赖彬
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
- 供职机构：四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 林麝IL-2细胞因子的克隆、表达和纯化被引量：2
- 2006年
- 用林麝(Moschus berezovskii)外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)提取总RNA,RT-PCR扩增IL-2(interleukin-2,IL-2),连接pMD18-T载体后转化大肠杆菌,筛选阳性克隆并测序。然后将IL-2成熟肽编码序列连接到pGEX4T-1原核表达载体进行表达、纯化。结果表明林麝IL-2开放阅读框全长468 bp,编码155个氨基酸。序列分析表明,林麝IL-2及其受体结合域与水牛的高度保守,而在翻译后修饰的预测活性位点上和水牛的有所不同。IPTG诱导林麝IL-2蛋白表达,得到约41 kD的目标带;优化表达后,林麝IL-2表达含量达到了总蛋白量的25%。经GST亲和柱分离纯化,得到了约41 kD的单一目标带,这说明林麝IL-2基因的原核表达成功。
- 赖彬徐柳岳碧松邹方东
- 关键词：克隆原核表达
- 林麝IL-2细胞因子的克隆、分析和表达
- 麝被列入国家I类濒危动物，同时又是重要的经济动物，其所产麝香是我国和东亚地区重要的中药成份。我国具有多年的麝驯化和人工养殖历史，但是在麝的种群数和重大疾病防治上一直没有取得大得突破，而这两者都与细菌性感染疾病相关。林麝(...
- 赖彬
- 关键词：林麝白介素-2克隆表达
- 文献传递
- 林麝白介素-2在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2007年
- 克隆林麝(Moschus.berezovskii)白介素-2(interleukin-2,IL-2)到酵母表达载体pPIC9K,SalⅠ酶切后转化毕赤酵母GS115,G418抗性筛选高拷贝克隆,再由酵母菌落PCR鉴定;阳性克隆用甲醇诱导表达,SDS-PAGE分析,结果在诱导至第6d的酵母上清浓缩液中,检测到与预测林麝IL-2分子量相接近的,分子量约为18Ku的诱导表达带;TRIzol提取表达期间的酵母总RNA,并通过RT-PCR扩增IL-2mRNA,发现表达期的重组酵母细胞中存在IL-2mRNA,而对照没有检出,表明林麝IL-2存在低水平的表达。
- 赖彬徐柳岳碧松邹方东
- 关键词：毕赤酵母真核表达
- 林麝白介素2基因的克隆及分析
- 淋巴细胞分离液分离经100u/ml肝素抗凝的林麝(M.berezoviskii Flerov)外周血2ml,获得淋巴细胞,用1640综合培养基(80%ml RPMI1640培养基,20%ml小牛血清,青霉素100u/ml...
- 赖彬邹方东岳碧松
- 关键词：林麝RT-PCR方法IL-2
- 文献传递
