赵丽萍
- 作品数：17 被引量：63H指数：5
- 供职机构：香港大学更多>>
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- 视网膜神经节细胞诱向(营养)因子的生物效应的体外研究被引量：1
- 1992年
- 新生大鼠RGCs预先用明胶海绵吸粒蓝(GB)经顶盖逆行标记,2天后分离视网膜细胞进行培养,用于检测Te的生物效应。以Thyl.1特异性抗体纯化RGCs,建立纯化的RGCs培养系统,检测由Te纯化的RGNTF的生物效应。结果发现含Te培养48小时的视网膜细胞,GB标记的细胞有大(直径18～50μm)、中(10～18μm)和小(<10μm)三型,分别占31.5%、28.1%和40.4%。GB标记细胞存活数量在Te组比无Te组高3.3倍,且约50%表达神经突起。在纯化的RGCs培养中,含RGNTF培养48小时的RGCs,生长非常活跃,胞体均>18μm,有>95%的RGCs表达神经突起。无任何因子的对照组,RGCs培养48小时后全部死亡。四唑盐MTT定量结果显示RGNTF组RGCs存活的OD值比对照组高5.3倍。这进一步表明RGNTF对RGCs在体外存活、生长及神经突起表达具有特异性促进的效应。
- 赵丽萍周明华
- 关键词：视网膜节细胞细胞培养诱向因子
- 大鼠顶盖提取液对神经细胞的诱向效应及其年龄性变化被引量：1
- 1992年
- 新生大鼠视网膜的分离细胞,培养在包被基板蛋白的96孔培养板作为细胞检测系统。用四唑盐MTT微量自动比色法定量不同浓度新生大鼠Te和出生后不同龄(0～12天)大鼠Te对视网膜细胞存活生长的影响。结果发现,新生大鼠Te对视网膜细胞存活生长的促进效应,随培养中Te浓度的增加而增强,当Te浓度增至15μ1/孔(约40ng蛋白)时,其效应达到饱和。出生后0～2天大鼠Te对视网膜细胞存活生长的促进效应最强,但随年龄增加则逐渐减弱,到出生后12天的大鼠Te,对视网膜细胞的效应与无Te对照组无显著差别(P>0.05)。提示大鼠Te对神经细胞的诱向效应与年龄性变化有关。
- 赵丽萍周明华
- 关键词：神经细胞诱向因子细胞培养
- 鼠顶盖提取液30kD蛋白分子对培养视网膜神经节细胞的影响被引量：8
- 1991年
- 本文以MTT微量比色法测定在视网膜神经细胞的培养中,含Te,10—30kD和≥30kD蛋白质3组的细胞活性均比无Te的对照组高2—4倍.以预先用辣根过氧化物酶(HRP)逆行标记视网膜神经节细胞(RGC)的神经细胞培养在Te PhastGel上,显示生长在30kD蛋白带上的大细胞(>18μm)都是HRP阳性的RGC.以视网膜组织块与含30kD蛋白凝胶近距培养,可见许多突起,单细胞和小块组织朝30kD凝胶伸延或迁移.它们都是神经特异性烯醇酶和Thy1.1免疫标记阳性的RGC.结论:30kD蛋白是RGC特异性的诱向因子.
- 周明华赵丽萍任麟孙
- 关键词：视网膜神经节细胞
- 全文增补中
- 酶消化的人羊膜基膜对鸡胚前脑神经细胞生长的影响被引量：1
- 1990年
- 本研究采用肝素酶Ⅰ、Ⅱ、胶原酶和软骨素酶ABC消化的人羊膜基膜(HABM)作为支持物,研究对前脑神经细胞的生长支持作用。包被HABM的24孔培养板,首先用酶37℃消化1小时,然后以RPMI1640加6％小牛血清(含20mmol/L HEPES)作为培养液,培养神经细胞20小时,以微量自动比色法定量神经细胞的生长。微量自动比色法是利用四唑盐(MTT)可被活细胞吸收并转变成甲(?)产物的原理,以ELISA仪测光密度(OD)值,以显示活细胞数量。结果表明,肝素酶Ⅰ、胶原酶和软骨素酶ABC明显减少HABM上神经细胞的粘附,而肝素酶Ⅱ明显增加HABM上神经细胞的粘附,并促进神经细胞的生长和存活。
- 周明华赵丽萍
- 关键词：神经细胞酶消化
- 神经细胞诱向(营养)因子被引量：5
- 1990年
- 神经营养因子(neurotrophic factors, NFs)是靶组织产生的一种特异蛋白分子,有促进和维持神经细胞的生存、生长、分化和执行功能的作用,但不刺激细胞分裂。虽然不同的作者用过不同的名称(如Patterson称为指令因子instructive factor),但是他们对其生物效应的结论是一致的。在NFs中,有的NF只管理特定神经细胞特定显型的表达,如专门或主要使培养神经细胞突起伸长的因子,对这种促进分化的因子特称为突起伸长因子(neurite extension factor, NEF);有的NF主要促进神经细胞存活。
- 周明华吴玺印赵丽萍任峰任麟孙
- 关键词：神经细胞
- RGNTF单抗与多抗的特性和抑制作用(简报)被引量：1
- 1991年
- 继本实验室周明华等新近发现顶盖提取液(Te)中,有视网膜神经节细胞诱向因子(RGNTF)之后。
- 周明华任峰赵丽萍邱鹏新
- 关键词：单克隆抗体多克隆抗体
- 视网膜神经节细胞的纯化和体外存活被引量：3
- 1991年
- 我们用特异性抗体Thy1.1结合尼龙筛方法分离和纯化新生大鼠视网膜神经节细胞,比较顶盖提取液对这些纯化细胞的作用。预先以快蓝(fast blue,FB)逆行标记的视网膜细胞悬液,接种在包被了Thy1.1抗体的培养皿上30分钟,冲洗未粘附的细胞,显微镜下计数粘附细胞中FB标记的视网膜神经节细胞纯度的百分比,最高为95%。用孔径15μm尼龙筛方法分离的纯度仅为60±5%。上述两种方法纯化的视网膜神经节细胞,仅在有顶盖提取液存在时,细胞存活并生长活跃,胞体大且有突起伸出。MTT微量比色法测定培养24小时纯化细胞存活的光密度(OD)值,显示以Thy1.1特异性抗体纯化的细胞,其OD值比值(+Te/-Te)是12.3(0.111/0.009);以尼龙筛纯化的OD值比值(+Te/-Te)是6.4(0.102/0.016);未经纯化的OD值比值(+Te/-Te)是3.8(0.095/0.025)。在上述三组中,加Te与无Te细胞生存的OD值比较,相差均非常显著(P<0.01)。结论:在纯化的视网膜神经节细胞的培养中,由于排除了其他细胞所引起的非特异性反应,神经节细胞能够更直接地反映顶盖提取液的生物效应;视网膜神经节细胞纯度越高,其作用越显著。
- 赵丽萍周明华
- 关键词：视网膜神经节细胞纯化
- 对新生大鼠视觉各结构细胞之间相互作用的体外培养研究被引量：2
- 1990年
- 本实验采用分离细胞体外培养和MTT微量比色法,观察了新生大鼠视网膜(R)、顶盖浅灰质(T)、间脑后外侧部(G)和枕叶皮质(C)等细胞体外培养生长的相互影响。培养3天后,MTT微量比色法测定发现:分别取自视觉系统两个部分的混合细胞培养,除G+C和T+G生长不活跃外,其余的混合培养均比单独培养的细胞生长明显活跃(高1.3～3倍不等)。其中R+T和R+G生长最为活跃,其次为R+C和T+C。另外T的条件培养液(Tc)可使R细胞生长活跃3倍,使G细胞生长活跃2倍。R的条件培养液(Rc)增强G和C细胞生长活性分别为1.3倍和2倍。以上的实验表明,T和R的条件培养液中,可能有神经诱向因子存在。
- 周明华赵丽萍
- 关键词：视网膜细胞体外培养
- 人羊膜基膜对腹腔巨噬细胞、CCLM24黑色素瘤细胞和神经细胞生长的影响
- 1989年
- 本文采用人羊膜基膜(HABM)做为腹腔巨噬细胞、CCLM24黑色素瘤细胞和神经细胞生长的支持物,MTT定量法测定这三种细胞在HABM上的生长。发现CCLM 24黑色素瘤细胞在HABM上生长最为活跃,神经细胞次之,而巨噬细胞生长受到抑制。HABM经肝素酶Ⅰ、Ⅱ消化后,CCLM 24细胞生长更加活跃。胶原酶和软骨素酶ABC消化后其生长活性降低25％和30％。神经细胞在肝素晦Ⅰ消化的HABM上生长活跃,而其余酶消化的HABM均使神经细胞生长活性降低。提示不同的细胞在HABM上的生长性质不同。
- 周明华赵丽萍
- 关键词：羊膜细胞生长
- 酶消化后人羊膜基膜超微结构的观察
- 1990年
- 本研究通过对几种酶消化后人羊膜基膜(HABM)超微结构改变的观察,发现肝素酶Ⅱ可使HABM表层呈微绒毛状改变,并使基膜致密层和透明层变薄及小空洞等改变。推测肝素酶Ⅱ消化后的HABM,可使表面积相对增加,细胞易于附着。肝素酶Ⅱ的作用,主要是使HABM表面的硫酸乙酰肝素降解,使其内的基板蛋白暴露出神经细胞附着和生长位点,从而能使神经细胞的生长增加150％。而肝素酶Ⅰ、胶原酶Ⅰ和硫酸软骨素酶AC消化后的HABM,失去了支持神经细胞附着和生长的各种因素,结果使神经细胞的生长下降。本文从形态学的角度,支持经肝素酶Ⅱ消化后的HABM是神经细胞粘附和生长的理想支持物。
- 周明华王云亮赵丽萍
- 关键词：肝素酶酶消化电镜
