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蕹菜过氧化物酶的分离纯化及理化性质被引量：1: 2015年; 新鲜蕹菜经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析和Superdex-200凝胶过滤层析后获得电泳纯的过氧化物酶(peroxidase,POD),该酶的比活力、回收率、纯化倍数和产率分别为35 972.96 U/mg、12.21%、168.48和211.07 U/g。该酶的亚基分子质量为42.7 kD,最适温度为40 ℃,最适pH值为 6,并且在20～50 ℃及pH 5～8的范围内具有良好的稳定性。以不同浓度的H2O2为底物,测得该酶的Km值为18.32 mmol/L。NaCl、尿素(Urea)、Zn2+、Mg2+对该酶都具有较强的激活作用,十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)、硫氰化钾(potassium thiocyanate,KSCN)、抗坏血酸(ascorbic acid,AsA)、Ba2+、Mn2+ 、Fe2+、甲醇、乙醇、正丁醇和异丙醇对蕹菜POD活力均有抑制作用,其中抗坏血酸对POD有极强的抑制作用,当浓度为0.01 mol/L时,酶活力接近于0。; 王红扬王洁李星唐云明; 关键词：蕹菜过氧化物酶分离纯化酶活力

鸭心苹果酸脱氢酶功能基团的研究被引量：2: 2014年; 分别用对氯汞苯甲酸、苯甲基磺酰氟、N-溴代琥珀酰亚胺、琥珀酸酐、乙酰丙酮、溴代乙酸、N-乙酰咪唑、二巯基苏糖醇、氯胺-T等化学修饰剂对鸭心苹果酸脱氢酶进行修饰。结果表明:半胱氨酸巯基、色氨酸侧链吲哚基和丝氨酸羟基是鸭心细胞质苹果酸脱氢酶和线粒体苹果酸脱氢酶发挥活性的必需基团;而甲硫氨酸的硫醚基、组氨酸的咪唑基、精氨酸胍基、二硫键、酪氨酸的酚羟基、赖氨酸的ε-氨基与鸭心苹果酸脱氢酶活性不直接相关,不是酶活性中心的必需基团。; 孙芳王红扬王洁李星唐云明; 关键词：苹果酸脱氢酶功能基团化学修饰

猪脑乙酰胆碱酯酶的分离纯化和性质研究被引量：3: 2015年; 通过离心、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose和Superdex-200层析等步骤,从猪脑中获得电泳纯乙酰胆碱酯酶,该酶比活力和纯化倍数分别为2.05 U/mg和26.97,酶活回收率为11.95%;该酶分子质量为257.30 kD,亚基为66.94 kD;以碘化硫代乙酰胆碱为底物时,酶的最适反应温度为37 ℃,最适pH值为7.4,且在40 ℃以下,pH 6.0～8.0有较好的稳定性;最适底物浓度为4.0 mmol/L,Km为0.94 mmol/L。Ba2+和Zn2+对该酶有强烈的抑制作用,而低浓度Mg2+对该酶有激活作用。; 王洁李星王红扬唐云明; 关键词：乙酰胆碱酯酶猪脑分离纯化

甘薯叶酸性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究被引量：2: 2015年; 以新鲜甘薯老叶为材料,经过匀浆、硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Superdex-200凝胶层析等步骤后,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定获得了电泳纯的酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP),纯化后ACP比活力为251.49 U/mg,纯化了169.07 倍,回收率为3.50%。酶学性质研究结果表明:ACP为单亚基酶,全酶分子质量为42.3 kD,单亚基分子质量为41.2 kD;最适反应温度65 ℃,最适pH 5.2;在40 ℃以下和pH 4.0～6.0范围内酶活性较稳定;以对硝基苯磷酸二钠为底物时,测得其米氏常数Km值为0.258 mmol/L;Ca2+和Mg2+对ACP酶活性有明显激活作用,K+和Li+对ACP酶活性无影响,甲醇、乙二胺四乙酸和草酸对ACP酶活性的抑制作用较大;Hg2+和Ag+对ACP酶活性的抑制作用非常明显。; 李星王洁王红扬唐云明; 关键词：甘薯叶酸性磷酸酶分离纯化

葡萄糖氧化酶的分离纯化方法: 本发明属于酶工程技术领域，具体涉及葡萄糖氧化酶的分离纯化方法。本发明要解决的技术问题是提供一种高效分离纯化葡萄糖氧化酶的方法。本发明的技术方案是葡萄糖氧化酶的分离纯化方法，包括如下步骤：a、粗酶液的制备；b、DEAE-S...; 唐云明王洁李星王红扬方玲孙才云; 文献传递

蕹菜叶片过氧化物酶的分离纯化、酶学性质及固定化研究: 过氧化物酶(Peroxidase，POD，EC1.11.1.7)是一类在生物体内普遍存在的、由单一肽链和铁卟啉组成的血红蛋白类氧化酶，催化由H2O2参与的氧化反应，例如参与胺类和酚类化合物的氧化反应。POD在生物体内发挥...; 王红扬; 关键词：过氧化物酶分离纯化酶学性质固定化方法植物叶片; 文献传递

蕹菜叶过氧化物酶功能基团的化学修饰被引量：1: 2016年; 为研究蕹菜叶面的的功能基团,将分离纯化得到的电泳纯的蕹菜过氧化物酶,分别用乙酰丙酮、顺丁烯二酸酐,二巯基苏糖醇、氯胺-T、溴代乙酸、对氯汞苯甲酸、苯甲基磺酰氟、N-乙酰咪唑选择性地对其进行化学修饰,并测定修饰前后酶活力变化。结果表明:精氨酸残基、赖氨酸残基、组氨酸残基和巯基可能是蕹菜过氧化物酶发挥活性的必需基团,而甲硫氨酸硫醚基、丝氨酸残基和酪氨酸酚羟基可能不是蕹菜过氧化物酶活性中心的必需基团。; 王红扬孙才云黄忙唐云明; 关键词：蕹菜过氧化物酶功能基团化学修饰

蕹菜过氧化物酶固定化条件分析及固定化对其理化性质影响被引量：1: 2014年; 利用0.2%聚乙烯醇-海藻酸钠(PVA-CA)作载体,饱和硼酸作交联剂,CaCl2作固定剂固定蕹菜POD,通过单因素试验探究了各个因素对固定化的影响;再通过正交实验分析,发现在饱和硼酸-6%CaCl2,固定化时间为45min,载体与酶液比例为1∶2和0.2%PVA-3%CA条件下固定化蕹菜叶POD最佳.固定化酶的最适温度、温度稳定性均升高,并且重复使用7次后酶活力还剩余50%以上.; 王红扬孙才云黄忙唐云明; 关键词：固定化蕹菜过氧化物酶理化性质

葡萄糖氧化酶的分离纯化方法: 本发明属于酶工程技术领域，具体涉及葡萄糖氧化酶的分离纯化方法。本发明要解决的技术问题是提供一种高效分离纯化葡萄糖氧化酶的方法。本发明的技术方案是葡萄糖氧化酶的分离纯化方法，包括如下步骤：a、粗酶液的制备；b、DEAE-S...; 唐云明王洁李星王红扬方玲孙才云; 文献传递

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王红扬