沈三弟
- 作品数：26 被引量：51H指数：4
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- 5-杂氮-2′-脱氧胞苷降低了乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外迁移能力被引量：2
- 2010年
- 目的探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对高转移性人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外迁移能力的作用及可能的机制。方法实验分为对照组与5-Aza-CdR处理组,分别通过Transwell趋化迁移及划痕实验、半定量逆转录PCR(SqRT-PCR)、甲基化特异性PCR(MSP)等方法检测MDA-MB-231细胞的体外迁移能力、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)与CXC趋化因子受体-4(CXCR4)基因表达、BRMS1与CXCR4启动子区甲基化状况。结果对照组与处理组细胞穿过Transwell聚碳酸酯滤膜的数量分别为1 290.00±214.64与673.00±44.00,处理组细胞穿膜数量明显减少(P<0.05);24、36、48 h时间点对照组与处理组细胞划痕愈合率分别为20.34±0.69、59.31±0.38、91.77±0.13与20.19±0.67、49.32±0.24、69.47±0.46,其中36 h与48 h时间点处理组愈合率明显降低(P<0.05);对照组与处理组BRMS1的相对于内参GAPDH的灰度值(IDV)分别为0与0.39±0.001,处理组BRMS1 mRNA表达明显上调(P<0.05),5-Aza-CdR使BRMS1启动子区甲基化的CpG岛B完全去甲基化,对照组与处理组CXCR4的相对于内参GAPDH的IDV分别为0.58±0.003与0.58±0.01,两组比较差异无统计学意义(P>0.05),CXCR4启动子区CpG岛1的非甲基化状态亦无明显改变。结论 5-Aza-CdR通过去甲基化机制重新激活肿瘤转移抑制基因BRMS1的表达,从而降低了MDA-MB-231细胞体外迁移能力。
- 沈三弟吴爱国赵志
- 关键词：基因甲基化迁移
- 3.0T DWI及ADC对兔肝脏缺血再灌注损伤的量化研究被引量：1
- 2011年
- 目的评价3.0T扩散加权成像(DWI)及表观扩散系数(ADC)值对兔肝脏缺血再灌注损伤(I/R)的诊断价值。材料与方法新西兰大白兔I/R模型36只,随机分成6组(Sham,0.5 h,2 h,6 h,12 h,24 h I/R组),每组6只。肝缺血组采用half-Pringle结扎肝左叶血供60 min后,恢复血供,b值分别选取50 mm2/s、100 mm2/s、300 mm2/s、600 mm2/s,同时行组织病理学检查和肝生化天门冬氨酸轻氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)检测。结果除b=600 mm2/s外,0.5 h与24 h组ADC明显低于对照组(P<0.01)。在b=50、100 mm2/s时,6h组与Sham组之间差异存在统计学意义(P<0.05)。2 h和12 h I/R与Sham组间差异无统计学意义(P>0.05)。各I/R血清AST、ALT明显高于Sham组(P<0.05)。结论 3.0TDWI ADC值能动态监测肝脏缺血再灌注损伤的病理发展过程,采用较小的b值(b<300 mm2/s)能敏感地反映肝脏血窦淤血等病理变化过程。
- 郭成伟沈三弟梁长虹吴爱兵罗威贾乾军
- 关键词：磁共振成像扩散加权成像缺血再灌注损伤
- Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞后的体外实验研究
- 2010年
- 目的:探讨Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞后对MCF-7细胞的影响。方法:利用脂质体将真核表达载体pIRES2-EGFP-Noxa瞬时转染至乳腺癌MCF-7细胞。通过RT-PCR检测转染后mRNA的表达情况。MTT比色法测定细胞增殖的抑制。Hoechst33342检测细胞的凋亡情况。结果:Noxa基因转染后在乳腺癌MCF-7细胞中成功表达,其转染后24、48、72h后mRNA表达量逐渐增高。Noxa基因的表达使得乳腺癌MCF-7细胞出现增殖抑制,其24、48、72h抑制率之间的差异具有显著性(P<0.05)。Hoechst33342染色显示Noxa基因转染后细胞出现凋亡,其24、48、72h凋亡率与阴性对照组相比,差异具有显著性(P<0.05)。结论:Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞后能够抑制细胞增殖并促进其凋亡。
- 赵志吴爱国沈三弟
- 关键词：乳腺肿瘤转染
- 5-杂氮-2'-脱氧胞苷对乳腺癌MCF-7细胞实验性肺转移的影响
- 2010年
- 目的:探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对非浸润性人乳腺癌MCF-7细胞实验性肺转移的影响及可能的机制。方法:将MCF-7细胞分为对照组与5-Aza-CdR处理组,分别通过半定量RT-PCR(semi-quantitative RT-PCR,SqRT-PCR)与甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法检测两组细胞的CXC趋化因子受体-4(CXCR4)、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)的mRNA表达与启动子区甲基化状况。然后分别将两组细胞通过边缘尾静脉注射到BALB/c nu/nu裸鼠体内,5周后,用荧光定量RT-PCR(fluorescent quantitative RT-PCR,FqRT-PCR)检测裸鼠肺组织内的目的基因HPRT mRNA丰度。结果:处理组CXCR4mRNA表达明显上调(P<0.05),5-Aza-CdR使CXCR4启动子区甲基化的CpG岛1完全去甲基化;两组BRMS1mRNA表达无明显差异(P>0.05),BRMS1启动子区CpG岛B的非甲基化状态亦无明显改变。处理组裸鼠肺脏HPRT mRNA丰度高,转移癌组织较多。结论:5-Aza-CdR通过去甲基化机制上调了促转移基因CXCR4的表达,从而增强了MCF-7细胞实验性肺转移能力。
- 沈三弟吴爱国邵国利
- 关键词：乳腺肿瘤基因甲基化
- 剂量密集型TC-P联合艾迪注射液治疗三阴性乳腺癌的临床观察被引量：3
- 2013年
- 目的观察剂量密集型TC-P(吡柔比星+环磷酰胺→紫杉醇)联合艾迪注射液对三阴性乳腺癌(TNBC)新辅助化疗的近期疗效及不良反应。方法将48例TNBC患者分为对照组与治疗组:对照组给予剂量密集型TC-P方案(22例),治疗组给予艾迪注射液联合剂量密集型TC-P方案(26例),分别对两组患者近期疗效、骨髓抑制、卡氏体能状态(KPS)进行比较。结果两组近期疗效无显著性差异(P>0.05);对照组骨髓抑制较重,两组比较有显著性差异(P<0.05);对照组化疗后KPS降低(P<0.05),而治疗组化疗前后无显著性变化(P>0.05)。结论艾迪注射液没有提高剂量密集型TC-P方案治疗三阴性乳腺癌的近期疗效,但能减轻化疗副反应,提高患者生活质量。
- 沈三弟陈卓荣肖高芳罗智辉黄湛
- 关键词：三阴性乳腺癌艾迪注射液
- 短发夹RNA沉默促肝细胞再生磷酸酶-3基因表达对乳腺癌MCF-7细胞生长和侵袭能力的影响被引量：1
- 2011年
- 目的构建以促肝细胞再生磷酸酶-3（PRL-3）为靶基因的短发夹状小干扰RNA（short hairpin RNA,shRNA）表达载体,并探讨PRL-3-shRNA表达载体对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法 构建PRL-3基因特异性shRNA表达载体,使用脂质体法将PRL-3-shRNA表达载体转染入MCF-7细胞。采用Real-ti me PCR和Western blot分别检测转染后MCF-7细胞中PRL-3基因mRNA和蛋白的表达;运用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法检测转染后MCF-7细胞的增殖水平,用流式细胞仪检测细胞凋亡的情况;采用Transwell小室法检测细胞侵袭力变化。计量资料采用单因素方差分析或重复测量方差分析。结果 酶切鉴定和测序分析证实PRL-3-shRNA表达载体成功构建。转染成功后,shRNA-1~3组PRL-3基因mRNA表达分别为（0.31±0.27）、（0.15±0.14）和（0.31±0.03）,与空白组和阴性组（1.00±0.00、0.98±0.18）相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。PRL-3-shRNA-2组PRL-3蛋白的表达量明显低于阴性组和空白组（0.50±0.02比0.91±0.03和0.89±0.02,P〈0.05）;PRL-3-shRNA-2转染入MCF-7细胞后能明显降低其增殖水平（P〈0.05）;PRL-3-shRNA-2组凋亡率明显高于空白组和阴性组[（8.37±1.85）%比（1.60±1.58）%和（0.16±0.05）%,P〈0.05];Transwell小室侵袭实验显示,PRL-3-shRNA-2组穿膜细胞数明显低于阴性组和空白组（P〈0.05）。结论 沉默PRL-3基因表达可抑制MCF-7细胞的增殖,促进凋亡。
- 钟琰吴爱国纪术峰沈三弟
- 关键词：促肝细胞再生磷酸酶-3
- 结肠液囊管一期修复结肠吻合口漏的动物实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的研制结肠液囊管作为一种安全可靠的新技术对结直肠吻合口漏进行有效的一期修复。方法将西藏小型猪随机分为2组,处理组与对照组,每组15头,处理组采用结肠液囊管对结肠吻合口漏进行一期修补,对照组以传统一期吻合口漏缝合近段结肠造瘘,二期结肠回纳手术。在修补术后第7、14、21天检测吻合口漏愈合情况:吻合口漏部位的愈合强度——爆破压、愈合部位组织中微血管密度及羟脯氨酸含量。结果结肠液囊管能够修复结肠吻合口漏,两组均无动物死亡,无肠管狭窄及坏死。术后第7、14天处理组爆破压、羟脯氨酸含量、微血管密度均高于对照组,但术后第21天两组无显著性差别。结论应用结肠液囊管技术一期修复结肠吻合口漏是安全、可靠且有效。特别是在结直肠吻合口漏48～72h以上,腹腔严重感染的环境下能有效修复结直肠吻合口漏。
- 王纯忠黄宗海沈三弟史福军陈飞李建国张全安
- 关键词：一期修复腹腔镜
- 1枚前哨淋巴结阳性早期乳腺癌保腋窝的可行性分析被引量：3
- 2013年
- 目的探讨1枚前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)阳性的早期乳腺癌患者保腋窝(omitting axillary dissection,OAD)的可行性。方法用美蓝作为示踪剂先行乳腺癌前哨淋巴结活检术(sentinel lymph node biopsy,SLNB),根据快速冰冻病理结果分为SLN阴性组与1枚SLN阳性组,随后两组均行常规腋窝淋巴结清扫(axillary lymph node dissection,ALND)以解剖出非前哨淋巴结(non-sentinel lymph node,NSLN),比较两组间NSLN的阳性率。结果 SLN阴性组30例,1例NSLN阳性,阳性率为3.3%,准确性为96.7%(29/30);1枚SLN阳性组30例,仅3例NSLN阳性,阳性率为10.0%;两组阳性率差异无统计学意义(χ2=1.071,P=0.612)。全组随访1～48个月,均无区域淋巴结复发。结论 1枚SLN阳性的早期乳腺癌患者可考虑OAD。
- 陈卓荣沈三弟张凯李敏吴家豪
- 关键词：乳腺癌前哨淋巴结活检腋窝淋巴结清扫
- 5-氮杂-2'-脱氧胞苷与顺铂对MDA-MB-231细胞的联合作用
- 2013年
- 目的探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR,DAC)与顺铂(cisplatin,PDD)联合应用对人三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231体外增殖及凋亡的影响。方法实验分组:5μM DAC处理组(DAC组),15μM PDD处理组(PDD组),2.5μM DAC与8μM PDD同步处理组(DAC+PDD组),2.5μM DAC与8μM PDD序贯处理组(DAC→PDD组)及空白对照组。分别以MTT法和流式细胞术(FCM)测定各处理组MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡情况,以q值评价两药的联合效应。结果 DAC组的24h、48h、72h增殖抑制率分别为(8.12±0.79)%、(21.72±1.60)%及(30.39±1.31)%;PDD组为(35.14±2.00)%、(49.22±1.01)%及(65.52±1.53)%;DAC+PDD组为(54.25±3.82)%、(68.89±1.52)%及(87.26±2.37)%;DAC→PDD组为(6.84±0.68)%、(67.64±0.91)%及(88.76±3.54)%。联合组较单药组增殖抑制率均显著升高(P<0.01)。DAC+PDD组、DAC→PDD组24h、48h、72h的q值分别为1.12、1.14、1.15和0、1.12、1.17,两药联合有增效作用。对照组、DAC组、PDD组、DAC+PDD组、DAC→PDD组24h、48h、72h凋亡率分别为(1.57±0.38)%、(1.83±0.27)%、(2.26±0.42)%;(10.41±0.70)%、(15.37±0.74)%、(21.39±1.22)%;(16.63±0.65)%、(21.89±1.20)%、(30.39±2.20)%;(21.42±1.11)%、(33.86±1.16)%、(42.92±1.16)%;(8.26±0.68)%、(28.98±1.01)%、(41.98±1.12)%。联合组较单药组及对照组凋亡率显著升高(P<0.01)。结论 DAC与PDD均能抑制MDA-MB-231细胞株的增殖,促进其凋亡,且两者联合有增效作用。
- 沈三弟陈卓荣肖高芳刘彦明
- 关键词：三阴性乳腺癌顺铂序贯治疗
- 硅橡胶和聚氨酯制作的结肠囊管性能测试被引量：3
- 2011年
- 背景:鉴于结直肠穿孔及吻合口漏的治疗上传统手术方法时间长、创伤大、费用高,故急需设计出一种医疗器械对这两种疾病实施微创、安全、有效的一期修复。目的:设计一种能经肛门进出,能对结直肠穿孔及结直肠吻合口漏进行一期修复的医疗器械,并对其各项性能进行客观检测。方法:采用医用硅橡胶、医用聚氨酯按设计方案制作出结肠液囊管样品,然后对样品外套囊的柔韧度、内管及外套囊的变形压力值、液囊管的漏气压力值进行检测比较,评估结肠液囊管临床使用的可行性、安全性。结果与结论:采用医用硅橡胶与医用聚氨酯制作出的结肠液囊管外套囊变形压力值分别为(30.42±0.46),(30.73±0.29)kPa,内管变形压力值分别为(5.96±0.22)kPa及>100kPa,液囊管漏气压力值分别为(59.23±1.25),(60.01±1.45)kPa,医用硅橡胶制作出的结肠液囊管内管硬度不够,容易内突导致管腔狭窄闭合,外套囊变形压力值稍小,但差异无显著性意义(P=0.088),液囊管漏气压力值无明显差别(P=0.213)。提示采用医用聚氨酯制作的结肠液囊管结构简单、性能优良、操作方便、安全可靠。
- 王纯忠黄宗海沈三弟陆峰史福军陈飞李建国
- 关键词：性能检测结直肠穿孔
