谭俊杰 作品数:26 被引量:44 H指数:5 供职机构: 成都军区总医院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家科技重大专项 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 军事 兵器科学与技术 更多>>
高GC含量DNA模板的PCR扩增 被引量:6 2013年 目的:探索高GC含量DNA的PCR扩增条件,为扩增达托霉素生物合成基因簇及拼接奠定基础。方法:在PCR扩增体系中,使用高保真的聚合酶及添加不同浓度的DMSO、7-deaza-dGTP等增强剂,并选择合适的PCR循环程序,优化富含GC的DNA的PCR扩增条件。结果:向反应体系中额外添加1%~4%的DMSO可以显著提高富含GC的DNA的PCR扩增产物量,但会降低其特异性;7-deaza-dGTP可以提高扩增产物的特异性及保真度,但产量会有所下降。应用touch down PCR并在体系中添加7-deaza-dGTP能够提高扩增产物的特异性和产率,增加扩增的保真度。结论:应用优化的PCR扩增条件将所有达托霉素生物合成基因簇分段扩增出来,并可扩增出长达6 kb的片段,且序列完全正确,可以进行后续拼接。 邢玉华 戴素琴 刘体颜 王微 谭俊杰 曲国龙 刘刚 陈惠鹏关键词:PCR 合成生物学技术在地雷检测中的应用 2011年 近年来,随着合成生物学技术的发展,许多基于合成生物学的生物传感器检测方法应运而生。其中基于合成生物学的地雷检测技术能够提供较高的检测特异性,并且使用安全,价格低廉。本文主要介绍一些利用合成生物学技术的方法,通过检测地雷泄漏物24,,6-三硝基甲苯(TNT)来实现地雷的生物检测。 谭俊杰 刘刚 李玉霞 凌炎 陈惠鹏关键词:合成生物学 生物传感器 地雷 启动子recEA4及其应用 本发明公开了启动子recEA4及其应用。本发明提供的启动子,来源于大肠杆菌K-12 MG1655,命名为recEA4启动子,为序列表的序列1所示的DNA分子。本发明还保护一种DNA分子(融合DNA),自上游至下游依次包括... 刘刚 谭俊杰 阚乃鹏 陈惠鹏 王微 凌静怡 曲国龙文献传递 项目管理模式在医院多学科协作诊疗中的应用实践 被引量:5 2017年 介绍了项目管理及多学科协作诊疗的概念及发展现状,分析了在军队医院多学科协作诊疗开展中运用项目管理模式的可行性和必要性,总结了具体做法及经验体会。 杨波 谭俊杰 王攀 谭映军 戎正关键词:项目管理 胰高血糖素样肽1或其类似物体外生物活性检测方法的建立 被引量:4 2015年 目的:通过对不同活性检测方法的综合比较,筛选最适的胰高血糖素样肽1(GLP-1)或其类似物的体外活性检测方法,为GLP-1类似物的体外生物活性检测奠定基础。方法:以GLP-1作为阳性药物,用MTT方法检测其对RIN-m-5F、MIN6细胞增殖的影响;用ELISA方法检测其对INS-1、MIN6细胞胰岛素分泌量的影响;用ELISA方法检测其对BHK-GLP-1R细胞cAMP分泌水平的影响。通过对上述方法的综合比较,筛选出最适的活性检测方法。结果:GLP-1对细胞增殖的影响实验结果并不显著,对胰岛素分泌量影响的实验效果明显,对cAMP分泌水平的实验无明显效果。结论:ELISA检测GLP-1或其类似物对MIN6细胞胰岛素分泌量实验可用于GLP-1或其类似物的体外活性检测。 邵妤 赵威 王微 曲国龙 阚乃鹏 凌婧怡 谭俊杰 刘刚 陈惠鹏关键词:2型糖尿病 胰高血糖素样肽1 类似物 活性检测 抗血管生成活性的重组人proEMAPⅡ/p43蛋白缺失突变体的构建和筛选(英文) 2014年 proEMAPⅡ(又称p43蛋白)是哺乳动物氨酰tRNA合成酶的辅助因子,近年来发现,p43具有细胞因子活性以及抗新生血管生成的作用,具有潜在的抗肿瘤疗效.p43的C端结构域即为EMAPⅡ,其结构和功能都已知,具有细胞因子和抗血管生成的双重功能.但是N端的结构还不清楚,研究表明全长的p43比EMAPⅡ具有更高的生物学活性,但是p43的结构和作用机制尚不明确.此外,作为蛋白质药物,更小的分子能够减少免疫原性和副作用,从而发挥更好的活性.本文利用生物信息学方法,对p43 N端的二级结构进行预测,并且在不破坏二级结构的前提下,构建了10个p43的缺失突变体,在体外对10个缺失突变体与全长的p43蛋白进行抗新生血管生成活性验证比较,最终我们获得了3个活性高的p43缺失突变体,并且发现N端的1~16,1~79位氨基酸和C端的264~312位氨基酸不是p43发挥抗血管生成功能所必需的,而且它们的删除使得活性位点更好地呈现并发挥活性.通过我们的研究,有助于揭示p43蛋白结构和功能的关系以及其作用机制,同时为临床筛选肿瘤治疗候选药物奠定基础. 邢玉华 刘大涛 谭俊杰 胡立德 刘刚 付学奇 陈惠鹏关键词:P43 缺失突变体 抗血管生成剂 内皮细胞迁移 管腔形成 合成生物学的关键技术及应用进展 被引量:6 2012年 20世纪的生物学研究一直着眼于对生物系统的不断分解,解剖至细胞中单个蛋白或基因,研究其结构和功能来解释生命现象。但随着当代分子生物学技术的迅猛发展,以系统化设计和工程化构建为理念的合成生物学成为新一代生物学的发展方向。 邢玉华 谭俊杰 李玉霞 凌焱 刘刚 陈惠鹏关键词:合成生物学 分子生物学技术 生物系统 生命现象 工程化 启动子3M1F及其应用 本发明公开了启动子3M1F及其应用。本发明提供的启动子,命名为3M1F,为序列表的序列1自5’末端第7至93位核苷酸所示的DNA分子。本发明还保护一种DNA分子(融合基因),自上游至下游依次包括序列表的序列1自5’末端第... 刘刚 谭俊杰 阚乃鹏 陈惠鹏 王微 凌静怡 曲国龙文献传递 可用于TNT检测的新的生物传感元件topAp4的发现 被引量:1 2015年 目的在大肠杆菌基因组中筛选可用于TNT检测的基因传感元件。方法利用随机酶切方法不完全酶切大肠杆菌K-12 MG1655基因组,构建基因组启动子文库,通过多轮筛选法获得可感应TNT的文库元件。通过数据库分析,并在灵敏度、特异性、起效时间各方面对新的传感元件在TNT诱导下的启动活性进行考察,进一步确证了文库元件中发挥作用的功能序列。结果和结论成功构建了大肠杆菌K-12 MG1655基因组启动子文库,并从中筛选得到了一个可感应TNT的文库元件,经过进一步分析确证了其发挥功能的序列top Ap4,并在灵敏度、特异性、起效时间上都表现出较好的启动活性。上述研究工作发现了top Ap4对TNT的感应作用,并验证了其具有较好的启动活性,为TNT检测生物传感器的构建打下了良好的基础。 阚乃鹏 谭俊杰 王微 凌婧怡 曲国龙 邵妤 金晶 刘刚 陈惠鹏关键词:合成生物学 启动子 三硝基甲苯 利用BglBrick方法进行HSA/Exendin-4长效融合蛋白的快速组装 2014年 目的:通过合成生物学的BglBrick方法快速构建不同种类HSA/Exendin-4长效融合蛋白,为进行各HSA/Exendin-4融合蛋白生物学活性的筛选比较奠定基础。方法:选用酵母表达载体pPICZαA质粒,构建pPICZαA-E4和pPICZαA-HSA两种基础Brick表达载体,运用BglBrick方法,实现了不同数目Exendin-4分子在HSA的不同末端的快速组装。将构建出的10种HSA/Exendin-4融合蛋白,转入毕赤酵母菌KM71H中,用甲醇诱导目的蛋白的表达。结果:用BglBrick方法构建的HSA/Exendin-4融合蛋白在毕赤酵母中都成功诱导表达出相应的目的蛋白。结论:利用BglBrick方法能够实现HSA长效融合蛋白的快速组装。 邵妤 曲国龙 金晶 王微 谭俊杰 阚乃鹏 李玉霞 刘刚 陈惠鹏关键词:EXENDIN-4 合成生物学