滕蔓
- 作品数:104 被引量:155H指数:8
- 供职机构:河南省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 猪流行性乙型脑炎弱毒活疫苗的效价测定及保存稳定性研究被引量:4
- 2015年
- 为评估市售商品化猪乙型脑炎(JE)弱毒活疫苗的质量以及实验室条件下疫苗的保存稳定性,采用TCID50效价测定和RT-PCR检测病毒的保守基因(E基因和C/pr M基因)2种方法对2012年市场销售的主要国产疫苗产品进行了质量评估,同时将供试疫苗产品置-30℃保存3、6、9、12个月后分别取样测定乙脑病毒(JEV)TCID50效价。结果表明,市售的猪乙脑同类疫苗中不同品牌产品之间活病毒含量差异较大,最高可达104.33TCID50/头份,但部分产品含量极低,甚至难以检测到活病毒;E基因和C/pr M基因的RT-PCR扩增产物丰度的差异与TCID50测定结果基本一致。多数疫苗产品在有效期内病毒效价基本稳定,同一厂家生产的疫苗保存期越短,其中相对活病毒越多,效价越高。
- 滕蔓罗俊樊剑鸣禹乐乐胡博李秀杰邓瑞广张改平
- 关键词:乙型脑炎疫苗TCID50RT-PCR
- 猪乙脑病毒BHK-21细胞传代株BSF.ZZ-1-p60和BSF.ZZ-3-p60的全基因组序列分析
- 2016年
- 为研究猪源乙脑病毒分离株基因遗传稳定性,对猪源乙脑病毒分离株BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3在BHK-21细胞上连续传代60次后的病毒全基因组进行序列测定及分析。结果表明,BSF.ZZ-1-p60、BSF.ZZ-3-p60基因组全长均与各自的亲本毒株BSF.ZZ-1、BSF.ZZ-3一致,均为10 977 nt,在2个病毒基因组的10 701 nt位点处均插入1个碱基G。与亲本毒株相比,2个细胞传代毒株的病毒基因组经连续传代后趋于稳定,均有10个位点发生氨基酸突变,这些突变主要集中在E蛋白区域。核苷酸序列同源性比对分析发现,与其他JEV参考毒株相比,BSF.ZZ-1-p60和BSF.ZZ-3-p60与弱毒疫苗株SA14-14-2的核苷酸序列同源性较高,分别为99.6%和95.9%,其氨基酸序列与猪源野毒分离株SH0601和HW的氨基酸序列同源性较高,分别为98.2%、86.4%和98.3%、86.5%。
- 滕蔓胡博冯丽丽樊剑鸣郅玉宝李秀杰邓瑞广罗俊
- 关键词:乙脑病毒BHK-21细胞病毒基因组
- 猪流行性乙型脑炎病毒快速检测试纸条
- 本实用新型公开一种可快速检测猪流行性乙型脑炎病毒的试纸条,包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层,吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成,纤维素膜层上标记有羊抗或兔抗小鼠IgG的对照印...
- 滕蔓罗俊张改平杨艳艳周玲邢广旭赵东杨继飞柴书军樊剑鸣郭成留李学伍孙亚宁李青梅梁跃
- 文献传递
- 乙脑病毒猪源分离株CSF.XZ-2D感染BHK-21细胞毒的浓缩及纯化
- 2015年
- 研究了日本流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)猪源分离株CSF.XZ-2D感染的BHK-21细胞培养物中JEV的浓缩及纯化方法,对浓缩及纯化后的病毒TCID_(50)效价分别进行测定。结果表明,经差速离心后病毒液在4℃条件下分别以30 000 r/min、40 000 r/min、50 000r/min、60 000 r/min超速离心3 h,其中50 000 r/min超速离心可将绝大部分JEV病毒粒子充分沉淀至离心管底部,浓缩效果最佳;病毒沉淀用PBS重悬后进行不连续蔗糖密度梯度离心,病毒粒子主要集中在35%~50%的区带蔗糖层。
- 滕蔓冯丽丽罗俊樊剑鸣王方雨郅玉宝李秀杰邓瑞广张改平
- 关键词:乙脑病毒BHK-21细胞纯化
- 猪乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白的原核表达、纯化及活性检测
- 2017年
- 在大肠杆菌BL21(DE3)中表达乙脑病毒(JEV)EDⅢ蛋白、镍柱纯化并检测表达蛋白。采用RT-PCR方法扩增EDⅢ基因片段,构建重组表达载体p ET-28a-EDⅢ并转化到BL21(DE3)菌,经IPTG诱导蛋白表达,表达可溶性产物经NiNTA亲和层析纯化,最后通过SDS-PAGE和Western-Blot检测表达蛋白。结果成功构建原核表达载体p ET-28a-EDⅢ;EDⅢ蛋白在BL21(DE3)菌已表达,经Ni-NTA获得纯化蛋白,并经Western-Blot检测具有反应活性。
- 张二芹滕蔓罗俊赵孟孟许倩茹赵东邓瑞广张改平
- 关键词:乙脑病毒表达蛋白
- 马立克氏病病毒快速检测试纸条
- 本发明公开一种快速检测马立克氏病病毒MDV的试纸条,包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层,吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成,所述纤维素膜层上标记有抗羊IgG或抗小鼠IgG的对照...
- 罗俊滕蔓张改平崔治中邓瑞广江国托邢广旭赵鹏杨继飞郅玉宝杨艳艳郭军庆王方雨乔松林王丽
- 文献传递
- 马立克氏病病毒河南分离株Meq基因的克隆与序列分析被引量:1
- 2014年
- 【目的】了解马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)河南分离株Meq基因的分子特性,为中原地区MDV流行情况提供较详细的信息,为更好地防控MD奠定基础。【方法】应用PCR方法分别扩增了17株MDV河南省野毒分离株的Meq基因片段,克隆测序后,将各毒株Meq基因序列与vv+MDV 648A株、vvMDV RBIB株、vMDV GA株、mMDV疫苗株CVI988株和814株的Meq基因序列进行比对分析。【结果】17株分离株中除HNGS201和HNLC503的Meq基因扩增产物较预期稍大外,其余15个的片段长度为1 020bp,与预期长度相符;MDV河南分离株之间及其与参考毒株Meq基因的核苷酸同源性为99.0%~100%,部分毒株Meq基因的氨基酸序列有10个位点的氨基酸存在规律性突变;MDV河南分离株和参考株共组成3个进化分支,其中强毒株GA、RB1B和648A位于一个分支,分离株HNGS201、HNLH304、HNLC503与mMDV毒株CVI988和814位于同一分支,其余14株分离株位于另一个较大的分支。【结论】河南省可能流行着不同毒力的MDV,一些mMDV毒株的Meq蛋白存在59个或60个氨基酸的插入。
- 余祖华滕蔓丁轲闵亚杰禹乐乐宿靖伟程相朝罗俊
- 关键词:马立克氏病病毒MEQ基因克隆
- 一条与猪瘟E0蛋白相结合的多肽序列及其应用
- 本发明主要涉及猪瘟病毒E0结合多肽及其应用,该多肽序列为WRYDQ,是一种线性结合多肽,以多肽序列为核心,可以对此多肽序列的延长和修饰,修饰材料包括但不局限于纳米材料、荧光材料、酶类、生物素及特定蛋白质。本发明借助噬菌体...
- 张改平王方雨赵东郝慧芳滕蔓邓瑞广
- 文献传递
- 一种马立克病病毒gB蛋白的单克隆抗体及制备方法和应用
- 本发明公开一种抗马立克病病毒gB蛋白的单克隆抗体及制备方法和应用。所述的抗MDV gB蛋白的单克隆抗体5E8由小鼠杂交瘤细胞株gB‑5E8产生,该细胞株保藏编号为CGMCC No:23024,该单克隆抗体重链及轻链可变区...
- 滕蔓罗俊白依霖张改平刘金玲郑鹿平柴书军程娜邢广旭赵东
- 马立克氏病病毒和J亚群禽白血病病毒快速联检试纸条
- 本发明公开一种一步法快速检测马立克氏病病毒MDV和J亚群禽白血病病毒ALV-J的试纸条,包括不吸水的支撑层、附着在支撑层上的吸附层,吸附层由样品吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及吸水层依次拼接而成;纤维素膜层上标记...
- 张改平罗俊滕蔓崔治中江国托郭军庆杨继飞赵鹏杨艳艳杨苏珍胡骁飞赵东王丽史西保孙亚宁
- 文献传递