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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白A
  • 1篇点突变
  • 1篇融合表达载体
  • 1篇突变
  • 1篇快速纯化
  • 1篇基因
  • 1篇基因产物

机构

  • 1篇中国科学院上...

作者

  • 1篇杨新颖
  • 1篇李伯良
  • 1篇胡明
  • 1篇梁镇和
  • 1篇江智红

传媒

  • 1篇生物工程学报

年份

  • 1篇1994
4 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
易于基因产物加工和快速纯化的融合表达载体被引量:5
1994年
从Protein A基因酶切分离出编码完整的结合IgG的B、C区域(PABC)的相应DNA片段,克隆进噬菌体M13。通过人工合成寡聚核苷酸引物,突变修饰B、C区域内分别含有的羟胺裂解位点,变Asn-Gly为Asn-Ala。利用突变修饰后的PBACm编码基因片段,构建了一组含有不同阅读框架的融合蛋白表达载体。进一步分别重组克隆了含人工合成的人胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、人和牛生长激素释放因子(GRF)等基因的表达质粒,在大肠杆菌中高效表达出PABC-IGF-Ⅰ、PABC-hGRF、PABC-bGRF及其衍生型融合蛋白。经SDS-PAGE测定分析,每立升摇瓶的融合蛋白产量可达100mg以上。上述高效表达的PABC融合蛋白,通过固相亲和层析柱一步分离,获得SDS-PAGE鉴定为近均一分子量纯化的PABC融合表达产物。
李伯良杨新颖江智红胡明梁镇和
关键词:蛋白A点突变
共1页<1>
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