胡海梅 作品数:28 被引量:42 H指数:4 供职机构: 广东药学院生命科学与生物制药学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省研究生科研创新项目 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 经济管理 理学 生物学 更多>>
BACE1基因RNA干扰质粒的构建及干扰效果的鉴定 被引量:1 2013年 目的构建BACE1基因干扰质粒,并研究其在neuro-2a细胞中的表达,为以其为靶点的基因治疗提供稳定转染的质粒。方法选择人、小鼠和大鼠的BACE1基因共有序列为干扰靶点,设计3组连接有GFP的干扰质粒,将构建好的质粒转染neuro-2a细胞,通过Real time RT-PCR及Western-blotting的方法分别在RNA及蛋白质水平上检测BACE1的表达,以分析其干扰的效率。结果经酶切及测序证实,插入的DNA片段序列与设计序列完全一致。与空质粒对照组相比,3个干扰靶点对BACE1基因的表达均有不同程度的抑制作用。其中pYr-1.1-siBACE1在mRNA水平及蛋白质水平干扰效果均最好。结论成功构建了BACE1基因的干扰质粒pYr-1.1-siBACE1,并能有效抑制neuro-2a细胞内源性BACE1基因表达,为靶向BACE1基因的治疗提供了有力的工具。 张璇 胡海梅关键词:BACE1 基因 RNA干扰 基于胜任力模型的保险职业经理人薪酬体系设计研究 中国的保险行业近年来取得了突飞猛进的发展,主要表现为保险资源得到了不断开发利用、保险市场得到了进一步的开拓和规范及保险产品的结构得到了很大的改善。同时随着保险行业对经济进步和社会发展的影响与日俱增,保险业的地位也逐步提升... 胡海梅关键词:保险 职业经理人 胜任力 薪酬体系 文献传递 集体教研活动的改革与探索 2013年 集体教研对于发挥教师团队合作精神,取长补短,集思广益,具有不可或缺的作用。我们在前期工作的基础上改变传统的集体教研活动的模式,让学生参与集体教研活动,凸显学生的主体地位,并在集体教研活动的制度化与规范化方面做了有益的尝试。 余雪松 贾伟章 胡海梅 王丁丁 胡丽莉 黄树林基于心理契约的保险职业经理人激励机制创新研究 2013年 根据保险职业经理人的特点,分析心理契约在保险职业经理人激励机制建立中的必要性,并在此基础上构建出保险职业经理人激励机制创新模型,并在激励机制创新模型的基础上提出保险企业激励机制创新的实施策略,以期为目前保险职业经理人薪酬激励管理提供借鉴。 胡海梅关键词:心理契约 激励机制 基于胜任力的保险职业经理人绩效评价体系构建 被引量:1 2013年 在基于胜任力的保险职业经理人绩效评价体系构建中,首先引入了胜任力的概念,在相关研究成果的基础之上采用关键词频法,筛选保险职业经理人胜任要素;然后结合胜任素质词典和咨询相关专家意见,设计关于保险职业经理人的胜任力要素的调查问卷;最后对调查问卷的结果数据,使用SPSS软件进行分析,确定了我国保险职业经理人生日人力评价指标,得出保险职业经理人5因子评价模型,确定了各个胜任要素的权重,最后建立保险职业经理人绩效评价模型。 胡海梅 蒋才芳关键词:保险 职业经理人 胜任力 绩效评价体系 聚酰胺-胺形树状大分子表面修饰的研究进展 被引量:4 2014年 PAMAM是目前研究较为广泛的树状大分子之一,其本身无免疫原性、遗传毒性,作为基因载体转染效率高、毒性小、适用性广,因而在基因治疗方面有很好的应用前景。对PAMAM表面基团进行修饰,可减少表面正电荷数目,降低其细胞毒性,提高转染效率。本文主要介绍近几年PAMAM表面修饰的研究进展。 李晓琳 胡海梅关键词:基因治疗 树状大分子 PAMAM 表面修饰 鱼精蛋白/DNA复合物的构建与生物性能评价 被引量:1 2010年 目的研究非病毒基因载体鱼精蛋白/DNA复合物的制备方法及对其细胞毒性、不同量鱼精蛋白对pDNA的结合能力、体外细胞转染率。方法不同量鱼精蛋白与DNA在室温孵育后,得到鱼精蛋白/DNA复合物;用MTT法检测鱼精蛋白对HeLa子宫颈癌细胞的毒性作用,同时与PEI进行比较;利用琼脂糖电泳实验测定不同N/P比形成复合物时对DNA的阻滞情况;用结合沉淀试验比较不同量鱼精蛋白对包裹DNA的能力的影响;在荧光显微镜下观察比较它们对BEL-7402肝癌细胞转染率的大小。结果当鱼精蛋白/DNA复合物浓度升高时,对He-La子宫颈癌细胞的毒性均为0级,而聚乙烯亚胺(PEI)浓度升高时,对细胞的毒性明显增加;鱼精蛋白与质粒DNA形成复合物时所需的N/P比为1.5∶1,较PEI/DNA复合物形成时所需的N/P比2∶1要小;鱼精蛋白包裹DNA的能力随N/P比增大而增强,并且包裹DNA的能力要比PEI/DNA复合物转变得快;鱼精蛋白/DNA复合物对BEL-7402肝癌细胞的转染率较PEI/DNA复合物低,但毒性较低。结论鱼精蛋白/DNA复合物是一种制备工艺简单、细胞毒性小、对pDNA包裹能力高、转染率相对较高,具有一定应用潜力的非病毒基因载体。 胡海梅 黄宏靓 谭倩雯 杨清波 邱培元关键词:非病毒基因载体 生物性能 聚乙二醇-聚左旋赖氨酸共聚物生物降解性的研究 被引量:1 2011年 目的:研究非病毒基因载体聚左旋赖氨酸(PLL)及其聚乙二醇(PEG)修饰共聚物的生物降解性。方法:将合成的不同分子量的PLL及PEG-PLL共聚物,采用体外酶解试验,用乌氏黏度计测定不同分子量的PLL及其共聚物在不同浓度胰蛋白酶作用下的增比黏度(ηsp)并考察其变化以评价聚合物结构与其生物降解性之间的关系。结果:所合成的PEG-PLL共聚物在胰蛋白酶作用下能有效地催化其生物降解,酶解反应速度与酶浓度成线性关系(R2=0.9775)。另随着PLL分子量的增加,酶解速度降低;而随着PEG含量的增加,酶解速度加快。结论:PLL的分子量及用于修饰的PEG的量对PEG-PLL共聚物生物降解性具有一定的影响。 胡海梅 张璇 潘仕荣关键词:胰蛋白酶 生物降解性 非病毒基因载体材料聚谷氨酸-聚丙烯亚胺的合成及与DNA的结合稳定性 被引量:1 2014年 目的合成非病毒基因载体材料聚谷氨酸-聚丙烯亚胺,并考查其与DNA的结合能力及稳定性。方法以G2.0聚丙烯亚胺(PPI)为引发剂,通过开环聚合的方法,合成了聚丙烯亚胺-聚谷氨酸苄脂多臂接枝聚合物,再以G1.0聚丙烯亚胺或G2.0聚丙烯亚胺作为氨解试剂进行氨解合成了新型树枝状的聚谷氨酸-聚丙烯亚胺聚合物(MP-g-PPI)。采用红外光谱(IR)、1HNMR对聚合产物进行结构表征,通过琼脂糖凝胶电泳实验考察聚合物与DNA的结合能力,通过离心法考察了聚合物与DNA形成复合物的沉淀稳定性,通过MTT法考察聚合物在Hela细胞中的毒性,并通过测定发荧光细胞百分数获得复合物在Hek-293细胞中的转染率。结果成功合成了聚谷氨酸-聚丙烯亚胺聚合物,此聚合物可有效的与DNA结合成纳米复合物,可通过一定的空间斥力阻止复合物的聚集,且毒性较PEI 25K低,可有效介导基因的转染。结论聚谷氨酸-聚丙烯亚胺聚合物可与DNA形成稳定的复合物,此聚合物有望成为新型的非病毒基因载体材料。 张璇 杨叶雅 胡海梅 蔡青青关键词:基因载体 琼脂糖凝胶电泳 转染 基因载体MPEG-PLL共聚物与DNA形成复合物的体外研究 被引量:1 2011年 目的研究非病毒基因载体聚乙二醇单甲醚(MPEG)-聚-L-赖氨酸(PLL)共聚物的组成在体外介导基因传递的影响。方法将含有不同量MPEG的MPEG-PLL共聚物,与DNA形成复合物。测定MPEG-PLL/DNA复合物的粒径、Zeta电位,并进行凝胶阻滞分析,观察其对Hela细胞的毒性和转染率。结果 MPEG侧链并未明显影响PLL与DNA形成复合物的能力;连接MPEG能够明显降低复合物的粒径;复合物的Zeta电位随着MPEG量的增加而降低;细胞毒性取决于MPEG的量;共聚物MPEG-PLL介导体外基因传递的能力明显优于PLL。结论经修饰后的PLL与DNA形成复合物的理化性质、毒性和转染率均有很大程度的改善。 胡海梅 潘仕荣 张璇关键词:非病毒基因载体 基因治疗 体外