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转多个抗真菌蛋白基因水稻植株的获得及其抗稻瘟病菌的初步研究被引量：38: 1999年; 用基因枪法将水稻碱性几丁质酶（ＲＣ２４）基因、苜蓿葡聚糖酶（βＧｌｕ）基因、大麦核糖体失活蛋白（ＢＲＩＰ）基因和潮霉素（ｈｐｔ）基因同时导入籼稻品种（七丝软占）中，获得了７个潮霉素抗性再生系，Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ证明２～３个抗真菌蛋白基因已整合到水稻基因组中．; 冯道荣卫剑文许新萍许耀李宝健; 关键词：转基因水稻基因枪

含多种抗真菌病基因植物表达载体的构建被引量：13: 1999年; 含有大麦核糖体失活蛋白（ＢＲＩＰ）编码序列的质粒ｐＲＣ２４／ＢＲＩＰ改造后，依次与含有水稻碱性几丁质酶基因ＲＣＨ１０和水稻酸性几丁质酶基因ＲＡＣ２２编码序列的质粒ｐＡＢＣ２以及含有苜蓿β１，３葡聚糖酶编码序列的质粒ｐＡＡＧ８９连接，得到了中间载体ｐＲＡＳ１０．ｐＲＡＳ１０再与根癌农杆菌双元载体ｐＣＡＭＢＩＡ１３００连接，得到了适合水稻转化的双元载体ｐＲＡＳ１３００．利用冻融法将此表达载体导入根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４中，并准备将ｐＲＡＳ１３００转入水稻，; 李明邱国华许新萍许耀李宝健; 关键词：真菌病植物表达载体

根癌农杆菌转化谷子培养细胞早期过程的细胞生物学研究: 应用光镜、电镜及电镜放射自显影技术较为系统地观察了经特殊预处理的根癌农杆菌与禾本科作物谷子细胞相互作用及T-DNA在谷谷子培养细胞内的转移过程。光镜观察表明:; 余迪求许耀李宝健; 文献传递

利用根癌农杆菌法获得转基因水稻植株及其后代被引量：47: 1998年; 在100μmol／L乙酰丁香酮（AS）等vir基因诱导分子存在的情况下，用含双元载体pBYT2的根癌农杆菌菌株EHA101同水稻（OrizasativaL．）台北309悬浮培养细胞共培养3天。经过2个月的连续筛选，共从364颗同根癌农杆菌共培养的悬浮培养细胞团中得到17个具有稳定潮霉素抗性和GUS表达的愈伤组织。对从8个转化组织中得到的10株可能的R0代转基因植株及其后代进行外源基因的整合和表达分析，Southern分析表明外源基因已稳定地整合进水稻基因组中并实现了有性遗传传递。杂交结果显示在其中一个转化系的植株中有5个拷贝的T－DNA整合，而其余的转化系则只整合了1个拷贝。转基因水稻细胞及植株中GUS活性的组织化学染色观察和荧光分析表明玉米ubiquitin基因启动子在水稻细胞中能高效启动gus报告基因的表达。ndPAGE－X－Gluc法检测表明转基因水稻细胞中表达的GUS蛋白比Sigma公司的标准GUS蛋白（SigmaCo．G0786）要小，而与来自大肠杆菌HB101（pBI1121）中的GUS蛋白大小相同。结果表明，根癌农杆菌可有效且可靠地介导外源基因转化水稻。; 尹中朝杨凡许耀李宝健; 关键词：水稻根癌农杆菌转基因植株

Ti T—DNA基因在天仙子+烟草体细胞杂种培养细胞中的导入、表达及再生被引量：1: 1989年; 携带章鱼碱型Ti质粒和胭脂碱型Ti质粒的根癌农杆菌不同菌株分别与天仙子+烟草体细胞杂种培养细胞经共培养离体转化程序后,Ti T-DNA基因在受体细胞中获得了转移与表达。虽然细菌处理对受体细胞的植板率具有一定的影响,但其激素自主型频率为33.9—76.8％,表现冠瘿碱合成酶活性的频率为9.7—47.5％。从转化细胞克隆再生的苗不易长大、难于生根,且其基部产生大量的次生瘤组织。在这种再生苗的叶组织及次生瘤组织中仍可检测到相应冠瘿碱合成酶的活性。; 许耀贾敬芬郑国錩; 关键词：细胞转化

存在水稻中新型农杆菌毒性区基因的信号分子被引量：5: 1995年; 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti质粒毒性区基因所编码的特殊的接合系统将介导T-DNA由农杆菌向高等植物的运动和转移.在双子叶植物中,该系统可通过二元调节系统被许多植物酚类激活.然而,对单子叶植物,尤其是禾本科作物而言,有关毒性区基因诱导因子的报道甚少.我们曾采用带有vir::lacZ融合基因的农杆菌系列菌株,研究了水稻不同组织、不同发育时期的渗出液及提取液对农杆菌毒性区基因的激活作用,发现只有在幼穗分化期至抽穗扬花期的叶片才能检测到较强的诱导活性.我们纯化了水稻中的毒性区诱导信号分子(RVS),其中一个为3,5-二羟-3’,4’-亚甲二氧基-5’-亚甲二氧基-5’-甲氧基-β-羰基二氢查耳酮(C_(17)H_(14)O_7).RVS的诱导方式与乙酰丁香酮(AS)相似,均随诱导物浓度和时间变化而变化.结果表明:在水稻中存在着毒性区基因诱导的信号分子,但只有在特定组织及特定发育时期才可被明显检测到.; 尹中朝李宝健施骏许耀刘吉开; 关键词：水稻信号分子农杆菌 TI质粒基因

根癌农杆菌介导的外源基因转化植物萌动种胚的研究被引量：26: 1991年; 本文建立的新型根癌农杆菌转化程序是以微伤处理的黄瓜、番茄受体态种胚为实验材料,探讨了萌动种胚作为农杆菌TiT-DNA转化受体的可能性;确定了转化体系中筛选条件及受体态种胚的形态学特征和生理学指标;短期内获得了转基因植株,并从生理生化及分子水平上证实了外源基因的转移、整合与表达。本文为农杆菌Ti质粒载体介导的外源基因向植物中的转移提供了一个简便易行的受体系统。; 许耀王艇李宝健; 关键词：转基因表达

农杆菌介导的病毒侵染(Agroinfection)方法在植物和病毒分子生物学基础研究中的应用被引量：1: 1993年; 农杆菌-病毒侵染即为农杆菌Ti质粒介导的病毒基因组向植物细胞中的转移,并使其发生系统感染。它具有高敏、高效和易于检测等特点,已被用来研究农杆菌T-DNA转移机制、农杆菌宿主范围、基因重组、外源基因瞬间表达及病毒分子生物学等方面的基础理论问题。本文综述了该方法用于植物和病毒分子生物学基础研究的进展情况,并讨论了其应用前景。; 施骏许耀; 关键词：农杆菌侵染植物

Ti质粒T区基因转移与整合分子机制的研究进展被引量：5: 1993年; 由根癌农杆菌Ti质粒介导的转化系统现已发展成为向许多植物转移外源基因的有效途径。然而,长期以来,人们对Ti质粒T区基因(即T-DNA)转移、特别是整合的具体细节一直不甚了解。随着对Ti质粒分子生物学及其介导转化过程研究的广泛展开与不断深入。; 施骏许耀; 关键词：TI质粒基因转移生物工程

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许耀