王立霞
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 粪透明颤菌血红蛋白基因促进转基因矮牵牛在水培条件下生长并增强其抗涝能力(英文)被引量：4
- 2003年
- 通过PCR程序克隆粪透明颤菌 (VitreoscillastercorariaPringsheim)血红蛋白基因 (vhb)的编码区 ,将其置于CaMV 35S启动子的驱动下导入矮牵牛 (PetuniahybridaVilm)。PCR和Southern杂交分析证明vhb基因已整合到受体基因组中 ,而RT_PCR检测证实了转基因矮牵牛中vhb基因转录水平的表达。观察了转基因株系在液体培养基中对淹水和缺氧的反应 ,发现vhb的表达明显促进了水培植物的生长。为进一步研究转基因植物在低氧条件的耐受能力 ,将上述的转基因株系在静置的液体培养基中进行完全的淹没培养 ,结果显示转基因植株具有较强的低氧耐受能力 ,培养两周后能从淹没状态长出液面 ,并由此而在液体中较正常地生长 ,而未转基因的对照不能长出淹没的培养基表面 ,在 4～ 5周后因缺氧而窒息死亡。另将上述转基因株系在温室中盆栽并进行抗涝分析 ,在模拟的持续淹水胁迫中 ,转基因株系比对照表现出较强的忍受能力。这些结果预示vhb基因在抗涝作物培育和提高水培植物缺氧耐受能力的分子育种方面具有较良好的应用前景。
- 毛自朝胡鸢雷钟瑾王立霞郭俊毅林忠平
- Cre重组酶结构与功能的研究进展被引量：8
- 2002年
- Cre loxP定位重组系统来源于噬菌体P1 ,由Cre重组酶和loxP位点两部分组成。在Cre重组酶的介导下 ,设定的DNA片段可以被切除 ,可以发生倒位 ,亦可造成定点的整合。由于其作用方式高效简单 ,Cre loxP定位重组系统已在特定基因的删除、基因功能的鉴定、外源基因的整合、基因捕获及染色体工程等方面得到了有效的利用 ,在转基因的酵母、植物、昆虫、哺乳动物的体内外DNA重组方面成为一个有力的工具。这里就Cre重组酶的结构。
- 王立霞王勇胡鸢雷高音林忠平
- 关键词：CRE重组酶LOXP位点
- 利用热诱导的位点专一性重组系统在烟草中控制基因表达(英文)被引量：1
- 2003年
- 采用热激启动子Gmhsp17.5C控制Cre定位重组酶介导的DNA删除系统。在这个系统中,在热激启动子控制下的Cre重组酶的表达导致两侧带有相同方向loxp位点的CaMV35S-GUS片段从转基因烟草(Nicotiana tabacum L.cv.W38)的基因组中删除。通过定量PCR的方法鉴定这个转基因系统,显示了这个系统的重组效率。结果显示在两个小时热激处理后转基因烟草中有41%的CaMV35S-GUS片段被删除。由于热激诱导的定点重组系统有容易操作、对热敏感和无背景表达等优点,因此有利于采用这个系统在转基因植物中进行可诱导的基因操作。
- 陈明王立霞彭向雷徐惠君林忠平
- 关键词：重组酶热激基因表达烟草
- cre基因在大肠杆菌中的表达及表达蛋白活性的检测
- 2002年
- Cre重组酶来自噬菌体P1,可以识别特异的loxP位点的DNA序列 ,并进行专一性的剪切和拼接。利用PCR技术将cre基因克隆至原核表达载体pET 2 9a ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)得到了高效表达。采用DEAE 5 2柱层析的方法对表达蛋白进行了纯化。体外生物学活性检测表明 ,表达蛋白对含有同向loxP位点的质粒有切割活性。
- 王立霞张珠强胡晓倩胡鸢雷高音林忠平
- 关键词：CRE基因大肠杆菌CRE重组酶基因表达
