郝茹
- 作品数：3 被引量：33H指数：2
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 家兔供体细胞的发育周期与重构胚发育的关系被引量：4
- 2004年
- 采用血清饥饿法处理体外培养的兔子胎儿成纤维细胞,并将其作为供体细胞移入去核卵母细胞内构建重构胚胎。检查供体细胞的细胞周期对重构胚的融合率、分裂率和着床率的影响。实验结果表明:培养基中血清含量在0.5%的情况下,G0/G1期的细胞比例由正常培养条件下(培养液中含有10%FCS)的73.2%明显地增加到86%以上。饥饿1-3天的细胞作为供体细胞构建重构胚时,可明显提高重构胚的融合率,但是不同的饥饿时间其融合率并无显著的差异。饥饿处理可明显增加重构胚的分裂率,以饥饿处理3天为最佳。
- 郝茹王玉阁张正旺杜淼
- 关键词：家兔供体细胞胎儿成纤维细胞体细胞核移植
- 哺乳动物核质关系的研究
- 家兔具有繁殖力高,繁殖周期短,产仔率高,与一般的实验动物相比易于饲养和管理等优点,并且与啮齿类相比更接近于灵长类,是一种很好的模型实验动物,在发育生物学和生殖生物学实验研究中被广泛使用.到目前为止,核移植的成功率仍非常的...
- 郝茹
- 关键词：胎儿成纤维细胞体细胞核移植供体细胞血清饥饿异种克隆
- 文献传递
- 转基因克隆奶山羊大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ蛋白质(rhATⅢ)被引量：29
- 2008年
- 利用转基因克隆奶山羊乳腺生物反应器大量生产重组人的抗凝血酶Ⅲ(rhATⅢ)蛋白质。其中包括:筛选出人的抗凝血酶Ⅲ蛋白基因的cDNA序列;利用山羊的β-酪蛋白基因的启动区,终止信号和Enterokinase蛋白酶酶切DNA序列,构建在乳腺中特异表达rhATⅢ的表达载体。同时在转基因载体的末端连接一个新酶素筛选基因(Neomycin)。再以细胞转染、G418筛选和体细胞核移植(动物克隆)等过程,最后获得含有人的抗凝血酶Ⅲ基因的转基因克隆奶山羊。我们共获得了5个原代转基因公羊。第一只克隆羊在出生后78 d死亡,解剖表明:羊的肺部和肾脏等器官有异常。其它克隆公羊经过与崂山种母羊交配,得到转基因后代,其中两个原代转基因羊的后代母羊已成熟、所获得的奶经蛋白质电泳证明:转基因克隆羊后代奶中含有约60 kD大小的rhATⅢ糖蛋白;经Elisa检测表明:在奶中含有大量活性的rhATⅢ,在来源于两个不同克隆公羊的后代母羊奶中的rhATⅢ含量分别为0.4mg/L和3 g/L。此研究证明:转基因奶山羊可以大量地生产具有很高活性的rhATⅢ。用这种方法生产的rhATⅢ通过蛋白质提纯,制成注射针剂,将可用于人的抗凝血酶Ⅲ缺乏症的治疗、预防血栓和重大手术过程中的止血的作用等。
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- 关键词：山羊转基因
