蒋文燕
- 作品数：15 被引量：22H指数：3
- 供职机构：广州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高转移潜能卵巢癌靶向肽的筛选及其对卵巢癌生物学行为的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨高转移性人卵巢癌细胞H08910PM特异性结合短肽对卵巢癌生物学行为的影响。方法以H08910PM细胞为靶细胞，人正常卵巢上皮7311细胞和卵巢癌H08910细胞为吸附细胞，用噬菌体环七肽库进行4轮差减筛选。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光染色法对阳性噬菌体克隆进行鉴定。建立特异性短肽裸鼠腹腔移植瘤模型，分析其对裸鼠成瘤能力及侵袭、转移能力的影响。采用免疫组化法检测血管内皮生长因子（VEGF）的表达，原位末端转移酶标记技术（TUNEL）检测肿瘤细胞凋亡指数（AI）。结果经过4轮筛选后，噬菌体在H08910PM细胞上出现了明显的富集现象。ELISA结果显示，在随机挑选的20个噬菌体克隆中，有12个可与H08910PM细胞特异性结合。细胞免疫荧光显示，筛选的阳性噬菌体克隆能与H08910PM细胞特异性结合。黏附实验结果显示，H08910PM-peptide20组、H08910PM-peptidel6组和H08910PM组的细胞黏附率分别为49．O％、96．8％和100．0％，H08910PM-peptide20组与H08910PM组的细胞黏附率差异有统计学意义（P〈0．05），合成的特异性短肽序列peptide20（THRVHLH）能明显抑制H08910PM细胞的黏附能力。裸鼠体内实验显示，peptide20能够有效地抑制肿瘤的生长和转移，实验组、阴性对照组和空白组裸鼠移植瘤组织中VEGF蛋白的阳性表达率分别为21．2％、81．4％和85．7％，实验组的VEGF蛋白阳性表达率低于阴性对照组和空白组（P〈0．01）；而实验组、阴性对照组和空白组的A1分别为（18．214±2．49）％、（3．764±1．77）％和（4．784±1．57）％，实验组的AI明显高于阴性对照组和空白组（P〈0．01）。结论成功筛选到高转移性卵巢癌H08910PM细胞特异性结合短肽，其能够有效地抑制卵巢癌细胞的生长、侵袭和转移，为卵巢癌的药物靶向治疗提供了理想的载体。
- 周聪康佳丽王小霞聂妙玲蒋文燕
- 关键词：卵巢肿瘤细胞系肿瘤肽库
- RhoA基因沉默抑制卵巢癌腹腔移植瘤恶性生物学行为的研究
- 2013年
- 目的:研究慢病毒介导RhoA基因沉默对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤生长、侵袭及转移等恶性生物学行为的影响。方法:21只裸鼠随机分为HO8910-RhoA-shRNA组、HO8910-RhoA-NC组和HO8910组,每组7只。细胞接种法建立人卵巢癌腹腔移植瘤模型,每2天测量腹围。4周后解剖裸鼠,大体观察,测定腹水量,统计肿瘤播散器官数及瘤结节数。称量瘤体重量,并计算抑瘤率。镜下观察,应用HE染色分析移植瘤病理形态学特点。实时荧光定量PCR和Western blot检测移植瘤RhoA mRNA和蛋白表达情况。TUNEL技术检测移植瘤凋亡指数(apoptotic index,AI)。结果:与HO8910-RhoA-NC组和HO8910组比较,HO8910-RhoA-shRNA组裸鼠腹围增长明显滞后(P<0.05),腹水量明显减少(P=0.01),肿瘤播散器官数、瘤结节数及瘤体重量均明显减少(P均<0.001),抑瘤率达70.62%。RhoA基因mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P均<0.001)。凋亡指数AI明显升高(P<0.001)。结论:慢病毒靶向沉默RhoA基因能显著抑制人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的恶性生物学行为。
- 蒋文燕康佳丽王小霞杨文娟聂妙玲周聪
- 关键词：RHOA异种移植模型抗肿瘤试验肿瘤浸润
- 靶向RhoA基因的shRNA对卵巢上皮性癌裸鼠移植瘤的影响及作用机制
- 2013年
- 目的探讨靶向RhoA基因的短发夹状RNA（shRNA）对卵巢上皮性癌（卵巢癌）裸鼠移植瘤的影响及可能的抗肿瘤作用机制。方法建立卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型，应用随机数字表法将荷瘤裸鼠随机分为3组，即实验组（予携带靶向RhoA基因的shRNA慢病毒液治疗）、阴性对照组（予携带针对随机无关序列的shRNA慢病毒液治疗）、空白对照组（予磷酸盐缓冲液），比较3组裸鼠的移植瘤生长情况，包括移植瘤生长速度、肿瘤体积、肿瘤质量；光镜下观察3组裸鼠移植瘤及主要器官组织的病理形态学特征。采用实时荧光定量PCR技术、免疫组化SP法和蛋白印迹法检测移植瘤组织中RhoAmRNA和蛋白的表达；脱氧核苷酸末端转移酶介导的核苷酸缺口末端标记（TUNEL）法检测3组裸鼠移植瘤细胞的凋亡情况[以凋亡指数（AI）表示]。结果（1）自治疗开始的第9天起，实验组裸鼠移植瘤的生长速度滞后于阴性对照组和空白对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01）。治疗结束后10d，实验组裸鼠的移植瘤体积为（338±114）mm^3，小于阴性对照组和空白对照组[分别为（1190±332）和（1101±396）mm^3]，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；实验组裸鼠平均肿瘤质量为（0．23±0．11）g，低于阴性对照组和空白对照组[分别为（0．79±0．19）、（0．74±0．17）g]，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。而阴性对照组裸鼠移植瘤的生长速度、移植瘤体积、肿瘤质量分别与空白对照组比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。光镜下观察，实验组肿瘤细胞呈大片坏死区域且核固缩多见，而阴性对照组和空白对照组肿瘤细胞无明显变化。（2）实验组裸鼠移植瘤组织中，RhoAmRNA的表达水平为0．304±0．05，低于阴性对照组的0．95±0．06和空白对照组的1．00±0．11，分别比较，差异均�
- 蒋文燕康佳丽王小霞杨文娟聂妙玲周聪
- 关键词：异种移植模型抗肿瘤试验
- 慢病毒介导RNAi沉默RhoA基因对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的影响及基因治疗研究
- 研究背景
侵袭和迁移是恶性肿瘤转移的重要特征，大约90/%的患者死于肿瘤的复发和转移。在妇科恶性肿瘤中，卵巢癌死亡率位居首位。因其临床症状隐匿，诊断时75％的患者已属晚期，虽然超过80/%的患者经一线治疗受益,但I...
- 蒋文燕
- 关键词：RHOA异种移植模型抗肿瘤试验肿瘤侵润
- 文献传递
- 经阴道三维容积超声成像在子宫肌瘤FIGO分类的应用价值被引量：2
- 2020年
- 目的探讨经阴道三维容积超声成像在诊断子宫肌瘤FIGO分类的临床应用价值。方法对本院收治的手术病理结果证实的219例子宫肌瘤,回顾临床资料分组,99例以经阴道三维容积超声成像作为观察组,120例以经阴道二维彩超检查作为对照组。评估经阴道三维容积超声成像在诊断子宫肌瘤FIGO分类的诊断符合率。结果两组子宫肌瘤FIGO分类诊断符合率分别为:观察组97.93%,对照组78.33%;经阴道三维容积超声成像检查诊断符合率显著高于二维彩超,差异有统计学意义。结论经阴道三维容积超声成像较二维彩超能获得更为丰富的诊断信息,诊断子宫肌瘤FIGO分类较二维彩超优势显著,有利于提高诊断准确率,为指导临床个性化治疗提供可靠的理论依据,值得临床推广应用。
- 蒋文燕柳建华邓翠甘曼
- 关键词：超声子宫肌瘤
- 卵巢癌患者血清CAl53的表达及与临床病理特征的关系
- 2013年
- 目的探讨血清糖类抗原153（carbohydrate antigen153，CA153）在卵巢癌患者中的表达及临床意义。方法回顾性分析49例卵巢癌（A组）及62例卵巢良性病变患者（B组）术前血清CA153及血清糖类抗原125（CA125）的检测水平，并与术后病理结果等临床资料进行临床对比分析。结果卵巢癌患者术前血清CA153水平显著高于卵巢良性病变患者；血清CA153诊断卵巢癌的敏感度为40．82％，特异度为96．77％，其特异性显著高于血清CA125（P〈0．05）。卵巢癌患者分期越晚、组织分化愈差，其血清CA153检测水平越高；早期（I、II期）卵巢癌患者血清CA153的表达阳性率显著低于血清CA125（P〈0．05）。结论术前检测血清CA153有助于卵巢癌的筛查而协助诊断，术前血清CA153的表达水平越高提示卵巢癌不良预后的风险越高。
- 聂妙玲康佳丽夏薇邓玲红王小霞蒋文燕周聪
- 关键词：卵巢癌糖类抗原153糖类抗原125
- 基于倾向性评分匹配分析系统免疫炎症指数对早、中期肝细胞癌术后早期复发的预测价值
- 2023年
- 目的分析早、中期肝细胞癌(HCC)切除术后早期(≤2年)复发的危险因素并探讨术前系统免疫炎症指数(SII)对早、中期HCC术后早期复发的预测价值。方法回顾性研究2017年10月—2020年10月于我院接受肝癌根治性切除术的238例早中期HCC患者,收集基线资料,通过1∶1倾向性评分匹配(PSM)均衡组间协变量获取早期复发组及未复发组各69例;单因素和多因素Logistic回归分析影响术后早期HCC复发的相关因素,构建列线图模型,临床决策曲线(DCA)评估列线图预测模型在临床的应用效果;受试者操作特征(ROC)曲线评价预测效能,根据最高约登指数确定截断点。结果单因素及多因素Logistic回归分析结果均提示微血管侵犯(MVI)及术前系统免疫炎症指数(SII)高水平是术后早期复发的独立危险因素;列线图模型有较好的预测效能;ROC曲线计算出SII最佳临界值为696.85×10^(9)/L。结论术前高水平SII可能对预测HCC患者术后早期复发具有潜在价值。
- 陈墅圳蒋文燕刘杰
- 关键词：肝细胞癌肝癌切除术
- 全细胞差减筛选法筛选与人卵巢癌细胞特异性结合的短肽被引量：3
- 2013年
- 目的全细胞差减法筛选人源性卵巢癌HO8910细胞株特异性结合短肽,为卵巢癌的靶向药物治疗提供理想的载体。方法以人卵巢癌HO8910细胞为靶细胞,人正常卵巢上皮细胞为吸附细胞,对噬菌体随机环7肽库进行4轮差减筛选;ELISA验证阳性噬菌体克隆;对获得的阳性克隆进行DNA测序及生物信息学分析,采用免疫荧光细胞化学方法鉴定噬菌体阳性克隆(phage1)与HO8910细胞的特异性结合。结果经过4轮筛选后,噬菌体在靶细胞HO8910上出现了明显的富集现象;ELISA对20个随机挑选的克隆进行鉴定,12个可与HO8910特异性结合;DNA测序后得到一段与卵巢癌细胞特异性结合的7肽(SWQIGGN),免疫荧光细胞化学结果显示phage1能特异性结合HO8910细胞。结论采用全细胞差减法成功筛选到与卵巢癌细胞特异性结合的7肽。
- 周聪康佳丽王小霞聂妙玲蒋文燕
- 关键词：卵巢癌噬菌体展示全细胞靶向性
- 一种高效实用的人卵巢表面上皮细胞培养方法被引量：3
- 2013年
- 背景:体外分离培养纯度高、活力强且生物学特性稳定的卵巢表面上皮难度很大,目前原代培养主要采用组织块贴壁法和酶消化法,但这两种方法在取材、细胞活力及细胞纯度上都存在一定的问题。目的:建立一种高效实用的人卵巢表面上皮分离、培养和鉴定方法。方法:创新性地运用细胞刷刷取人卵巢表面上皮,以红细胞裂解法、差速贴壁法对细胞进行分离纯化,并向无血清DMEM-F12培养基中添加人表皮生长因子进行细胞培养。在倒置显微镜下观察细胞形态,应用苏木精-伊红染色和免疫细胞化学染色法对细胞进行鉴定,并绘制生长曲线。结果与结论:卵巢表面上皮培养24h开始贴壁生长,7-12d后基本达到融合,细胞呈多角形或扁平型,透光性及折光性强。细胞形态符合正常上皮细胞特性,所分离的细胞几乎完全表达上皮细胞表面标志物CK19。细胞生长良好,可以传6-8代,细胞生长曲线呈"S"形,纯度达95%以上。结果提示细胞刷取培养法操作简单,能够快速分离获得大量卵巢表面上皮,所获得的细胞经红细胞裂解法和差速贴壁法处理后纯度达95%以上,且细胞生长稳定。
- 周聪康佳丽王小霞杨文娟蒋文燕
- 关键词：原代培养苏木精-伊红染色免疫细胞化学
- 叶酸受体新技术及细胞学检查对宫颈癌筛查应用价值的评估被引量：9
- 2014年
- 目的 探讨叶酸受体介导（FRD）多功能醋酸白溶液检查和液基细胞学检查（TCT）在宫颈癌筛查中的应用价值.方法 对602例患者行FRD多功能醋酸白溶液检查、TCT及宫颈活检病理学检查,以组织病理学结果为金标准,对照分析FRD多功能醋酸白溶液检查和TCT筛查的诊断价值.结果 602例患者经宫颈活检病理学检查,其阳性率21.8％ （131/602）,其中CIN Ⅰ级36例,CINⅡ级41例,CINⅢ级24例,宫颈浸润癌30例.FRD多功能醋酸白溶液筛查,其阳性率23.8％（143/602）,两者阳性结果比较差异无统计学意义（P＞0.05）;FRD多功能醋酸白溶液筛查炎症和宫颈浸润癌漏诊率分别为2.6％、21.1％,CIN误诊率3.8％.TCT筛查炎症漏诊率7.2％,CIN Ⅰ误诊率5.3％、CINⅡ漏诊率4.9％,CINⅢ误诊率58.6％,而鳞状细胞癌（SCC）及腺癌（AC）检出符合率为100％.FRD多功能醋酸白溶液检查、TCT检查的敏感度分别为80.92％、90.84％,特异度分别为92.14％、90.23％,两者比较差异均无统计学意义（P＞0.05）;阳性预测值分别为74.13％、72.12％,阴性预测值分别为95.59％、97.25％,两者比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 两种筛查宫颈病变及宫颈癌的效率及评价相近似,而FRD多功能醋酸白溶液检查对宫颈管深部病变检测受限,则不能完全代替TCT检查.但FRD多功能白色醋酸溶液检测方法可靠,且经济又操作简单,适合基层医院宫颈癌普查.
- 邓翠康佳丽蒋文燕聂妙玲黄晓晖
- 关键词：叶酸细胞学技术
