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不同黏膜上皮细胞中巨噬细胞炎性蛋白-3α转录水平的荧光定量RT—PCR比较分析被引量：2: 2008年; 目的定量比较分析不同黏膜上皮细胞中人巨噬细胞炎性蛋白-3α（MIP-3α）的转录水平。方法体外转录制备MIP-3α RNA标准品，人工合成MIP-3α mRNA序列特异的引物及TaqMan探针。利用TaqMan EZ RT-PCR试剂盒的反应体系和ABI实时荧光定量PCR仪进行实时荧光定量RT—PCR。通过对RT—PCR产物测序、使用标准品和质控品进行多次独立测试等评估实时荧光定量RT—PCR方法的特异性、灵敏度和可重复性。随后对不同黏膜上皮细胞系Caco-2、T-84、HeLa和淋巴细胞系PM1中MIP-3α mRNA水平进行了定量检测。结果建立了可用于MIP-3α mRNA水平定量检测的实时荧光定量RT—PCR方法，该方法特异性好（扩增片段测序结果与参考序列完全一致）、灵敏度高（25斗l反应体系中有5个拷贝就可以检出）、检测样品浓度范围广（10^3～10^10拷贝／m1）。对Caco-2、T-84、HeLa和PM1细胞中MIP-3αmRNA水平的定量分析表明，肠黏膜上皮细胞Caco-2和T-84的MIP-3α mRNA水平比HeLa和PM1细胞高。结论黏膜上皮细胞能表达丰富的MIP-3α，不同黏膜上皮细胞MIP-3α的表达水平可能不同。; 高彤邱趁丽赵辉刘强邵一鸣杨贵波; 关键词：黏膜上皮细胞实时荧光定量RT-PCR

中国恒河猴(Macaca mulatta)外周血CD4^+CD25^+T淋巴细胞的研究被引量：2: 2007年; 目的:研究中国恒河猴外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞亚群及其分布频率。方法:利用流式细胞术对50只中国恒河猴外周血CD4+CD25+T淋巴细胞进行了分析。结果:发现所有被检测的恒河猴个体中均存在明显的CD4+CD25+T淋巴细胞亚群;CD4+CD25+T淋巴细胞大约占CD4+T淋巴细胞的9.1%(变化范围为2.6%～18.1%);其中CD4+CD25highT淋巴细胞约占2.5%(0.3%～5.5%)。对不同年龄和性别个体中CD4+CD25+T淋巴细胞频率的初步分析未发现统计学上有年龄或性别差异。结论:中国恒河猴可用于与CD4+CD25+T细胞相关的人类疾病的研究中。; 杨贵波赵辉邱趁丽邵一鸣; 关键词：中国恒河猴调节性T淋巴细胞 CD4^+CD25^+T淋巴细胞 CD4^+CD25^HIGH T淋巴细胞

人免疫缺陷病毒对不同黏膜上皮细胞系的感染能力的研究: 2008年; 目的研究人免疫缺陷病毒（HIV-1）对不同黏膜上皮细胞系的感染能力。方法用实验室株HIV-1 SF33和2株原代HIV-1（02010561，02010141）分别感染Caco-2、T-84和HeLa3株黏膜上皮细胞和MT-4细胞。接种病毒后间隔3～4d采集培养上清检测P24并用实时定量RT-PCR检测病毒载量；采集细胞提取DNA并用PCR法检测感染细胞中病毒DNA和整合入细胞基因组内的病毒DNA。结果所用3株病毒都可以产毒性地感染阳性对照细胞MT-4，对整合病毒DNA的PCR检测发现它们均能够整合到MT-4细胞基因组内；实验室适应株HIV-1 SF33虽然能够感染所有3株上皮细胞，但它不能整合入Caco-2细胞的基因组中；虽然2株原代分离病毒均能感染T-84细胞，但只有HIV-1 02020141能够整合入T-84细胞的基因组中，原代分离病毒HIV-1 02010561能够感染HeLa细胞，但不能整合到其基因组中。结论虽然HIV-1的实验室毒株和原代分离毒株都可能感染黏膜上皮细胞，但它们在黏膜上皮细胞中建立稳定产毒性感染（感染并产生病毒）的能力因细胞和毒株不同而异。; 李悦赵辉杜军全宇邢辉陈启民邵一鸣杨贵波; 关键词：人免疫缺陷病毒黏膜上皮细胞

中国恒河猴(Macaca mulatta)外周血Th17细胞及其在SHIV感染后的变化被引量：3: 2008年; 目的:对正常中国恒河猴(Macaca mulatta)及嵌合猿猴/人免疫缺陷病毒(SHIV)感染过的中国恒河猴外周血中CD4+IL-17A+和CD4-IL-17A+T淋巴细胞的分布频率进行初步观察。方法:用荧光染料标记的单克隆抗体(mAb)对10只中国恒河猴的外周血或PMA+Ionomycin刺激后的PBMC细胞表面的CD3、CD4、CD8及细胞内IL-17A进行免疫荧光染色。用FACScalibaur获取染色后的样品,所得数据用CellQuest进行分析。结果:在6只正常中国恒河猴个体中均能检测到IL-17A+淋巴细胞,未经刺激培养的样品中IL-17A+细胞频率很低,但在短期刺激培养后淋巴细胞中具有约1.4%的淋巴细胞为IL-17A+细胞,明显多于刺激前的IL-17A+淋巴细胞;在短期刺激培养后CD3+CD4+淋巴细胞中大约有2.7%的IL-17A+细胞或CD4+Th17细胞。对4只SHIV感染个体中Th17细胞的初步分析未发现它们与正常个体间的统计学差异。结论:与人类相似,中国恒河猴的外周血中也存在一定比例的Th17细胞,为进一步利用恒河猴AIDS动物模型分析HIV/AIDS与Th17细胞的关系提供了基础。; 邱趁丽赵辉杨贵波; 关键词：中国恒河猴

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赵辉