胡小波 作品数:40 被引量:167 H指数:7 供职机构: 南华大学 更多>> 发文基金: 湖南省自然科学基金 博士科研启动基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 理学 更多>>
一种胰岛素的酶免疫测定方法 本发明公开了一种胰岛素的酶免疫测定方法,包括胰岛素溶液、与胰岛素溶液反应的葡萄糖溶液、氧化剂溶液、盐酸溶液、酸式滴定管和盛放混合液的容量瓶,胰岛素的酶免疫测定方法包括以下步骤:溶液混合;由碘溶液得出剩余葡萄糖溶液含量,进... 曹朝晖 胡小波文献传递 LIGHT在自发Ⅰ型糖尿病小鼠中表达的分析 被引量:1 2016年 目的建立I型糖尿病NOD小鼠模型,探讨LIGHT在I型糖尿病模型NOD小鼠中的表达及意义。方法监测雌性NOD小鼠血糖、胰岛素水平;NOD小鼠分为4组,即未发病5周龄及11周龄组、发病1 w和2 w组。采用qRT-PCR、Western blot、免疫组化技术分析NOD小鼠胰腺组织LIGHT的mRNA、蛋白表达变化;ELISA法检测血清胰岛素、可溶性LIGHT及Th1细胞因子IFN-γ含量;HE染色检测胰岛炎,对胰岛炎评分,并对血清LIGHT含量与IFN-γ含量及胰岛炎积分进行相关性分析。结果糖尿病发病组NOD小鼠胰腺组织LIGHT基因的mRNA和蛋白表达及血清LIGHT浓度均明显高于未发病的5周龄组(P<0.05),血清中Th1细胞因子IFN-γ分泌显著增加。血清LIGHT含量与IFN-γ水平及胰岛炎积分呈明显正相关(r1=0.52,r2=0.87,P<0.01)。结论 LIGHT在NOD小鼠胰腺组织中的表达上调,可能影响Th1细胞因子IFN-γ的分泌及胰岛炎程度,血清LIGHT能反映I型糖尿病胰岛炎的严重程度。 曹朝晖 王五洲 李俐娟 李亚林 胡小波关键词:LIGHT 胰岛炎 肿瘤细胞靶向性白细胞介素4(IL-4)融合蛋白的研究(英文) 被引量:1 2004年 白细胞介素 4受体 (IL 4R)特异地存在于多种肿瘤细胞表面 ,这为某些肿瘤的治疗提供了一个靶向标记。在以前的研究中 ,人白细胞介素 4 (hIL 4 )与白喉毒素 (DT)的融合蛋白 (DT4H)被构建 ,且它对某些肿瘤细胞系的高毒性得到了证明。但是 ,由于毒素部分的强免疫原性 ,它可以诱导人体的免疫反应。该研究中我们构建了白细胞介素 4与绿脓杆菌外毒素 (PE) 2 5 3~ 6 0 8aa的融合蛋白 ,并在其N端添加了 6×His标记方便纯化 ,在其C端添加了KDEL提高毒性。为了改善与IL 4R的亲和力我们将IL 4进行了环式重组 ,构建的融合毒素 ,H4 0 4K ,经DEAE$CSepharoseFastFlow及Ni NTA纯化后 ,纯度达 90 %。纯化后的H4 0 4K与DT4H相似 ,对U2 5 1高度敏感 ,对MCF 7及HepG2中度敏感 ,且我们首次证实该毒性不会被兔抗白喉毒素的多克隆抗体所抑制。这些研究表明 ,H4 0 张育坚 胡小波 李素霞 田丽萍 杨胜利 龚毅关键词:绿脓杆菌外毒素 肿瘤治疗 白细胞介素4 白细胞介素4受体 重组人睫状神经营养因子的表达及其临床前药效学研究 被引量:1 2006年 目的:人睫状神经营养因子(hCNTF)是神经营养因子(NGF)家族以外的一种神经营养因子,具有明显的减轻体重的作用。为了将hCNTF的研究逐步推向应用,开展了hCNTF减肥作用的临床前相关研究。方法:依据国内减肥药临床前药效学指导原则,设计并实施了动物实验,建立了各种指标与人类肥胖最为相似的肥胖SD大鼠模型,分别测定了重组hCNTF用药后大鼠的体重、血清三酰甘油、总胆固醇、肾周围脂肪重量和肥胖指数。结果:在200μg/(kg·d)剂量下,重组hCNTF对减轻肥胖SD大鼠体重、减轻其右肾周围脂肪及改善体型都有一定的效果;400μg/(kg·d)以上剂量的重组hCNTF,对减轻肥胖SD大鼠体重、改善体型、降低血清三酰甘油都有极其显著的效果;惟有剂量达到1600μg/(kg·d),重组hCNTF才能降低血清总胆固醇含量。结论:所获得的重组hCNTF在肥胖SD大鼠动物模型上具有十分良好的减肥效果。 胡小波 颜志强 沈雁 杨胜利 龚毅关键词:肥胖 人睫状神经营养因子 临床前研究 重组免疫毒素TRAIL DR5/ScFv-PE25的构建及活性检测 2016年 目的:构建绿脓杆菌外毒素PE融合抗TRAIL DR5单链抗体基因TRAIL DR5/Sc Fv的原核表达载体,诱导表达,并检测其生物学功能。方法:根据TRAIL DR5单链抗体HGS-ETR2的氨基酸序列,优化密码子,合成全长的编码序列作为模板,PCR技术扩增TRAIL DR5/Sc Fv基因,基因重组技术将两段TRAIL DR5/Sc Fv与PE25基因连接,组成TRAIL DR5/Sc Fv-PE25融合基因。重组质粒转化E.coli BL21(DE3),离子交换层析和亲和层析技术纯化重组蛋白。WST-8技术检测细胞毒性。结果:成功构建了重组免疫毒素基因TRAIL DR5/Sc Fv-PE25,重组蛋白经纯化后,每升发酵液可得到4.95 mg融合蛋白(纯度95%),该融合蛋白具有抑制A431/H9和Panc 3.014癌细胞增殖的作用。结论:成功表达并纯化TRAIL DR5/Sc Fv-PE25重组免疫毒素,检测其生物学活性,为TRAIL DR5阳性癌细胞的靶向治疗研究奠定了基础。 胡小波 谢聪 张彩平 龙石银 曹朝晖关键词:绿脓杆菌外毒素A 免疫毒素 Neu-P11抑制高糖高脂喂养大鼠体重的增长和脂肪的异位沉积 被引量:2 2009年 目的观察Neu-P11(一种新型的褪黑素受体激动剂),对高糖高脂喂养的SD大鼠体重及脂肪的影响。方法高糖高脂喂养SD大鼠5个月,建立肥胖动物模型。分组给予腹腔注射生理盐水、褪黑素(4mg/kg)、Neu-P11(10mg/kg),每周监测体重和食物摄入量。实验末处死动物,分离腹部脂肪组织并称重。结果与生理盐水组比较,Neu-P11或褪黑素处理组肥胖大鼠体重的增长明显受到抑制,腹部脂肪减少,各组相对摄食(每100g体重摄食量)无明显差异。结论Neu-P11能降低高糖高脂喂养大鼠的体重增长和脂肪沉积。 佘美华 胡小波 邓小健 郭正宇 尹卫东关键词:褪黑素 体重 高糖高脂饮食 羧甲基壳聚糖—锌络合物的制备及对大鼠血清SOD活性的影响 被引量:1 2011年 目的:研究羧甲基壳聚糖与锌(Ⅱ)络合物的制备并初步探讨其对抗氧化酶SOD活性的影响。方法:用水溶性的羧甲基壳聚糖与锌(Ⅱ)制备络合物,用红外、紫外光谱等初步分析络合物的理化性质,并研究该络合物对饲高糖高脂大鼠血清SOD活性的影响。结果:紫外、红外光谱表明锌可与羧甲基壳聚糖发生络合反应;羧甲基壳聚糖—锌能显著提高饲高糖高脂大鼠SOD活性(P<0.05)。结论:羧甲基壳聚糖可与锌(Ⅱ)形成络合物,并能增强SOD活性。 曹朝晖 李邦良 胡小波关键词:SOD 甲壳低聚糖对2型糖尿病造模大鼠胰岛β细胞的保护作用 2011年 目的观察甲壳低聚糖(COS)对2型糖尿大鼠胰岛β细胞的保护作用。方法试验大鼠经腹腔注射STZ 2周后,挑选葡萄糖耐量异常者继续给予高糖高脂饲料喂养,同时试验组用COS灌胃给药。分别在第0、4、8、12周剪尾取血测定空腹血糖及胰岛素水平,第16周末,股动脉取血,分离胰腺并固定做HE染色和胰岛原位细胞凋亡检测。结果 COS组空腹血糖、胰岛素水平和胰岛β细胞凋亡比例明显低于模型组。结论甲壳低聚糖具有改善胰岛素抵抗,保护胰岛β细胞的作用。 曹朝晖 封少龙 江伟凡 董世访 李邦良 胡小波关键词:甲壳低聚糖 胰岛素抵抗 胰岛Β细胞 小鼠间充质干细胞脂向分化过程中miRNA-143的表达 被引量:5 2012年 目的探讨小鼠间充质干细胞(MSCs)脂向分化过程中miRNA-143(miR-143)的表达,为阐明MSCs脂向分化的调控机制提供新线索。方法采用全骨髓体外分离结合差速贴壁法纯化扩增C57BL/6小鼠MSCs,将第5代MSCs采用脂肪细胞分化诱导剂进行成脂诱导。运用miRNA芯片技术比较MSCs组和脂肪细胞组中miR-143的表达,并通过实时定量PCR技术验证。结果成功分离、纯化和培养MSCs;MSCs经脂肪诱导剂诱导后,胞内大量脂滴形成,油红O染色阳性。MiRNA芯片及实时定量PCR结果均表明miR-143在MSCs脂向分化过程中显著上调(3.73±0.42 vs 1.00±0.14,P<0.01)。结论 miR-143可能参与调控MSCs的脂向分化。 凌宏艳 胡小波 奉水东 杨丝丝 何剑琴 张恺芳 廖端芳关键词:间充质干细胞 MIRNA芯片 实时定量PCR 某市三甲医院护士中医体质分布及影响因素分析 被引量:4 2015年 目的通过调查了解某市三甲医院临床护士的中医体质分布及影响因素,为该群体调理偏颇体质向平和质转化,提高护理工作效率和生活质量提供参考。方法采用现况调查方法,通过问卷调查获取临床护士中医体质和影响因素相关信息,采用描述性统计、单因素分析和Logistic回归方法对数据进行分析。结果临床护士中医体质分布,平和质仅为23.01%,阳虚质所占比率最大,占43.45%。单因素分析显示,不同职称组间、年龄组间、学历组间和疲惫感组间的偏颇体质发生率差异有统计学意义(P<0.01)。Logistic回归分析显示,年龄、学历和疲惫感对偏颇体质的发生有影响。结论三甲医院临床护士的偏颇体质比例相对普通人群偏高,职称、年龄、学历和疲惫感是偏颇体质发生的影响因素。 杜振芳 王五洲 胡小波 谢红卫关键词:临床护士 中医体质 影响因素