秦利军
- 作品数：39 被引量：144H指数：7
- 供职机构：贵州大学更多>>
- 发文基金：贵州省科技计划项目国家科技重大专项中国烟草总公司科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 丹参不同愈伤组织诱导及遗传转化体系优化被引量：5
- 2017年
- 为了获得满足不同目的组织培养材料和稳定高效的遗传转化体系,该研究以丹参叶片和茎段为外植体,采用含不同浓度的植物激素(植物生长物质)的Murashige Skoog(MS)培养基,探索诱导丹参产生不同愈伤的条件;采用正交法考察浸染时间、共培养时间、筛选压等对农杆菌介导的丹参遗传转化体系的影响,并根据出芽率及转化阳性率优化丹参遗传转化体系。结果表明:(1)能较快诱导丹参叶片产生愈伤的是MS+0.5mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)2,4-D;诱导茎较快产生愈伤的是MS+0.1mg·L^(-1)NAA+0.5 mg·L^(-1)6-BA;1 mg·L^(-1)反式玉米素(ZR)可能有利于诱导产生含有丹参酮的愈伤组织;1.0 mg·L^(-1)2,4-D较易诱导丹参愈伤组织生根。(2)以卡那霉素为筛选剂时农杆菌GV3101介导的丹参遗传转化的条件为浸染5 min、共培养1 d、卡那霉素30 mg·L^(-1)筛选,经PCR鉴定转基因阳性率为60%;而用10 mg·L^(-1)链霉素筛选阳性率达70%。该研究结果确定了丹参不同愈伤组织诱导条件,明确了以卡那霉素为筛选剂时农杆菌GV3101介导的丹参遗传转化的条件,换用10 mg·L^(-1)链霉素筛选时体系更加稳定、更易操作、更易重复。
- 张林甦邵芬娟秦利军
- 关键词：丹参愈伤
- 烟草NtCYP82E4v1基因干涉植株对烟蚜抗性的影响
- 普遍且频繁发生的蚜虫危害对农业生产造成严重损失,抗虫基因的挖掘可为培育抗虫烟草新种质提供理论基础.本研究以烟碱去甲基酶基因CYP82E4v1构建RNA 干涉载体,转化烟草品种K326,对T1 代植株烟碱及降烟碱含量、蚜虫...
- 赵丹秦利军赵德刚
- 关键词：烟草烟碱蚜虫
- 一种快速高效的农杆菌介导的烟草种子遗传转化方法
- 本发明公开一种快速高效的农杆菌介导的烟草种子遗传转化方法。该方法的主要步骤包括：成熟烟草种子经适度研磨后用作遗传转化材料，调整农杆菌菌液浓度至适当值以用于侵染受体材料，依次经共培养、播种、GUS组织化学染色和PCR扩增后...
- 赵德刚张祎秦利军赵丹杜致辉祖庆学余婧
- 文献传递
- 共转化法获得HAK1基因高表达烟草提高植株钾吸收能力被引量：21
- 2013年
- 通过农杆菌介导,将仅含钾转运体蛋白基因HAK1和烟草TMV抗性蛋白基因CN的pSH-TH表达载体和仅含选择标记基因GUS::NPTII的pSH737表达载体共转化烟草K326,从抗性转化苗中筛选出32株T0代转基因植株,自交分离后经筛选获得43株无选择标记的T1代转基因烟株,Southern blotting分析和PCR产物测序结果证明HAK1及CN功能基因已整合到烟草基因组中,且不含标记基因。转基因植株中的钾转运相关基因表达分析表明,细胞质膜P-H+-ATPase基因NHA1和烟草无机焦磷酸酶基因NVP1表达上调,烟草液泡膜V-H+-ATPase基因VAG1表达下调;而烟草钾外流通道蛋白基因TORK1表达在株系T1-87中下调,其余株系均上调;HAK1表达量除了在株系T1-141中下调外,在其他所有株系中均上调,其中株系T1-12、T1-51、T1-87和T1-100的HAK1表达量比野生型高3倍以上。株系T1-51、T1-87和T1-100的根系活力、ATPase活性、阳离子交换量(CEC)及钾含量均显著高于野生型,表明钾离子转运体基因HAK1超量表达显著提高了烟草植株的富钾能力,所获得的无标记的安全转基因株系可作为优质烟叶品质培育的亲本材料。
- 谭颖秦利军赵丹赵杰宏赵德刚
- 关键词：烟草共转化钾
- 镉胁迫对不同品种辣椒种子萌发及苗期抗性生理的影响被引量：12
- 2021年
- 辣椒(Capsicum annuum L.)不仅是重要的蔬菜和调味品,也是贵州的主导产业之一,但耕地镉(Cd)污染严重制约了辣椒产业的发展。本研究以前期筛选的耐镉辣椒品种LCL 4和LCL 6为材料,研究CdCl_(2)胁迫对两品种种子萌发及理化指标的影响。结果表明,在200 mg·L^(-1) CdCl_(2)胁迫条件下,LCL 4和LCL 6种子发芽率分别为97%和96%,而发芽势分别为95%和93.33%,表明CdCl_(2)胁迫对LCL 6品种种子的萌发指标影响较大;150 mg·L^(-1) CdCl_(2)胁迫处理下两品种抗氧化酶(Antioxidant enzymes,AOEs)表现出一定差异。AOEs酶活在LCL 4和LCL 6中总体表现为先增加后降低的趋势,SOD、POD和CAT酶活在镉胁迫第3天时达最大值,其中LCL 6品种中CAT、POD、SOD最大值分别为235.21、981.32、756.25 U·(g·min)^(-1),而LCL 4分别为252.16、1116.05、913.73 U·(g·min)^(-1)。另外,在镉胁迫处理0~3 d内,LCL 6的MDA含量均显著高于LCL 4,但在胁迫处理第5天时,LCL 4和LCL 6中MDA含量分别为6μmol·g^(-1)和5μmol·g^(-1),两者差异不显著。
- 龙春丽宋拉拉胡明文夏忠敏秦利军
- 关键词：辣椒镉胁迫种子萌发酶活性
- 超量表达NtHAK1基因烟草对不同光辐射的光合响应被引量：3
- 2013年
- 为了研究钾元素对烟草光合作用的影响,以共转化且超量表达烟草钾离子转运体蛋白基因HAK1的转基因烟草植株(T1-51、T1-87、T1-100和T1-122)为材料,研究各株系光合特征指标对不同光合有效辐射(PAR)的响应变化规律。结果表明:转基因植株的最大净光合速率皆高于野生型植株;当PAR<2 000μmol/(m2·s)时,各植株的气孔导度和蒸腾速率随PAR的增加而增大,且均高于野生型;转基因植株对水分利用率随着PAR值升高而增加。光合特征指标测定表明,超量表达NtHAK1基因的转基因植株能增加叶片的气孔导度,提高植株的净光合速率及蒸腾速率,进而增强植物的光合效率。
- 孙洪荣秦利军赵丹谭颖赵杰宏赵德刚
- 关键词：净光合速率气孔导度蒸腾速率水分利用率
- 一种快速高效的农杆菌介导的烟草种子遗传转化方法
- 本发明公开一种快速高效的农杆菌介导的烟草种子遗传转化方法。该方法的主要步骤包括：成熟烟草种子经适度研磨后用作遗传转化材料，调整农杆菌菌液浓度至适当值以用于侵染受体材料，依次经共培养、播种、GUS组织化学染色和PCR扩增后...
- 赵德刚张祎秦利军赵丹杜致辉祖庆学余婧
- 文献传递
- 叶片衰老诱导FLP重组酶删除转基因烟草外源基因的研究被引量：2
- 2019年
- 【目的】"Gene-deletor"系统可实现转基因植物中外源基因的清除。为了研究该系统在转基因烟草中对清除外源基因的作用并最终创制不含外源基因的烟草新种质。【方法】以含有"Gene-deletor"系统的转基因烟株为材料,分析外源筛合报告选融基因Bar::GUS、重组酶基因FLP在不同叶龄叶片中的表达水平,同时通过观察转基因烟草花粉中GUS蛋白的表达活性,分析外源基因GUS在花粉中的删除情况。【结果】(1)相同叶龄不同转基因烟株叶片均表现出GUS活性和对除草剂草铵膦抗性,且3个转基因烟草株系中GUS活性和对除草剂抗性都表现出随着叶龄增大而降低的特点。(2)Real-time PCR和RT-PCR结果进一步证明外源Bar::GUS基因表达水平随叶片发育成熟持续下降,而外源FLP基因的表达水平则出现先增后降的变化趋势,在测定后期两者的表达量均达到最低,(3)花粉GUS组织染色结果表明,"明,色结果降的变化趋势,特系统诱导各转基因植株中花粉外源基因清除效率不同,平均清除率分别78.3%,54.7%和75.2%。【结论】在转基因烟草中,叶片衰老特异表达基因SAG12基因启动子驱动"动启动子驱动达基因,平均清系统(LoxP/FRT)的表达不仅可引起转基因植株叶片中外源基因的特异性清除,还能诱导花粉中外源基因的删除,该技术可为进一步创制培育不含外源基因的烟草新种质提供参考。
- 秦利军李启龙赵德刚
- 关键词：烟草
- 遗传转化NrCN和NtHAK1基因提高烟草TMV抗性
- 烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)是Togaviridae 科Tobamo-virus 组单链RNA 病毒,可侵染包括茄科植物在内的350 多种植物.本研究构建含有抗病基因CN 和钾离子富集...
- 秦利军赵丹赵德刚
- 关键词：TMV富钾烟草
- 拟南芥(Arabidopsis thaliana)DWF4基因克隆、生物学信息分析及过表达载体构建被引量：1
- 2021年
- BRs(Brassinosteroids)是植物体内一种重要的类固醇激素,具有十分重要的生理功能。DWF 4是BRs生物合成的关键限速酶,显著影响BRs在植物体中的含量。本研究以拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料,利用同源克隆技术从A.thaliana cDNA中克隆到全长为1542 bp的特异性条带,测序结果表明该条带为AtDWF4基因;生物学信息分析显示该基因可编码513个氨基酸(amino acid,aa),Proscale在线预测该蛋白为亲水性蛋白,且SOPM分析表明DWF 4蛋白含有α-螺旋(alpha-helix)、β-折叠(beta-fold)、β-转角(beta-angle)等多个二级结构。同时,研究还构建了含AtDWF4基因的超量表达载体pRI 201-RdDwf 4,并遗传转化烟草K 326,已获得抗性愈伤组织及抗性芽。本研究为进一步探究过表达AtDWF4基因对烟草形态及抗逆胁迫能力的影响提供理想的实验材料。
- 韦春杨莉琴秦利军
- 关键词：拟南芥
