陈彩宇
- 作品数：42 被引量：64H指数：3
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金重庆市杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- G蛋白偶联受体激酶4对内皮素B型受体的异常调节在原发性高血压发生中的作用被引量：4
- 2015年
- 目的探讨G蛋白偶联受体激酶4（G protein-coupled receptor kinase 4,GRK4）对内皮素B型受体（endothelin receptor B,ETB）的异常调节在原发性高血压中的作用及机制。方法选用12～14周龄,体质量300 g左右的雄性自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHRs）及其对照鼠（Wistar-Kyoto,WKY）各10只,通过无创鼠尾测压仪测定血压,采用右肾上腺静脉插管灌注ETB受体特异性激动剂BQ3020后观察尿流速及尿钠排泄率,荧光定量PCR检测大鼠肾脏GRK4 mRNA水平,Western blot测定大鼠肾脏GRK4及ETB受体的蛋白表达差异,免疫共沉淀法检测ETB受体磷酸化情况,在动物水平观察高血压状态下ETB受体的功能情况。结果 ETB受体激动剂BQ3020对WKY大鼠有明显利尿排钠作用,且这种利尿排钠作用可以被ETB受体抑制剂BQ788阻断,但在SHR大鼠BQ3020的利尿排钠作用受损[尿流速：（11.23±2.16）vs（3.49±1.32）,P〈0.05];尿钠排泄率：[（1 551.43±393.47）vs（601.16±128.15）,P〈0.05];在SHR大鼠肾皮质GRK4的蛋白水平及mRNA水平均较WKY大鼠高[蛋白：（1.38±0.10）vs（0.85±0.07）,P〈0.05];mRNA：[（2.23±0.15）vs（0.78±0.16）,P〈0.05],SHR大鼠ETB受体总蛋白水平与WKY大鼠相比差异无统计学意义（P〉0.05）,但ETB受体磷酸化水平增高。结论 GRK4可能通过对内皮素B型受体的异常调节,参与了原发性高血压发生与发病。
- 李美香郑硕姚勇刚陈彩宇任红梅曾春雨周林
- 关键词：尿钠排泄原发性高血压
- G蛋白偶联受体激酶4对氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响
- 2015年
- 目的研究G蛋白偶联受体激酶4(GRK4)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响。方法以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞)为靶细胞,检测在不同浓度的ox-LDL(10、20、30、40、60、80 mg/L)刺激下A10细胞的增殖情况;观察ox-LDL(40 mg/L)刺激下A10细胞GRK4表达变化;用siRNA干扰A10细胞GRK4表达后,检测ox-LDL对A10细胞增殖的影响。Western blot检测GRK4蛋白表达,CCK-8检测细胞增殖活力。结果用不同浓度ox-LDL刺激A10细胞,发现ox-LDL(40 mg/L)刺激下细胞增殖幅度可达78.3%(P<0.05),且细胞GRK4蛋白表达增加[实验组(0.367 9±0.049 1),对照组(0.193 0±0.038 5),P<0.05];与对照组相比,用siRNA干扰A10细胞GRK4表达后ox-LDL对A10细胞增殖的影响明显减弱[对照组(1.050 1±0.302 9),ox-LDL刺激组(1.929 1±0.390 0),siRNA组(1.403 2±0.164 4),P<0.05]。结论 ox-LDL可增强GRK4表达,干扰细胞GRK4表达后可减弱ox-LDL诱导的大鼠平滑肌细胞的增殖。
- 徐雪飞李美香任红梅韩愈陈彩宇周林曾春雨
- 关键词：OX-LDL血管平滑肌细胞增殖
- 脯氨酸羟化酶Ⅱ对脂肪间充质干细胞旁分泌介导的心肌保护的影响
- 王微王伟彭玉兰刘莉周永巧陈彩宇于长青何多芬曾春雨
- 多巴胺D1受体通过PKC途径调节肾近曲小管上皮肾胺酶的表达被引量：2
- 2011年
- 目的研究多巴胺D1类受体对Wistar-Kyoto(WKY)大鼠肾近曲小管上皮细胞(renal proximal tubule,RPT)中肾胺酶(renalase)的表达与活性的影响及其作用机制。方法以WKY大鼠RPT细胞株为实验对象,采用RT-PCR方法检测D1类受体激动剂fenoldopam对renalase mRNA转录水平的影响,免疫印迹法(Western blot)测定蛋白表达的变化,尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)氧化法检测renalase活性。结果多巴胺D1类受体激动剂fenoldopam(10-6 mol/L)作用24 h可显著上调WKY大鼠RPT细胞renalase的mRNA[(1.09±0.07)vs(0.67±0.11)]和蛋白[(1.12±0.10)vs(0.73±0.05)]表达水平(P<0.05)。与对照组相比,fenoldopam(10-6 mol/L)刺激24 h后,RPT细胞renalase的NADH氧化活性也明显增高[(3.98±0.06)vs(3.55±0.13),P<0.05]。fenoldopam上调WKY大鼠RPT细胞的renalase的转录、蛋白合成和活性,并呈一定的浓度依赖性。fenoldopam对renalase的上调作用可以被蛋白激酶C抑制剂(protein kinase C inhibitor,PKCI,即PKC抑制肽19-31,10-6 mol/L)所阻断。结论多巴胺D1类受体能够增强WKY大鼠RPT细胞中renalase的表达水平与活性,该调解作用与PKC信号途径有关。
- 王少雄杨剑陈彩宇韩愈任红梅何多芬曾春雨
- 关键词：肾近曲小管上皮细胞蛋白激酶C
- 多巴胺D_1类受体对神经肽Y受体介导的促血管平滑肌细胞增殖的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨多巴胺D1类受体对神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)受体介导的Sprague-Dawley(SD)大鼠原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法以NPY(10-8～10-11mol/L)刺激SD大鼠胸主动脉培养的VSMCs,观察在D1类多巴胺受体激动剂Fenoldopam(10-8mol/L)存在的情况下,神经肽Y促VSMCs增殖作用的变化。细胞增殖的检测采用[3H]胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)掺入率的变化表示及MTT方法。结果 NPY呈浓度依赖性促进SD大鼠VSMCs的异常增殖,最高增殖幅度达(77±9)%(P<0.05),该增殖作用由NPY Y1受体亚型介导。多巴胺D1类受体激动剂Fenoldopam对VSMCs无增殖影响,但Fenoldopam可抑制NPY Y1亚型受体介导VSMCs的增殖作用,该作用通过PKA途径发挥作用。结论多巴胺D1类受体激活抑制NPY受体介导的促VSMCs增殖作用,可能参与心血管疾病的发生、发展过程。
- 周永巧王震刘莉王微韩愈陈彩宇任红梅何多芬杨剑曾春雨
- 关键词：多巴胺受体血管平滑肌细胞
- G蛋白偶联受体激酶4对大鼠血管平滑肌细胞AT_1受体的调节作用被引量：2
- 2012年
- 目的应用siRNA干扰抑制大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞G蛋白偶联受体激酶4(G protein-coupled recep-tor kinase 4,GRK4)的表达,探讨GRK4对血管紧张素Ⅱ1型(angiotensinⅡtype 1,AT1)受体的调节作用。方法免疫组化检测大鼠回结肠动脉血管平滑肌组织GRK4蛋白表达;以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞株)为研究对象,免疫印迹检测GRK4、AT1受体蛋白表达变化,免疫共沉淀检测GRK4和AT1受体的相互作用和AT1受体磷酸化改变。结果大鼠动脉平滑肌组织GRK4表达良好;siRNA干扰后,GRK4蛋白表达明显下降(P<0.05);AT1蛋白表达降低(P<0.05),AT1受体磷酸化明显增强(P<0.05);GRK4和AT1受体存在共连接,抑制GRK4表达后增加GRK4与AT1受体之间的共连接。结论 GRK4能够调控大鼠胸主动脉平滑肌细胞AT1受体蛋白表达及其磷酸化状态,该调节作用可能与两者的共连接有关。
- 刘莉杨剑陈彩宇王微周永巧韩愈何多芬周林曾春雨
- 关键词：血管平滑肌细胞原发性高血压
- 妊娠期糖尿病对子代大鼠肾脏多巴胺D1受体介导的尿钠排泄功能的影响
- 2018年
- 目的探讨妊娠期糖尿病对子代大鼠肾脏多巴胺D1受体介导的尿钠排泄功能的影响。方法将SpragueDawley(SD)孕鼠随机分为妊娠期对照组(10只)和妊娠期糖尿病组(10只),妊娠期糖尿病组大鼠在孕期第0天腹腔注射链脲佐菌素(STZ,35mg/kg),而妊娠期对照组大鼠给予注射等体积的0.9%生理盐水。子代大鼠出生后,分别从2组中按随机数字表法选取20只雄性大鼠进行实验。采用无创鼠尾测压仪从4周龄连续检测子代大鼠血压至16周;代谢笼收集16周龄子代大鼠24h尿液;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测16周龄子代大鼠肾脏丙二醛和超氧化物歧化酶(SOD)活性;肾上腺动脉灌注多巴胺D1受体激动剂(Fenoldopam)测定其介导的尿钠排泄功能;进一步检测肾脏G蛋白耦联受体激酶4(GRK4)、多巴胺D1受体的表达及磷酸化水平。结果 12、14、16周龄妊娠期糖尿病子代大鼠血压明显高于妊娠期对照组子代大鼠[(134±4)比(123±4),(138±6)比(126±3),(141±5)比(124±5)mm Hg,均P<0.05];糖尿病母鼠的子代24h尿量及尿钠排泄率明显低于妊娠期对照组子代大鼠(P<0.05);通过肾上腺动脉灌注Fenoldopam,其介导的排钠利尿作用(尿流速和尿钠排泄率)明显低于妊娠期对照组子代大鼠(P<0.05)。与妊娠期对照组子代大鼠比较,糖尿病母鼠的子代丙二醛水平明显升高,而SOD活性明显降低(P<0.05)。糖尿病母鼠的子代肾脏GRK4表达及多巴胺D1受体磷酸化水平显著高于妊娠期对照组子代大鼠(P<0.05)。结论妊娠期糖尿病引起子代大鼠肾脏多巴胺D1受体功能受损,其机制可能与氧化应激水平升高,引起肾脏GRK4表达增加,导致肾脏多巴胺D1受体过度磷酸化有关,其可能是引起子代大鼠高血压发生的重要机制之一。
- 罗浩陈彩宇罗晓丽王红勇曾春雨
- 关键词：妊娠期糖尿病子代肾脏多巴胺
- 多巴胺D3受体对醛固酮介导的血管平滑肌细胞增殖的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察多巴胺D3受体对醛固酮介导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A10细胞)为研究对象,观察在醛固酮10-10～10-7mol/L、多巴胺D3受体激动剂(PD128907)10-10～10-7mol/L分别单独作用,醛固酮10-7mol/L、PD128907 10-10～10-7mol/L共同作用以及D3受体拮抗剂(U99194A)、PD128907 10-7mol/L和醛固酮10-7mol/L共同作用的情况下,A10细胞增殖幅度的变化,细胞增殖用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法测定。Western blot检测ERK1/2、p-ERK1/2表达。结果醛固酮呈浓度依赖性地促进A10细胞的增殖,其最大促增殖作用幅度达(65±6)%(P<0.05)。PD128907本身对A10细胞增殖无影响,但PD128907可通过D3多巴胺受体减弱醛固酮(10-7mol/L)介导的A10细胞增殖,在10-7mol/L浓度时可使促增殖幅度降低至(12±6)%(P<0.05),应用D3受体阻断剂U99194A后该抑制作用丧失。PD128907能够降低醛固酮(10-7mol/L)对ERK1/2信号的磷酸化激活效果。结论多巴胺D3受体激活对醛固酮介导的促VSMCs增殖有明显抑制效应。
- 李源陈彩宇杨剑周发英王娜杨德忠曾春雨
- 关键词：多巴胺受体醛固酮血管平滑肌细胞
- CFH基因rs1061170多态性与冠心病的关系研究
- 目的在人类动脉粥样病变中能观察到补体因子H(CFH,complement factor H)的存在。补体因子H通过调节补体激活从而阻止动脉粥样硬化的进程,同时也可介导免疫的病理损伤。近年来Qian Q等研究CFH基因C等...
- 杨成明周娟陈鹏陈彩宇张小群曾春雨
- 文献传递
- SELEX技术筛选入rhTGF—βsRⅡ亲和核酸库方法的建立
- 2004年
- 目的建立SELEX技术筛选rhTGF-βsRⅡ单链DNA亲和核酸库的方法，为后续分离rhTGF-βsRⅡ的单一核酸适体奠定基础。方法体外构建了一个长度为108nt、含60个随机核苷酸序列的ssDNA随机库。将靶蛋白rhTGF-βsRⅡ预先吸附到固相栽体Phenyl-Agarose上，再与ssDNA随机库温育，洗脱未结合核酸片段，回收与rhTGF-βsRⅡ结合的ssDNA。行PCR扩增时，采用5’端生物素化的下游引物，使PCR产物偶联上生物素。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化PCR产物。利用Immobilized Streptavidjrr-Agarose捕获dsDNA，0．15N的NaOH使双链变性，释放非生物素标记的ssDNA，回收后用于下一轮筛选。随着筛选的进行，严谨度不断增加。结果经过8轮筛选后，富集库对靶蛋白的亲和力从0.76％上升到17.18％。结论成功建立了SELEX技术筛选rhTGF-βsRⅡ亲和核酸库的方法。
- 刘晓静朱旭东胡承香李磊梁华平吕凤林陈彩宇
- 关键词：SELEX技术SSDNA分子生物学
