袁翔
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 鼠源性人肿瘤单链抗体库的构建及乳腺癌相关抗体的筛选
- 本研究是本室构建抗体库平台的一个组成部分。通过鼠源性人肿瘤单链抗体库的构建及肿瘤相关抗体的筛选,旨在有助于本室更好地开展肿瘤分子生物学的研究工作,有助于肿瘤的诊断与治疗。
实验首先用乳腺癌细胞系MCF-7、T4...
- 袁翔
- 关键词:单链抗体噬菌体展示表达纯化乳腺癌
- 文献传递
- 鼠源性人乳腺癌单链抗体库的构建与乳腺癌相关抗体的筛选被引量:1
- 2006年
- 目的:获得乳腺癌的噬菌体呈现型单链抗体(scFv)库,筛选与乳腺癌细胞特异结合的抗体,为乳腺癌的诊断和治疗奠定基础。方法:用乳腺癌细胞系MCF-7、T47D、MDA-MB-435免疫BALB/c小鼠,取脾脏提取总RNA,用RT-PCR分别扩增抗体重、轻链可变区(VH和VL)基因,经Linker连接形成scFv基因片段。将scFv基因片段与噬菌粒载体pCANTAB5E的连接产物转化大肠杆菌TG1。用辅助噬菌体M13KO7进行超感染,获得重组噬菌体抗体。选用乳腺癌细胞系MCF-7和人正常肝细胞系HL02做正负差异的筛选细胞,通过5轮筛选,随机挑取克隆,经phage-ELISA筛选特异性结合MCF-7细胞的scFv。结果:构建了1个库容为1.3×106的单链抗体库。筛选到2株与MCF-7细胞有较高结合活性的噬菌体-单链抗体scFv-873和scFv-874。数据库搜索表明这2株单链抗体基因是与以往抗体序列不同的新基因。用Westernblot检测了这2株单链抗体在琥珀密码子非抑制型菌株TOP10中的表达情况。结论:筛选到2个与乳腺癌细胞结合特异性较好的单链抗体,为乳腺癌的诊断和治疗研究奠定了基础。
- 袁翔胡宝成
- 关键词:单链抗体库噬菌体展示乳腺癌
- von Hippel-Lindau病的分子机制研究被引量:2
- 2005年
- VHL病(vonHippel-Lindaudisease)是一种遗传性肿瘤综合征,由VHL抑癌基因突变引起。研究表明,VHL蛋白在体内具有多种功能,VHL基因突变形式和部位的差异所造成的VHL蛋白功能增加、减少或缺失可能是导致肿瘤不同表型的重要原因。
- 袁翔胡宝成
- 关键词:VHL病缺氧诱导因子-1泛素连接酶基因突变