王莹莹
- 作品数:18 被引量:22H指数:3
- 供职机构:东北农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点实验室开放基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- A型产气荚膜梭菌重组α毒素对小鼠的致病性研究被引量:1
- 2015年
- 为了研究A型产气荚膜梭菌α毒素(PLC)的致病性,采用PCR扩增编码产气荚膜梭菌α毒素去除信号肽的plc基因片段,构建重组质粒pGEX-plc,经IPTG诱导表达获得重组蛋白PLC。对纯化鉴定后的PLC蛋白进行细胞毒性试验,结果显示,感染后第4小时Hela细胞开始出现病变,并随时间延长而逐渐严重,说明α毒素对Hela细胞有毒性作用。进一步建立小鼠病理模型,重组PLC蛋白接种组与阳性细菌感染组的病理变化显示,小鼠发病迅速,腹部膨大,肠道臌气明显;组织学观察结果显示,被感染小鼠内脏器官出现不同程度的病理变化,以小肠各段尤为明显,表现为肠黏膜损伤、绒毛脱落等。上述结果为A型产气荚膜梭菌致病机制的研究奠定了基础。
- 乔艺然李兰兰郑晓星王莹莹聂思静任玉东李广兴黄小丹杨贵君
- 关键词:产气荚膜梭菌气性坏疽Α毒素细胞毒性试验
- 嗜酸乳杆菌胞外多糖对TGEV感染ST细胞分泌IFN-γ IL-6 IL-8的影响被引量:1
- 2015年
- 为研究抗病毒嗜酸乳杆菌菌株的细胞机制,利用嗜酸乳杆菌胞外多糖(EPS)作用于猪睾丸细胞(ST),以MTT法检测其是否抑制猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染,并观察IFN-γ、IL-6、IL-8的mRNA表达水平。本试验分为4组,分别是正常细胞对照组(Control组)、TGEV感染组(TGEV组)、EPS预处理感染TGEV组(EPS+TGEV)组和胞外多糖组(EPS组),在2、4、6、12、24 h时采集细胞样品,通过荧光定量PCR方法检测不同时间点各组细胞中IFN-γ、IL-6、IL-8mRNA的表达量。结果发现,EPS具有抑制TGEV感染ST细胞的效应;EPS组、TGEV组和EPS+TGEV组IFN-γ、IL-6、IL-8 mRNA表达量较Control组比都相对增加,三种细胞因子随着时间的延长,均呈现出先快速增加后减少回归到正常水平的趋势。EPS+TGEV组在感染2 h时IL-8 mRNA表达量达到最大值,4 h时IL-6、IFN-γmRNA表达量达到最大值,且均出现了叠加效应,相比正常细胞对照组差异极显著(P<0.001)。结果表明,EPS对TGEV感染ST细胞有一定的抑制作用,提高了抗TGEV感染初期IFN-γ、IL-6、IL-8 mRNA表达水平。
- 王莹莹刘文娜魏萍王子敬张萍
- 关键词:TGEVST细胞
- 产气荚膜梭菌全菌蛋白免疫学分析
- <正>产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,C.perfringens)又称为魏氏梭菌(Clostridium welchii),是一种革兰氏阳性厌氧芽孢杆菌[3],是人和动物肠道常在菌[4]。该...
- 王莹莹李广兴
- 一种检测产气荚膜梭菌NetB毒素抗体的阻断ELISA方法
- 本发明公开了一种检测产气荚膜梭菌NetB毒素抗体的阻断ELISA方法,用于产NetB毒素产气荚膜梭菌感染的早期检测,为产气荚膜梭菌病的特异性诊断和综合防治及后续科学研究提供有效的检测工具。所述阻断ELISA方法包括以下两...
- 李广兴聂思静王莹莹任玉东乔艺然
- 文献传递
- 产气荚膜梭菌全菌蛋白免疫学分析
- <正>产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,C.perfringens)又称为魏氏梭菌(Clostridium welchii),是一种革兰氏阳性厌氧芽孢杆菌[3],是人和动物肠道常在菌[4]。该...
- 王莹莹李广兴
- 文献传递
- 产气荚膜梭菌全菌蛋白免疫学分析
- 产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,C.perfringens)又称为魏氏梭菌(Clostridium welchii),是一种革兰氏阳性厌氧芽孢杆菌,是人和动物肠道常在菌.该菌在繁殖过程中能产...
- 王莹莹李广兴
- 关键词:鸡坏死性肠炎产气荚膜梭菌免疫原性
- 文献传递
- 植物乳杆菌对仔兔大肠杆菌性腹泻的影响
- 王莹莹
- 产气荚膜梭菌NetB毒素基因重组植物乳酸杆菌疫苗免疫的组织学研究被引量:2
- 2018年
- 为了评估表达产气荚膜梭菌NetB毒素的重组植物乳酸杆菌口服活菌疫苗对鸡的免疫保护效果,分别进行了重组活菌疫苗的免疫和产气荚膜梭菌攻菌试验。设置3组免疫组雏鸡,于7~28日龄分别连续免疫pSIP409空载体植物乳酸杆菌、pSIP409-Net B重组植物乳酸杆菌和灭菌PBS;设置4组攻菌组雏鸡,免疫方法同上,免疫后于43~47日龄连续口服产气荚膜梭菌(设置PBS免疫组不攻菌只口服等量PBS对照)。通过免疫后肠道分离重组菌、病理组织学检查疫苗对雏鸡组织器官有无损害作用及保护作用;攻菌后细菌分离计数、剖检肠道病变评分来评价疫苗的免疫水平。结果显示,免疫后2周仍可在免疫鸡的小肠、盲肠段分离到重组菌;组织学检查发现与对照组相比重组疫苗的免疫没有对雏鸡组织器官产生损害作用;NetB攻菌组的肠道损伤情况较空载体攻菌组和PBS攻菌组轻微;NetB攻菌组的肠道病变评分低于空载体攻菌组和PBS攻菌组。表明所构建的重组口服活菌疫苗安全有效,结果为重组植物乳杆菌表达系统作为口服疫苗应用提供了理论依据。
- 张艳周庆民冯万宇徐馨黄健王靓靓李兰兰王莹莹郑晓星李广兴
- 关键词:产气荚膜梭菌植物乳酸杆菌组织学检查
- A型产气荚膜梭菌主要抗原蛋白筛选及其免疫保护作用
- 产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)最初是William Hery Welch发现的,因而又被命名为魏氏梭菌(Clostridium welchii),是一种G+厌氧芽孢杆菌。在繁殖过程中,C....
- 王莹莹
- 关键词:鸡坏死性肠炎产气荚膜梭菌抗原蛋白免疫保护试验
- 重组产气荚膜梭菌plc基因植物乳酸杆菌的免疫效果评价
- 2018年
- 为了评估表达产气荚膜梭菌α毒素plc基因的重组植物乳酸杆菌口服活菌疫苗的免疫保护效果,分别进行了重组活菌疫苗的免疫和产气荚膜梭菌攻菌试验。免疫组雏鸡分为3组,于7~28 d分别连续免疫p SIP409空载体植物乳酸杆菌、pSIP409-plc重组植物乳酸杆菌和灭菌PBS;攻菌组雏鸡免疫方法同上,于43~47 d连续口服产气荚膜梭菌(设置PBS免疫组不攻菌只口服等量PBS对照)。通过病理组织学检查疫苗对雏鸡组织器官的损害作用; ELISA检测抗体动态变化、攻菌后细菌分离计数、剖检肠道病变评分、雏鸡体重变化和免疫器官发育情况来整体评价疫苗的免疫水平。结果显示,与对照组相比重组疫苗的免疫没有对雏鸡组织器官产生损害作用,plc特异性抗体IgG和s IgA水平检测显示,抗体水平随日龄增长呈现上升趋势,且与未免疫组有显著和极显著差异(P <0.05,P <0. 01);攻菌后免疫组雏鸡各项指标在短暂下降后很快升高,且明显高于未免疫组雏鸡。攻菌组各项试验也证明,我们的重组口服活菌疫苗对产气荚膜梭菌攻击雏鸡起到很好的保护作用。
- 张艳周庆民冯万宇徐馨黄健王新李兰兰王莹莹郑晓星宁秀云李广兴
- 关键词:产气荚膜梭菌植物乳酸杆菌免疫保护