王蕴华
- 作品数：10 被引量：80H指数：3
- 供职机构：内蒙古农牧业科学院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区科技厅科技攻关项目内蒙古自治区自然科学基金内蒙古自治区农牧业科技创新基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 苯酚-硫酸法测定杏鲍菇多糖方法的研究被引量：64
- 2008年
- 本实验研究了苯酚-硫酸法测定杏鲍菇多糖含量时各因素对结果的影响,并对这些因素进行了优化。通过实验发现,波长为485nm、苯酚用量1.4ml、反应温度40℃、反应时间15min,在10.00～70.00μg/ml范围内吸光度与被测物含量呈良好的线性关系,相关系数r为0.9996,平均回收率99.2%,相对标准偏差(RSD)为1.16%。
- 郭金龙陈有君孙国琴郭九峰王蕴华朱晓清聂奇森
- 关键词：杏鲍菇多糖苯酚-硫酸法
- 葡聚糖外切酶和葡聚糖内切酶基因密码子的优化及表达被引量：3
- 2017年
- [目的]合成经过密码子优化的葡聚糖外切酶和葡聚糖内切酶基因,并将2个基因在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)中进行分泌表达。[方法]对瘤胃真菌(Piromyces rhizinflatus,P.rhizinflatus)的外切葡聚糖酶cbhYW23-1基因(Gen Bank登录号:EU314937.1)和产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes,F.succinogenes)的内切葡聚糖酶end-1基因(Gen Bank登录号:X88561.1)进行L.lactis MG1363密码子偏爱性优化,并在2个基因的上游和下游分别引入ClaⅠ/XbaⅠ和Hind Ⅲ酶切位点,得到含有优化的cbhYW23-1基因和end-1基因的克隆载体p UC57-cbhYW23-1和p UC57-end-1;通过酶切后分别连接到构建的组成型分泌载体p MG36e+P32+SPusp45上,得到2个基因的表达载体,然后电转至L.lactis MG1363中,利用红霉素抗性筛选得到高拷贝转化重组子;以CMC-Na(羧甲基纤维素钠)为底物验证其活性及表达情况。[结果]成功地构建了cbhYW23-1基因和end-1基因的分泌型表达载体,2个基因均能够在L.lactis MG1363中高效稳定表达,2株重组菌株表达的外切葡聚糖酶酶活和内切葡聚糖酶酶活分别为118.80 U/mL和294.32 U/mL。[结论]密码子优化后的2个纤维素酶基因在L.lactis中获得理想稳定的表达,其高效基因工程菌的构建为将来实现这2种纤维素酶的工业化生产奠定了技术基础。
- 苏少锋萨初拉刘红葵赵小庆吴青海其布日王蕴华呼和
- 关键词：内切葡聚糖酶克隆密码子优化
- 瘤胃枯草芽胞杆菌的分离鉴定及其木聚糖酶基因的克隆和在乳酸球菌中表达的研究被引量：2
- 2013年
- 通过形态学和16S rDNA序列分析方法,从绵羊瘤胃内容物中分离得到的细菌中鉴定出枯草芽胞杆菌。根据GenBank中已知Bacillus subtilis木聚糖酶基因序列设计带有酶切位点的引物,克隆到2条不同的木聚糖基因序列。通过酶切和连接等相关分子方法成功构建出以pMG36e为载体的表达木聚糖酶的重组质粒,转化到乳酸球菌粒MG1363后,均能高效表达,酶活性分别为28.29 U/mL和7.11 U/mL,比原枯草芽胞杆菌酶活2.17 U/mL高出13.04倍和3.28倍。
- 苏少锋呼和王超刘红葵王蕴华
- 关键词：瘤胃微生物枯草芽胞杆菌木聚糖酶基因
- 沙冬青脱水素基因的克隆及对紫花苜蓿的遗传转化
- 聂利珍郭九峰孙国琴刘红葵乔慧蕾王蕴华刘永志
- 瘤胃表皮葡萄球菌的分离鉴定及其β-葡聚糖酶基因的克隆和在乳酸球菌中表达的研究被引量：1
- 2013年
- 为将瘤胃微生物纤维降解酶基因转化到乳酸菌中,从绵羊瘤胃内容物中分离到1株能够降解羧甲基纤维素钠的细菌,经过形态特征及细菌16SrDNA序列鉴定为表皮葡萄球菌。根据表皮葡萄球菌在GenBank中公示的β-葡聚糖酶基因序列设计PCR扩增引物,克隆到2个β-葡聚糖酶基因序列。将2个β-葡聚糖酶基因序列与载体pMG36e连接,构建β-葡聚糖酶基因表达载体,转化到大肠杆菌,并进一步转化到乳酸球菌MG1363,均能表达β-葡聚糖酶,表达酶活达1.47U/mL和1.54U/mL,比原表皮葡萄球菌酶活0.99U/mL高出1.49倍和1.56倍。
- 呼和苏少锋刘永志刘红葵王蕴华
- 关键词：瘤胃微生物表皮葡萄球菌基因表达
- 柠条粉栽培玉皇菇的初步研究
- 2006年
- 柠条是内蒙古干旱、荒漠和瘠薄地区恢复生态建设的重要植物资源,在防风固沙中发挥重要的生态作用。自然更新平茬下来的老枝含有丰富的蛋白质、碳水化合物及矿质营养,充分合理开发这一资源将关系到柠条防护林建设的顺利进行。经玉皇菇菌丝体的酶解和生物转化,柠条粉生物转化率达到106.9%时,消耗柠条培养料45.1%,同时产生54.9%的优质生物菌体蛋白饲料,所以合理开发柠条资源是实现柠条多层次加工利用增值的有效途径。
- 朱晓清王蕴华孙国琴
- 关键词：柠条栽培
- 离子束注入技术在食用菌育种上的应用进展被引量：8
- 2011年
- 离子束是一束具有能量的带电粒子,注入细胞内可引发染色体变异。离子注入诱变育种以变异率高、变异谱宽、变异稳定快、技术稳定可靠、简便易行的优点被广泛地应用于植物、微生物育种和外源DNA大分子转导。在食用菌诱变育种方面选育了耐高温的杏鲍菇、阿魏菇,优质生物转化率高的白金针、鸡腿菇、姬松茸,经济高效的灵芝漆酶菌株,多糖含量显著提高的香菇、猴头菇、阿魏菇等优质菌株,与菌丝体生长速度和生物转达化率呈正相关。
- 孙国琴邢丽萍王玉芬朱晓清王蕴华
- 关键词：离子束食用菌
- 抗旱植物沙冬青对植物激素反应特性的研究被引量：2
- 2009年
- 以沙冬青为材料,选用茎尖、茎段、子叶和下胚轴为外植体进行组织培养,主要研究植物激素6-BA、KT在芽分化中的作用,结果表明:茎尖和茎段在含1mg/L和2mg/L 6-BA的培养基上,形成了玻璃化的丛芽而死亡,在含低浓度6-BA(0.5mg/L,0.1mg/L,0mg/L)的培养基上,能够产生一定比例、无玻璃化生长正常的芽,以6-BA含量为0.5 mg/L分化的芽率较高。在子叶和下胚轴的分化过程中,0.5 mg/L的6-BA,能够提高子叶不定芽的分化频率,作用较KT明显,相反0.5 mg/L KT提高了下胚轴不定芽的分化。
- 贾利敏郭九峰孙国琴乔慧蕾王蕴华
- 关键词：沙冬青激素
- 植物乳杆菌野生质粒分析及其提取方法的优化
- 2018年
- 乳酸菌质粒提取研究具有很长的历史。目前已有多个有效的乳酸菌质粒提取方法被报道,其中多数以乳酸球菌为研究对象,而植物乳杆菌质粒提取有效方法报道较少。该研究以植物乳杆菌为研究对象,通过对比分析并优化已报道的乳酸菌质粒提取方法,得到了高效且适于平台期植物乳杆菌野生质粒的提取方法。通过该方法进一步分析了植物乳杆菌野生质粒数和高拷贝质粒,为后续构建植物乳杆菌表达系统所需供体质粒和受体菌株提供了重要依据。
- 萨初拉苏少锋吴青海其布日高娃王蕴华刘红葵呼和
- 关键词：植物乳杆菌质粒
- 脱水素基因转化紫花苜蓿及其初步抗旱性分析
- 2013年
- 为了获得抗旱性较强的转基因苜蓿,试验以紫花苜蓿品种"中苜2号"作为基因转化受体,将沙冬青脱水素基因通过农杆菌介导,转化到"中苜2号"中。试验结果表明,子叶和下胚轴作为外植体愈伤组织诱导频率最高,外植体与农杆菌的共培养时间以5d为最佳,试验共获得126株抗性再生植株;PCR和RT-PCR鉴定后,得到了11株阳性转基因苜蓿;通过干旱处理后,经初步的表型和脯氨酸分析显示,转基因苜蓿具有较强的抗旱能力。
- 聂利珍郭九峰孙国琴刘红葵乔慧蕾王蕴华刘永志
- 关键词：紫花苜蓿脱水素基因
