肖燕萍 作品数:8 被引量:11 H指数:2 供职机构: 嘉兴学院医学院 更多>> 发文基金: 浙江省教育厅科研计划 嘉兴市科技局项目 国家大学生创新性实验计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
超重力对导入大肠杆菌质粒的诱变效应 2020年 利用超重力(Hypergravity)处理导入大肠杆菌(DH5α)的质粒,研究超重力对质粒DNA的影响,为超重力作为一种诱变方法提供更充分的理论依据.研究材料经超重力(8500×g,1.5 h)多代定向处理后,利用卡那霉素抗性基因(Kan r)进行筛选,从而验证超重力对基因有一定的诱变效果.在第3代菌株中得到3株突变体,发现突变体与重组菌相比,一条链的序列发生变化.经PCR扩增测序发现:3株突变体突变位点相同,质粒DNA的部分碱基缺失.由于碱基的缺失,产生移码突变,导致提前出现终止子,蛋白质合成终止.对突变菌株继续传代培养得到相同的结果,证明了该突变的可遗传性.通过该研究,初步证实了超重力可以诱发质粒DNA的突变,拓宽了超重力作为一种诱变方法的应用范围. 施丽丽 孙献亮 冯昊 沈斌 肖燕萍 王金胜 董晶剑关键词:超重力 大肠杆菌 突变 乳腺癌T7噬菌体展示文库的构建 2015年 目的本研究拟构建人乳腺癌T7噬菌体展示文库,为进一步筛选特异性高的乳腺癌分子标志物原奠定基础。方法确诊乳腺癌患者手术标本20例,Trizol法提取总RNA,逆转录合成双链cDNA后,与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩增得到人乳腺癌T7噬菌体展示cDNA文库。结果构建了乳腺癌T7噬菌体展示cDNA文库,文库滴度2.1×107pfu/ml。随机从文库抽取50个克隆PCR扩增插入片段,电泳结果显示乳腺癌文库插入率98%(49/50)。结论成功构建了乳腺癌T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选和鉴定乳腺癌相关抗原奠定基础。 韩冬 徐煌 肖燕萍关键词:噬菌体展示 CDNA文库 乳腺癌 心室肌跨壁传导异质性、复极异质性与室性心律失常 被引量:1 2014年 在室性快速性心律失常的发病机制的研究中,代表心室肌各层细胞复极电活动不均一性的指标-跨壁复极离散度(Transmural Dispersion of Repolarization, TDR)-被认为是室速、室颤发生的重要机制,减小TDR有可能减少折返相关的心律失常。本文综述了跨壁复极离散度的变化与室性心律失常的内在机制,并初步探讨了有关防治措施。 姚鑫 肖燕萍 叶先才 韩冬 沈忠飞关键词:跨壁复极离散度 心室肌细胞 室性心律失常 Klotho基因转染促进脂肪间充质干细胞增殖的实验研究 被引量:2 2012年 目的探讨klotho基因转染对脂肪间充质干细胞(ADSCs)增殖的影响。方法将含有klotho全长基因的真核质粒转染至从脂肪组织分离的ADSCs中,采用CCK-8法测定转染后细胞增殖率,western blot法检测转染后细胞周期蛋白D1的表达变化,流式细胞术检测转染前后ADSCs的细胞周期变化。结果转染klotho基因96h后AD-SCs的细胞增殖率为170.50%;流式细胞术检测结果显示,ADSCs转染klotho基因S期和G2期细胞明显增多;west-ern blot分析显示ADSCs转染klotho基因组细胞周期蛋白D1增高。结论转染klotho基因有促进ADSCs增殖的作用。 韩冬 徐煌 郑永霞 肖燕萍关键词:KLOTHO 脂肪间充质干细胞 细胞增殖 RGD修饰载阿霉素固体脂质纳米粒的制备及体外转运能力观察 2023年 目的 制备精氨酸—甘氨酸—天冬氨酸肽(RGD)修饰的载阿霉素固体脂质纳米粒(RGD-DOX-SLNs),观察其在肠道M细胞模型中的转运能力。方法 采用不同乳化剂配方,以乳化溶剂挥发法制备固体脂质纳米粒(SLNs),通过检测SLNs的稳定性,选取较优乳化剂配方进行阿霉素包载;制备载阿霉素的SLNs(DOX-SLNs),测定粒径、表面电位及包封率,选择最优乳化剂配方,对DOX-SLNs表面进行RGD修饰,制备RGD-DOX-SLNs;以空白SLNs作为对照。使用透射电镜观察RGD-DOX-SLNs和DOX-SLNs的形态,采用CCK-8法测算与载药SLNs共培养的Caco-2细胞及293T细胞存活率以评价载体安全性。建立滤泡相关上皮单层细胞模型,分别加入含有阿霉素单药、DOX-SLNs或RGD-DOX-SLNs的HBSS液,采用荧光分光光度法测定转运小室下侧的阿霉素浓度,共聚焦显微镜观察荧光,评价RGD-DOX-SLNs和DOX-SLNs的药物转运能力。结果 选择最优乳化剂配方为1%吐温与1%泊洛沙姆188体积比2∶1,DOX-SLNs粒径、表面电位及包封率分别为(147.4±11.2)nm、(-20.0±2.3)mV、80.9%±2.8%,RGD-DOX-SLNs分别为(153.1±6.2)nm、(-22.0±1.3)mV、81.3%±0.8%。透射电镜下RGD-DOX-SLNs和DOXSLNs形态圆整,RGD-DOX-SLNs表面略粗糙。RGD-DOX-SLNs和DOX-SLNs在0~1 000μg/mL浓度范围内安全性较好。阿霉素单药组、DOX-SLNs组及RGD-DOX-SLNs组的转运量依次增高(P均<0.05);阿霉素单药组红色荧光微弱,DOX-SLNs组X-Y、Y-Z、X-Z三个切面均可见红色荧光,RGD-DOX-SLNs组红色荧光强度较DOX-SLNs增强。结论 成功制备RGD-DOX-SLNs,较DOX-SLNs对阿霉素的体外转运能力更高。 于海涛 冯梦萱 张新红 沈斌 肖燕萍 董晶剑 施丽丽关键词:药物转运 阿霉素 固体脂质纳米粒 M细胞 肝再生机制的研究进展 被引量:7 2016年 肝再生(Liver regeneration,LR)是肝脏损伤后,残余肝细胞受到各种反馈信号的刺激下,通过迅速增值来代偿受损肝细胞以及恢复肝脏的正常的生理功能。肝脏再生分为肝实质细胞再生以及肝脏组织结构的重建。再生的过程中,包括启动阶段、增值阶段以及终止阶段都有多种细胞因子参与调控。本文就近几年对肝脏再生的调控机制做一综述。 吴雄伟 郑永霞 蔺红梅 陈宇婷 黄兴望 黄珍婷 徐琴 林敏 肖燕萍关键词:肝脏 人脂肪间充质干细胞的分离、培养及鉴定 被引量:1 2012年 取脂肪吸脂术分离的脂肪细胞,在胰酶和胶原酶的作用下分离、培养ADSC并对其进行增殖能力、干细胞表面标志的测定以及转录因子水平的检测.分离、培养的ADSC在光镜下呈圆形、贴壁生长,可见小的胞浆突起.经细胞增殖曲线绘制,细胞在1~3d处于生长适应期,而3~6d处于对数生长期,8~10d后细胞增殖明显减缓.流式细胞术鉴定细胞表面标志结果显示分离培养的细胞表达间充质干细胞表面标志,而不表达造血干细胞和成纤维细胞表面标志.对培养的ADSC检测其转录因子Nanog和oct-4的表达,结果显示体外培养的ADSC在第15代仍可稳定表达Nanog和oct-4. 韩冬 徐煌 张新红 肖燕萍关键词:脂肪间充质干细胞 组蛋白甲基转移酶Ezh2在肿瘤发生发展中的研究进展 2016年 肿瘤的发病率越来越高,严重威胁着人们的健康,揭示肿瘤的发病机制已是迫在眉睫。Zeste基因增强子人类同源物2(Ezh2)作为多梳抑制复合物2(polycomb repressive complex,PRC2)的催化亚基,通过调节组蛋白修饰参与染色体的表观遗传修饰。Ezh2在多种癌组织中表达升高,如前列腺癌、直肠癌、卵巢癌等,与肿瘤的发生发展密切相关。本文就Ezh2基因在肿瘤发生发展中的作用及其机制做一综述。 何宗麟 郑永霞 董波 徐琴 张成文 肖燕萍关键词:EZH2基因 肿瘤 表观遗传