陈丹亮
- 作品数：8 被引量：34H指数：3
- 供职机构：暨南大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 相同供体来源人脐带间充质干细胞的多批次原代分离被引量：1
- 2019年
- 目的建立一种相同供体来源人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的多批次原代分离技术,提高脐带标本利用度和干细胞产量。方法采用组织块贴壁法分离hUC-MSCs。脐带组织块贴壁培养前预先用血清浸泡;收获首批hUC-MSCs的同时,回收仅利用1次的脐带组织块,重新铺板培养,相同供体来源的脐带组织块共反复培养3次,即:分3批次从组织块中分离hUC-MSCs;同时,收集第1、2批次原代培养体系的培养上清,转瓶后单独孵育,从中收获hUC-MSCs。比较各批次hUC-MSCs的最早出现时间、第1次传代时间、细胞数量等,并鉴定其细胞形态、免疫表型、增殖及分化能力。结果用血清预先浸泡脐带组织块,可显著缩短原代细胞收获时间、提高组织块培养成功率和增加细胞产量。与初次培养的脐带组织块相比,回收的脐带组织块及其培养上清均可在较短时间内获得数量更多的原代细胞。脐带组织块通过3次贴壁培养和2次上清回收孵育所获得的原代细胞总数,为相同实验条件下传统分离方法的(27.48±3.98)倍。各批次细胞均具有典型的间充质干细胞形态、免疫表型,以及正常和相近的增殖、分化能力。结论脐带组织块具有持续多次产出hUC-MSCs的能力,其培养上清也可作为hUC-MSCs的来源,基于此建立的多批次分离方法极大地提高了源自同一脐带标本的原代干细胞的分离效率和产量,实现了相同供体hUC-MSCs的高质量、多批次稳定分离。
- 黄思瑞匡梅娜袁茵鲁欣陈丹亮
- 关键词：间充质干细胞脐带
- 肥胖产妇胎儿宫内胰岛素抵抗及炎性标记物研究被引量：1
- 2020年
- 目的了解肥胖产妇的胎儿是否存在胰岛素抵抗和炎症状态。方法选取2018年2月-2019年4月在暨南大学附属第一医院建立产前档案并生产的单胎足月妊娠(37~40周)剖宫产产妇102例作为研究对象。按照孕前体质量指数(BMI)分为偏瘦组[BMI<25(kg/m^2),50例]和肥胖组[BMI>30(kg/m^2),52例]。产妇入院后采集空腹静脉血,新生儿娩出后5 min内采集脐带血。检测产妇和新生儿血糖、胰岛素、细胞炎症因子等指标。分娩后24 h内进行新生儿的身体成分测量。结果与偏瘦组产妇相比较,肥胖组产妇的空腹胰岛素[(26.0±14.6)μU/mL vs(11.8±5.6)μU/mL,P=0.0001]、葡萄糖[(79.4±11.3)mg/dL vs(74.3±7.2)mg/dL,P=0.009]和BMI[(38.4±6.3)kg/m^2 vs(22.0±1.9)kg/m^2,P=0.0001]均显著增加。肥胖产妇的胎儿空腹脐带胰岛素[(9.23±4.72)μU/mL vs(7.01±3.82)μU/mL,P=0.008]和葡萄糖[(66.35±14.56)mg/dL vs(60.01±13.44)mg/dL,P=0.03]显著高于偏瘦组产妇胎儿。与偏瘦组产妇相比较,肥胖组产妇血清瘦素,白细胞介素-6(IL-6)和血浆C反应蛋白(CRP)浓度增加差异具有统计学意义(P<0.05),但循环血浆肿瘤坏死因子(TNF-C)或脂联素浓度差异无统计学意义(P>0.05)。肥胖组产妇胎儿脐带瘦素水平高于偏瘦组产妇胎儿[(14.7±13.6)ng/mL vs(8.2±4.7)ng/mL,P=0.001]。肥胖组产妇胎儿TNF-C和CRP有增加的趋势,但两组差异无统计学意义(P>0.05)。肥胖组产妇的胎儿脐带血IL-6水平显著高于偏瘦组产妇的胎儿[(3.5±2.3)ng/mL vs(2.4±1.4)ng/mL,P=0.02]。肥胖组产妇的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)高于偏瘦组产妇,差异有统计学意义(P<0.001)。肥胖组产妇胎儿的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)高于偏瘦组产妇的胎儿,差异有统计学意义(P<0.001)。肥胖组产妇与其胎儿的HOMA-IR呈强烈的正相关(r^2=0.832,P<0.001)。肥胖组产妇胎儿体脂肪百分含量与胰岛素抵抗指数之间均存在较强的相关性(r2=0.348,P<0.0001)。结论母亲肥胖会给子代带来较大
- 冯彩珍左莉陈丹亮李燕利黄新可
- 关键词：胰岛素抵抗炎症标记物围产期
- 人脐带间充质干细胞外泌体递送外源miR-130a-3p抑制人肺癌A549细胞的研究被引量：1
- 2021年
- 目的观察人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)外泌体介导的外源miR-130a-3p摄取对肺癌A549细胞的影响。方法采用超速离心法分离hUC-MSCs外泌体,透射电子显微镜鉴定外泌体形态和大小,Westernblot检测外泌体标志性蛋白(CD63、CD81)表达,纳米粒度分析仪(NTA)测定外泌体颗粒浓度和粒径分布;通过瞬时转染制备负载miR-130a-3p mimic的hUC-MSCs外泌体(130a-exo),用130a-exo处理A549细胞,RT-qPCR检测A549胞内miR-130a-3p含量,CCK-8法测定细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞凋亡。结果从hUC-MSCs培养上清中分离的纳米颗粒符合外泌体的典型特征。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,130a-exo组A549细胞的miR-130a-3p水平显著升高(P<0.01)。与对照组相比,130a-exo组A549细胞的增殖能力显著降低(P<0.01),体外迁移能力明显下降(P<0.05),早期凋亡率显著升高(P<0.05),晚期凋亡率亦明显增加(P<0.01)。结论hUC-MSCs外泌体可将外源miR-130a-3p递送至肺癌A549细胞而发挥抑癌作用。
- 李锦华陈丹亮鲁欣王宇恒唐震林袁茵
- 关键词：外泌体脐带间充质干细胞肺癌细胞系
- 早孕期血红蛋白水平对妊娠结局的影响被引量：3
- 2020年
- 目的评估早孕期血红蛋白(hemoglobin,Hb)水平对妊娠结局的影响。方法回顾性分析2016年1月至2017年5月在暨南大学附属第一医院定期产检和分娩的1306例女性的临床资料,根据Hb水平将其分为3组:低Hb组(Hb<110 g/L,490例),中Hb组(110≤Hb<130 g/L,673例),高Hb组(Hb≥130 g/L,143例)。再将低Hb组分为2个亚组:极低Hb组(Hb≤90 g/L,64例)和较低Hb组(Hb>90 g/L,426例)。分析比较各组的一般资料及妊娠结局。结果3组孕妇的妊娠期高血压疾病发生率、早产率、NICU住院率、产后出血率、分娩孕周、新生儿出生体重、Apgar评分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。组间比较,中Hb组的分娩孕周、出生体重、1 min Apgar评分均较低Hb组和高Hb组高,高Hb组的妊娠期高血压疾病发生率较低Hb组和中Hb组高,差异有统计学意义(P<0.05)。高Hb组的早产率、NICU住院率较高,低Hb组的产后出血发生率较高。极低Hb组和较低Hb组妊娠期高血压疾病患病率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Hb水平过高或过低都与不良妊娠结局有关,建议在妊娠期间筛查Hb水平以减少不良妊娠结局,确保母儿平安。
- 李鑫黄新可左莉丘保华陈丹亮汪珍秀
- 关键词：早孕期血红蛋白
- Effectene介导钆喷酸葡胺标记人脐带间充质干细胞及体外磁共振成像研究
- 2014年
- 目的应用Effectene介导钆喷酸葡胺(Gd-DTPA)标记人脐带间充质干细胞(hUCMSCs),研究磁标记干细胞的生物学特性,探讨Gd-DTPA标记干细胞体外磁共振成像(MRI)规律。方法组织块贴壁法分离纯化hUCMSCs,通过传代培养、扩增,鉴定细胞在体外的生物学特性。应用Effectene转染Gd-DTPA标记hUCMSCs,计数法检测Gd-DTPA标记干细胞的增殖能力,体外诱导其向成脂细胞和成骨细胞分化,观察Gd-DTPA影响hUCMSCs的生物学特性。应用1.5T临床应用型MRI系统,观察Gd-DTPA标记hUCMSCs的信号强度随细胞传代的变化规律,并探索MRI的最低细胞量。结果应用组织块贴壁法接种2周后获得原代细胞,细胞呈长梭形,漩涡样生长,传2代后细胞形态更为均匀一致。流式细胞仪检测第3代细胞高表达CD29、CD44、CD90和CD105,不表达CD31、CD45、CD40和HLA-DR。体外定向诱导能分化为成脂细胞和成骨细胞。Effectene能成功转染Gd-DTPA进入干细胞,检测标记后的干细胞增殖能力未受到影响,并能在体外诱导向成骨细胞和成脂细胞分化。体外MRI扫描Gd-DTPA标记的干细胞在T1WI呈现高信号,体外持续示踪时间约12 d。结论应用组织块贴壁法能有效分离纯化hUCMSCs。应用Effectene转染Gd-DTPA标记hUCMSCs进行体外MRI示踪是可行的。
- 帅翰林史长征宋泓陈丹亮朱小华罗新
- 关键词：间充质干细胞钆喷酸葡胺示踪
- 甲基纤维素沉降对脐带血单个核细胞分离效果的影响
- 2014年
- 目的研究甲基纤维素沉降预处理对密度梯度离心法分离脐带血单个核细胞效果的影响。方法取等量的同份脐带血,分别采用Ficoll密度梯度离心一步法和甲基纤维素-Ficoll两步法分离脐带血单个核细胞,倒置显微镜下计数并结合台盼蓝拒染法判定细胞活力,流式细胞术检测其中的造血干细胞以及NK细胞亚群的含量。结果通过2种分离方法分离得到的脐带血单个核细胞的数量、细胞活力和CD34+造血干细胞的含量差异无统计学意义,但通过两步法获得的脐带血CD56+、CD3-CD56dim以及CD3-CD56bright等NK细胞亚群的含量比一步法有明显提高。结论甲基纤维素沉降不影响脐带血单个核细胞的得率、细胞活力以及其中的造血干细胞含量,且较好地保存了脐带血中以CD56分子为主要标志的NK细胞亚群。
- 袁茵鲁欣陈丹亮邵红伟黄树林
- 关键词：脐带血单个核细胞甲基纤维素自然杀伤细胞
- 新式剖宫产腹壁切口3种缝合方式效果比较被引量：25
- 2011年
- 目的探讨剖宫产过程中腹壁横切口更好的缝合方法。方法选择符合要求并经新式剖宫产术结束分娩的患者300例,分为不缝合皮下脂肪层直接行皮内连续缝合、常规皮内连续缝合、新式间断缝合3组,每组100例,分析其切口缝合时间、切口愈合不良反应及术后42 d切口瘢痕增生发生率等指标。结果 (1)不缝合皮下脂肪层直接行皮内连续缝合组手术时间[(4.5±1.5)min vs(6.7±1.8)min,P=0.000]、拆线时切口愈合不良(7%vs 66%,P=0.000)、术后42 d切口瘢痕增生发生率(3%vs 5%,P=0.000)均低于常规皮内连续缝合组;(2)与新式间断缝合组相比,不缝合皮下脂肪层直接行皮内连续缝合组术后42 d皮下硬结发生率低(2=11.06,P=0.001)。结论剖宫产腹壁横切口皮下脂肪层不缝合的皮内连续缝合法具有手术时间短、切口愈合不良发生率低及恢复快等优点,是一种更好的剖宫产腹壁横切口缝合方法。
- 陈丹亮缪缙李瑞满陈新
- 关键词：剖宫产皮内连续缝合
- 人脐带间充质干细胞通过激活Notch信号通路促进白血病细胞株Jurkat的体外存活(英文)被引量：3
- 2014年
- 目的研究人脐带间充质干细胞对白血病细胞株Jurkat体外增殖和存活能力的影响并探讨相关机制。方法组织块贴壁法分离人脐带间充质干细胞,将其作为基质细胞与Jurkat细胞进行直接接触共培养。通过免疫磁珠法分离共培养体系中的Jurkat细胞,流式细胞术检测Jurkat细胞增殖能力、细胞周期和自发凋亡率的变化;Western blotting法检测共培养后Jurkat细胞内Notch信号通路的活化状况。结果共培养4 d后,Jurkat白血病细胞的增殖减缓、细胞周期被阻滞于G0/G1期,而其自发凋亡率则出现显著下降,并伴有Notch信号通路靶分子HES-1表达量的增加。结论人脐带间充质干细胞构成的微环境对Jurkat白血病细胞有保护作用,Notch信号通路可能参与了这一过程。
- 袁茵陈丹亮陈璇邵红伟黄树林
- 关键词：间充质干细胞脐带白血病NOTCH信号通路
