沈浩然
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 活性氧对卵巢癌细胞COC1及COC1/DDP的化疗敏感性分析
- 2014年
- 目的:比较卵巢癌顺铂(DDP)敏感株COC1及耐药株COC1/DDP细胞组织层面活性氧(ROS)水平,探讨ROS水平与卵巢肿瘤化疗敏感性的关系。方法:应用流式细胞法检测两株细胞ROS水平及在使用ROS生成剂大黄素(Emo)50μmol/L、清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)10 mmol/L、DDP 10μg/ml不同时间及干预手段后ROS的变化;采用MTS法检测细胞在用DDP、DDP+Emo、DDP+Emo+NAC干预24小时后细胞增殖活力的变化;应用冰冻切片荧光染色法检测COC1及COC1/DDP细胞成瘤后组织层面ROS水平。结果:1COC1的ROS水平绝对值明显高于COC1/DDP(P<0.05);2使用NAC后,COC1及COC1/DDP细胞分别与对照组比较,其相对ROS水平明显下降(P<0.05),而使用Emo后,相对ROS水平增加(P<0.01),但两组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3DDP单独处理后,COC1及COC1/DDP的ROS水平在24小时显著上升,分别与其1、2、4、6小时时比较,差异均有统计学意义(P<0.05),但两组在不同时间段的组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。4DDP联用Emo后,两株细胞ROS呈时间依赖性增长,在24小时时变化显著,且COC1细胞的反应性高于COC1/DDP(P<0.05)。5COC1及COC1/DDP在单药DDP(<5μg/ml)的作用下,细胞的相对生存率呈剂量依赖性变化;在联用Emo后,细胞相对生存率明显下降;而在加用NAC后略有上升。6组织层面的ROS水平COC1比COC1/DDP高2.21倍(P<0.05)。结论:COC1比COC1/DDP在细胞及组织层面ROS水平有明显增高,采用Emo和NAC干预ROS水平后,对于化疗敏感性发生变化,提升ROS水平对其化疗敏感性增强。
- 马骏杨洁沈浩然王诚洁王育
- 关键词：卵巢肿瘤活性氧顺铂
- 生物芯片在多囊卵巢综合征研究中的应用
- 2011年
- 多囊卵巢综合征（pcos）的生物芯片研究提示存在多种基因／蛋白质改变，然而这些基因的网络效应仍不清楚，研究这些调控变化可能为PCOS的诊治提供病因学基础，并且结合各种组学技术，这些高通量研究将有助于将基因改变和蛋白功能联系起来。笔者就芯片技术在PCOS研究中的应用作一综述。
- 沈浩然狄文
- 关键词：多囊卵巢综合征生物芯片基因改变PCOS网络效应组学技术
- 喜树碱药物NSC606985抗卵巢癌细胞活性及其机制的研究被引量：1
- 2010年
- 目的:体外观察喜树碱药物NSC606985对人卵巢癌细胞的生长抑制效应、凋亡诱导效应以及抗癌机制。方法:采用MTT法检测不同浓度(6.25,12.5,25,50,100nmol/L)NSC606985作用特定时间(24,48,72h)后对人卵巢癌COC1细胞的生长抑制效应,用AnnexinV-FITC/PI双染法FCM检测NSC606985对COC1细胞的凋亡诱导效应,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测缺氧(2%O2)对HIF-1α,AMFR及RhoC mRNA表达水平的影响。用免疫印迹技术(Western blot)检测物理性缺氧及氯化钴(CoCl2)化学模拟缺氧下HIF-1α蛋白的表达水平以及NSC606985对HIF-1α的调控效应。结果:纳摩尔浓度的NSC606985可以显著抑制人卵巢癌COC1细胞生长,呈现剂量及时间依赖效应。不同浓度(50,100,200nmol/L)NSC606985作用24h凋亡细胞比率分别是68.44%,80.86%,91.98%,具有剂量依赖性。在人卵巢癌细胞系COC1和SKOV3中,缺氧(2%O2)14h对HIF-1α、AMFR及RhoC mRNA的表达无影响,却可以上调HO-8910PM细胞HIF-1αmRNA水平。物理性缺氧(2%O2 14h)及CoCl2化学模拟缺氧(50μmol/L或150μmol/L 24h)诱导COC1,HO-8910PM及SKOV3等卵巢癌细胞株HIF-1α蛋白高水平表达,NSC606985(20～400nmol/L 14h或24h)可呈剂量依赖性显著下调缺氧诱导的HIF-1α蛋白。结论:NSC606985抑制卵巢癌细胞增殖具有剂量和时间依赖性,可能与诱导细胞凋亡相关。缺氧下HIF-1α在卵巢癌细胞的恶性生物学行为中发挥重要作用,NSC606985可通过下调缺氧诱导的HIF-1α蛋白发挥独特的抗癌机制。
- 张宁李姝沈浩然冯勤梅狄文
- 关键词：卵巢肿瘤细胞系喜树碱细胞凋亡HIF-1Α
- TOFA抑制上皮性卵巢癌细胞活性的体外实验研究
- 2011年
- 目的:探讨乙酰辅酶A羧化酶抑制剂TOFA对卵巢癌COC1细胞增殖能力的抑制作用及其机制。方法:采用细胞增殖/毒性检测试剂(CCK-8)检测不同浓度TOFA作用24、48、72h对卵巢癌细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测COC1的细胞周期变化情况,免疫印迹技术(Western blot)检测COC1细胞磷酸化AKT、ERK蛋白表达的变化。结果:不同浓度(1、5、10、20、50μg/ml)TOFA分别作用24、48、72h后,对卵巢癌细胞的增殖抑制作用呈时间和剂量依赖。5、10、20、50μg/ml TOFA处理48h后实验组和对照组相比,阻滞于G0/G1期的细胞数明显增加(P<0.05)。10μg/ml TOFA作用后,可上调磷酸化AKT蛋白表达,60min后磷酸化ERK蛋白表达抑制率为47%(P>0.05)。结论:TOFA对卵巢癌细胞增殖抑制作用呈时间和剂量依赖性,诱导细胞G0/G1期阻滞,抑制磷酸化ERK表达,TOFA发挥作用的机制可能与MAPK/ERK信号转导通路相关。
- 李姝邱丽华吴步初张宁沈浩然丁传伟狄文
- 关键词：乙酰辅酶A羧化酶上皮性卵巢肿瘤信号转导通路
- 双氢青蒿素对卵巢上皮性癌发展和转移的影响被引量：5
- 2013年
- 目的:研究双氢青蒿素(DHA)对体外培养的卵巢上皮性癌高度转移细胞株HO-8910pm黏附、侵袭能力以及体内生长的影响,并探讨其相关分子作用机制。方法:用不同浓度DHA处理HO-8910pm,采用基质胶贴壁黏附法检测DHA对癌细胞体外黏附能力的影响;用跨膜小室模型和划痕实验检测DHA对癌细胞侵袭和迁徙能力的影响。用裸鼠的HO-8910pm原位接种卵巢癌模型,检测DHA对卵巢癌侵袭和转移的影响。Western blot法检测DHA对癌细胞聚焦黏附激酶(FAK)磷酸化、MMP-2和MMP-9的体外影响。结果:(1)DHA作用于HO-8910pm细胞后,细胞增殖能力显著抑制,体外黏附和侵袭能力显著下降;(2)体内实验中,DHA可显著抑制卵巢癌腹膜转移;HO-8910pm细胞p-FAK和MMP-2蛋白水平降低,但MMP-9蛋白水平无显著降低。结论:DHA对卵巢上皮性癌细胞的增殖、黏附、侵袭能力及肿瘤转移有一定的抑制作用,其具体机制可能与抑制p-FAK、MMP-2表达水平有关。
- 吴步初胡柯李姝朱静顾李颖沈浩然狄文
- 关键词：DHA卵巢肿瘤
