肿瘤治疗学的发展提供一定的思路。
- 鱼艳荣汪蕴丰美福
- 关键词：妊娠HLA-G蜕膜淋巴细胞
- HLA-G1的基因表达、纯化及其活性分析
- 2004年
- 在获得HLA-G1cDNA克隆序列的基础上,构建了pGEX-4T2-HLA-G1原核表达载体,对HLA-G1的诱导表达发现,融合蛋白以包涵体形式存在于表达菌中。进一步溶解包涵体,改善复性条件,最终获得高纯度的GST/HLA-G1融和蛋白。51Gr释放试验表明,纯化的HLA-G1具有抑制NK细胞对靶细胞的杀伤活性。
- 汤海洋张彦明汪蕴刘亚兵丰美福
- 关键词：蛋白纯化蛋白活性
- 肝干细胞的可塑性和分化机理的研究进展被引量：2
- 2003年
- 对肝干细胞的可塑性、多向分化潜能、分化机理及其与肝癌发病机制的关系等方面进行综述 .肝干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞 .在不同的条件下 ,肝干细胞可分化为肝细胞、胆上皮细胞、胰腺细胞和肠上皮细胞 .肝干细胞的分化涉及微环境、细胞因子和细胞外基质等多种调控因素 .肝干细胞分化为成熟肝细胞受多种转录因子和信号通路的调节 。
- 何祖平张好建汪蕴王建今丰美福
- 关键词：肝干细胞肝细胞癌发病机制
- 模拟微重力状况下人肝癌细胞HepG2的生长特性与机理研究
- ＜正＞空间特殊的物理环境为组织细胞的三维生长提供了良机。与常规平面培养相比,三维生长的肿瘤细胞更接近体内的真实状况,有利于形态、结构和功能特征的维持,是肿瘤生物学研究的良好模型。由于空间飞行机会极其难得,本文用RCCS ...
- 徐大勇汪蕴丰美福
- 文献传递
