贾晓健
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目留学人员科技活动项目择优资助经费更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 胞红蛋白在CHO细胞中的表达及其抗氧化活性研究被引量：1
- 2011年
- 构建胞红蛋白(Cytoglobin,CYGB)真核表达载体,并在CHO细胞中进行表达。通过PCR技术扩增了CYGB基因序列,并将CYGB基因序列定向插入pcDNA3.1(+)表达载体中,构建了pcDNA3.1-CYGB真核表达载体。将重组表达载体pcDNA3.1-CYGB转染CHO细胞,经G418筛选出阳性细胞株。培养、收集细胞,提取细胞总蛋白,经Western Bloting鉴定证明CYGB表达。通过H2O2(800μmol/L)诱导的氧化应激损伤实验,检验CYGB的抗氧化活性,与对照组相比,CYGB表达细胞株提高了细胞内超氧化物酶(SOD)的活力,显著的提高了细胞在H2O2诱导的氧化应激下的存活率。研究结果表明,真核表达载体pcDNA3.1-CYGB构建成功,CYGB在真核细胞CHO中成功表达。
- 李世飞贾晓健吴静钱杰陶伟娟吴梧桐张玉彬
- 关键词：胞红蛋白CHO细胞抗氧化活性
- 胞红蛋白酵母表达载体构建与表达纯化
- 2011年
- 胞红蛋白是脊椎动物珠蛋白超家族的一员,具有重要的生物学功能,已在大肠杆菌中成功表达。酵母表达系统作为常用的真核表达系统,具有外源蛋白表达蛋白量大且活性高等优点。该研究通过PCR扩增技术获得胞红蛋白编码基因并通过DNA重组技术构建并鉴定了胞红蛋白毕赤酵母分泌型表达载体CYGB-pGAPZαA。将重组载体经单酶切线性化后通过电转化法转入毕赤酵母GS115,利用梯度浓度的Zeocin抗生素和PCR技术筛选得到阳性转化子。工程菌经发酵培养后,发酵上清液经镍柱分离得到较高纯度的目的蛋白,并经电泳等方法验证鉴定。
- 陶伟娟贾晓健钱杰张玉彬吴梧桐
- 关键词：胞红蛋白基因重组酵母表达分离纯化
- 胞红蛋白表达纯化及抗氧化活性研究被引量：4
- 2010年
- 研究人胞红蛋白(Cytoglobin,CYGB)的表达纯化、复性和抗氧化活性。人胞红蛋白基因工程菌pET28a/hC YGB/BL21(DE3)经IPTG诱导表达,包涵体分离,复性,透析和Sephacryl S-200层析分离,获得纯化的rhC YGB。SDS-PAGE和HPLC检测表明rhC YGB纯度达95%以上,紫外光谱分析证明rhC YGB分子含有血红素,圆二色谱分析表明该复性蛋白质具有正确的α-螺旋结构。生化分析及细胞水平试验表明rhC YGB具有过氧化物酶活性和抗氧化活性。小鼠急性乙醇肝损伤模型试验表明rhC YGB能有效保护乙醇所致的肝损伤。研究结果表明经添加血红素复性和纯化所得的rhC YGB具有正确的空间结构和抗氧化活性。
- 接振旺贾晓健钱杰吴梧桐张玉彬
- 关键词：胞红蛋白纯化复性抗氧化
- 胞红蛋白的结构功能与药理学活性研究进展被引量：3
- 2010年
- 胞红蛋白是珠蛋白家族的新成员,能够调节O2及NO的代谢、清除胞内活性氧自由基,在组织缺氧或氧化应激发生时能够维持细胞氧化还原平衡,起到良好的细胞保护作用,其在抗纤维化、抗肿瘤及其他疾病治疗方面已经显示出一定成药性。该文综合近年研究成果,总结了胞红蛋白结构、组织分布、表达调节、生理功能及其药理学活性等方面的研究进展。
- 贾晓健张玉彬吴梧桐
- 关键词：胞红蛋白抗氧化抗纤维化抗肿瘤
- 胞红蛋白的酶学特性及其在药学研究中的应用
- @@胞红蛋白(Cytoglobin，CYGB)，又称肝星状细胞激活相关蛋白(Stellate CellActivation-associated Protein,STAP)，2001年日本学者Kawada用蛋白组学方法分...
- 贾晓健吴梧桐张玉彬
- 关键词：胞红蛋白酶学特性药学研究
- 文献传递
