王婷
- 作品数:7 被引量:35H指数:4
- 供职机构:西北农林科技大学食品科学与工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程农业科学更多>>
- 苯唑西林敏感、mecA基因阳性的猪源金黄色葡萄球菌的流行、分子分型及耐药性研究被引量:4
- 2021年
- 【目的】为了解我国猪源苯唑西林敏感-mecA阳性金黄色葡萄球菌(Oxacillin-susceptible,mecA-positive Staphylococcus aureus,OS-MRSA)的流行情况、菌株分子特征及耐药性,本研究对我国中西部4个省份(甘肃、陕西、河南和广西)的9个规模化养猪场进行鼻腔拭子样本采集。【方法】运用PCR扩增nuc和mecA基因及苯唑西林耐药性检测对OS-MRSA菌株进行分离鉴定。然后对分离所得的OS-MRSA菌株进行26种毒素编码基因、16种抗生素耐药性以及spa、MLST和SCCmec分型检测。【结果】结果表明,采集的884份样本中,67份样本7.6%(67/884)分离到金黄色葡萄球菌,包括50株甲氧西林敏感菌株(Methicillin-sensitive Staphylococcus aureus,MSSA)、8株苯唑西林耐受-mecA阳性金黄色葡萄球菌(Oxacillin-resistant mecA-positive,OR-MRSA)和9株OS-MRSA菌株。26种被检毒素编码基因中有9种毒素编码基因被检出,其中hla基因检出率最高,其次为hld、hlb、hlg、sei、sem、seg、sen和seo。此外,67株分离株中仅有16株携带肠毒素编码基因,其中OR-MRSA和OS-MRSA菌株分别占37.5%(6/16)和50.0%(8/16),且携带毒素编码基因的菌株克隆型均为ST9-t899。16种所测试抗生素中,菌株对12种抗生素表现为耐药,其中MSSA、OR-MRSA和OS-MRSA分离株分别主要对1–8、10–12和7–11种抗生素耐药。所有分离株共有4种克隆型ST398-t571、ST9-t899、ST398-t034和t11241,其中ST9-t899为MRSA菌株唯一克隆型和ST398-t571为MSSA优势克隆型。除4株分离株未检测到SCCmec分型外,IVb(76.5%,13/17)是MRSA分离株的唯一分型。【结论】结果表明,我国猪源MRSA分离株对苯唑西林药物敏感性发生了改变,出现了较多的苯唑西林敏感菌株。此外,MSSA和MRSA分离株优势克隆型分别为ST398-t571和ST9-IVb-t899。研究还发现,克隆型与毒素编码基因有显著相关性,携带毒素编码基因的菌株克隆型均为ST9-t899。通过了解我国猪源MSSA、OR-MRSA和OS-MRSA的流行、
- 张鹏飞寇明莹张强张萌徐旭张钰嘉王婷杨雪微吴聪明王新
- 关键词:耐药性分子分型
- 可视化环介导等温扩增法检测牛奶中产志贺毒素大肠埃希氏菌被引量:1
- 2022年
- 目的建立可视化环介导等温扩增(loop mediated isothermal amplification,LAMP)法检测牛奶中产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)。方法以stx1/2基因作为检测靶基因,利用羟基萘酚蓝(hydroxy naphthol blue,HNB)指示剂,建立一种可视化检测STEC的LAMP方法。同时,将建立好的LAMP方法与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法相比较,并对人工污染STEC的脱脂乳进行检测。结果建立的可视化LAMP方法在64℃反应50 min后可凭肉眼观察(紫罗兰色到天蓝色)判定结果。该方法特异性良好,与大肠埃希菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等均无交叉反应,可以准确区分STEC与非STEC菌。Stx1-LAMP和stx2-LAMP的检出限分别为3.54×10^(‒4)和3.54×10^(‒5) ng/µL,而常规PCR中stx1和stx2的检出限分别为3.54×10^(‒3)和3.54×10^(‒2) ng/µL,即stx1-LAMP检测方法的灵敏度是stx1-PCR的10倍,stx2-LAMP检测方法的灵敏度是stx2-PCR的1000倍。对人工污染STEC菌牛奶样品进行检测,stx1-LAMP和stx2-LAMP分别可检测到细菌浓度为10^(3)和10^(2) CFU/mL的加标样品。结论本研究为STEC菌株提供了一种特异性强、灵敏度高、成本低,适用于现场和基层检测的可视化LAMP检测方法。
- 张鹏飞张萌阮傅倩王婷徐旭侯乐乐白莉王晔茹吴倩王新
- 关键词:环介导等温扩增可视化
- 苦荞花生复合发酵酸奶加工工艺研究被引量:10
- 2013年
- 以苦荞,花生及脱脂乳粉为原料,酸度,感官评分为试验指标,分析苦荞糖化汁与花生浆配比,脱脂乳粉用量,加糖量,发酵剂用量,发酵时间对苦荞花生酸奶品质的影响,采用正交试验优化了工艺条件。结果表明,苦荞糖化汁与花生浆配比,脱脂乳粉用量,发酵剂用量以及发酵时间对苦荞花生酸奶品质有显著影响。苦荞花生酸奶加工的适宜工艺条件为苦荞糖化汁与花生浆4︰1混合,脱脂乳粉8%,白砂糖6%,发酵剂(嗜热链球菌︰保加利亚乳杆菌=1︰1)5%,42℃发酵6 h。苦荞花生酸奶口感细腻,具有苦荞清香味和花生香浓味,酸度为72.5°T,蛋白含量为3.0%,总黄酮含量33.5 mg/100 mL,是一种营养与风味俱佳的保健型花色酸奶。
- 王婷张国权
- 关键词:苦荞花生酸奶总黄酮
- 食源性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜的形成及相关基因的检测被引量:5
- 2020年
- 为了解食源性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA)生物被膜形成能力及其相关基因携带情况。采用刚果红琼脂法和96孔板法测定22株食源性MRSA菌株(包括:原料乳分离株4株,鸡肉、速冻水饺和即食食品分离株各6株)的生物被膜形成能力,同时通过PCR方法对MRSA菌株生物被膜形成相关的15个基因进行检测分析。22株MRSA菌株中,刚果红琼脂法和96孔板法分别检测出21株(95.45%)和22株(100.00%)有生物被膜形成能力。96孔板法测定菌株生物被膜形成能力弱、中等和强的检出率分别为54.55%、40.91%和4.55%。MRSA菌株生物被膜相关基因clfA、fib和eno的携带率最高均为95.45%,其次是clfB(90.91%)、fnbB(54.55%)、icaBC和ebpS(都为45.45%)、agr(27.27%)、icaAD和cna(都为22.73%)、fnbA(13.64%),sar,bbp和sigB(都为4.55%)。此外,来自原料乳和即食食品的MRSA菌株较生鸡肉和速冻水饺MRSA菌株生物被膜形成能力强(p<0.05)。结果表明,96孔板法能够进行定性和定量检测生物膜的形成,而刚果红琼脂法只能定性检测生物被膜的形成,两者的定性检测结果存在一定的差异。通过96孔板法定量检测的结果表明食源性MRSA菌株普遍能形成生物被膜,其中存在一些生物被膜形成能力强的MRSA菌株,同时大部分MRSA菌株不依赖ica途径形成生物被膜,提示产肠毒素MRSA菌株形成生物被膜定植在食品加工过程的环境中,不易清除,成为食品安全中的潜在隐患。
- 张鹏飞王婷钟楠张伟松王新
- 关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜
- 奶源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析被引量:6
- 2020年
- 目的了解原料乳和乳房炎奶样中大肠杆菌的污染情况及菌株耐药性。方法通过选择培养和聚合酶链式反应方法对2个奶牛场采集到的206份奶样(129份乳房炎牛奶样品和77份原料乳样品)进行大肠杆菌的分离鉴定,采用药敏纸片法对分离株进行25种常用抗生素耐药特征检测。结果206份奶样中大肠杆菌的污染率为8.3%(17/206),其中乳房炎和原料乳样品的污染率分别为7.0%(9/129)和10.4%(8/77)。从17份污染的样本中共分离到34株大肠杆菌,其中乳房炎奶样分离到18株,原料乳分离到16株。药敏结果显示,奶样分离株对氨苄西林耐药最为普遍(44.1%,15/34),对头孢类抗生素也有较强耐药性[如头孢唑啉和头孢噻吩(20.6%,7/34)]。最常见的耐药谱为AMP(11.8%,4/34),AMP-CXM-CFZ-KF-F和AMP-CXM-CFZ-CTX-PRLCRO-KF(5.9%,2/34)。此外,A,B奶牛场分离株的耐药率(P=0.007)和耐药谱总体差异显著(P=0.043)。结论奶样中存在大肠杆菌的污染情况,菌株普遍对氨苄西林和头孢类抗生素耐药且部分对非兽用抗生素也有一定的耐药性。因此,为避免耐药大肠杆菌对人类,尤其是抵抗力较弱的老年人和婴幼儿的感染和中毒,除应加强对奶源地的管理外,还需防止抗生素的滥用。
- 张鹏飞王婷钟楠赵春花杨飞安晶王晓俞英王新
- 关键词:原料乳大肠杆菌耐药性
- 肉鸡屠宰环节中金黄色葡萄球菌的流行及分子特征和耐药性被引量:7
- 2022年
- 为探究肉鸡屠宰加工环节中金黄色葡萄球菌的污染关键环节及菌株的分子特征和耐药性,对陕西省某肉鸡屠宰场5个屠宰环节(活鸡肛拭、浸烫、预冷、分割和贮存)进行4次样本收集。通过选择培养和聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增nuc基因对金黄色葡萄球菌进行分离鉴定。然后对分离株进行23种毒素编码基因、27种耐药基因、16种抗生素耐药性及葡萄球菌蛋白A(staphylococcal protein A,SPA)、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和肠杆菌科基因间重复序列PCR(enterobacterial repetitive intergenic consensus-PCR,ERIC-PCR)分型检测。结果表明,收集的144份样本中有32份样本被污染(22.2%,32/144)。除活鸡肛拭样本无检出外,其余环节样本均有检出。其中浸烫褪毛环节污染率最高(40.0%,12/30),其次为分割环节(26.7%,8/30)、预冷环节(21.9%,7/32)和贮存环节(15.6%,5/32)。23种被检毒素编码基因中16种毒素编码基因被检出,其中pvl、seb、sek、seg、sei、sem、sen、seo、seu、sep和seq基因常被检出,且96.9%(31/32)的分离株携带新型肠毒素编码基因。27种被检耐药基因中仅有4种耐药基因被检出,包括blaZ、tet(K)、erm(B)和aac(6’)/aph(2’’)。16种所测试抗生素中,菌株对7种抗生素表现为耐药,其中对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑耐药最为普遍,其次为氨苄西林、青霉素、四环素、环丙沙星、红霉素和庆大霉素。所有分离株共有5种克隆型(ST7-t091、ST5-t010/t002和ST59-t437/t441)和4种ERIC-PCR聚类簇(I1~I4)。不同批次样品分离株中存在相同ERIC-PCR图谱、分子型、耐药谱、毒素和耐药基因。结果表明,肉鸡屠宰过程中普遍存在金黄色葡萄球菌污染。且不同环节存在交叉污染现象,其中浸烫被认为是受污染的关键环节。研究还发现,分离株携带肠毒素编码基因与分子型有显著相关性(P<0.05)。通过对不同环节的监测,有助于识别加工环
- 张鹏飞徐旭王婷杨雪微张萌寇明莹阮傅倩万阳丽吴倩王新
- 关键词:金黄色葡萄球菌分子特征耐药性
- 陕西省典型冷冻食品中大肠杆菌的分子特征及耐药性检测被引量:4
- 2022年
- 为了解冷冻食品中大肠杆菌污染情况,分析其潜在的食品安全问题,从陕西省4市(宝鸡、咸阳、西安和渭南)共收集冷冻食品样品360份(120份速冻水饺和240份冰淇淋)。通过选择培养和聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)进行大肠杆菌分离鉴定。然后对分离株进行21种毒力基因、23种耐药基因、15种抗生素耐药性检测及种群分型。360份样品中大肠杆菌污染率为13.6%(49/360),其中5份样品(10.2%,5/49)大肠菌群计数超过100 CFU/g。21种被检毒力基因中有9种毒力基因被检出,以肠外致病性大肠杆菌相关基因FyuA和iss的检出率最高(均为14.3%,7/49)。药敏结果显示,菌株对β-内酰胺类抗生素和叶酸代谢抑制剂的耐药最为普遍(均为98.0%,48/49),其次为四环素(20.4%,10/49)。其中β-内酰胺类主要编码基因为blaCTX,四环素主要编码基因为tetA。研究还发现1株分离株携带多黏菌素类抗性基因mcr-9。此外,20.4%的菌株为多重耐药菌株,最多可对13种抗生素耐药。所有分离株共有4种系统发育群(A、B1、C和F),A群为优势群系(63.3%,31/49)。综上,陕西省典型冷冻食品中存在致病性大肠杆菌及耐多药菌株污染,存在通过食物链传播给人的风险。
- 徐旭杨静张鹏飞张钰嘉阮傅倩王婷李雯万阳丽常冠红张瑶王新
- 关键词:冷冻食品大肠杆菌毒力基因耐药性