陈来同
- 作品数：20 被引量：125H指数：7
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- 相关领域：生物学医药卫生化学工程文化科学更多>>
- 人胰岛素突变体的分离纯化及性质研究被引量：1
- 1995年
- 将人胰岛素原突变体（Ａ４Ｇｌｕ→Ｌｅｕ）基因重组到ｐＢＶ２２０表达载体上，在Ｅ．ｃｏｌｉ系统中得到高效表达，表达产物经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱层析分离以及胰蛋白酶和羧肽酶Ｂ的酶促转化等步骤，可得到纯的人胰岛素突变体（Ａ４Ｇｌｕ→Ｌｅｕ），其氨基酸组成与预期值相符，其受体结合活性及生物活性与标准猪胰岛素的基本相同。
- 陈来同唐建国胡美浩
- 关键词：人胰岛素突变体胰岛素提纯
- 人胰岛素原类似物（B－Arg－Arg－A）基因的构建和表达被引量：6
- 1995年
- 用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法将Ｃ肽为６个氨基酸残基的胰岛素原类似物基因删除突变成Ｃ肽仅为２个精氨酸残基的胰岛素原类似物（ＢＡｒｇ－Ａｒｇ－Ａ）基因，即把ｐＵＣ１８ＢＣ＇Ａ改建为ｐＵＣ１８ＢＲ＿２Ａ。再将ｐＵＣ１８ＢＲ＿２Ａ与ｐＪＧ１０５重组为表达质粒ｐＪＧ１０７，使Ｂ－Ａｒｇ－Ａｒｇ－Ａ与ｐＪＧ１０５编码的一种多肽构成融合蛋白在大肠杆菌体系中表达。融合蛋白占细菌蛋白总量的５８％。表达产物具有人胰岛素放射免疫活性。
- 李雄彪谢斌陈来同唐建国胡美浩
- 关键词：胰岛素类聚合酶链反应基因表达
- 离子交换层析分离核苷酸的实验方法被引量：2
- 2011年
- 对传统的离子交换层析分离单核苷酸实验方法进行改革和创新。以强碱型阴离子交换树脂、采用梯度洗脱和阶段洗脱对酵母RNA水解液进行分离,利用标准核苷酸的参数确定层析峰的核苷酸种类。不但可以使学生全面掌握离子交换层析技术,而且经过对标准核苷酸性质的研究及核苷酸的鉴定,还可将原有实验内容从一个简单的分离纯化实验提升为研究性实验,从而有效调动了学生的学习兴趣和学习热情,明显提高了学生的综合实验能力。
- 胡晓倩钟长明陈来同
- 关键词：核苷酸梯度洗脱
- 去B链羧端三肽人胰岛素的分离纯化及其性质研究被引量：5
- 1996年
- 将去Ｂ链羧端三肽人胰岛素原基因克隆到表达质粒ｐＢＶ２２０上，在大肠杆菌系统中经温度诱导表达，表达产物占细胞总蛋白量的１２％，表达产物经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱层析分离以及胰蛋白酶和羧肽酶Ｂ的酶促转化等步骤，可得到去Ｂ链羧端三肽人胰岛素，其纯度达９３％，其氨基酸组成与预期值相符，但其受体结合活性仅是标准猪胰岛素的４５％．
- 陈来同黄春媚张曼杨志茹胡美浩
- 关键词：胰岛素人胰岛素提纯
- 凝胶过滤分离蛋白质实验条件的研究被引量：8
- 2007年
- 目的研究凝胶过滤各影响因素对蛋白质分离的影响。方法应用一般色谱方法,选择葡聚糖凝胶Sephadex G-75和几种蛋白质对装柱、洗脱液、流速和操作压等条件进行试验。结果选用不同浓度的凝胶悬液进行装柱,不同离子成分、pH的洗脱液,不同流速和操作压对几种蛋白质进行色谱分离,得到不同的结果。结论凝胶悬液较稀利于装柱,洗脱液的离子成分不直接影响分离效果,而洗脱液的pH对几种蛋白质分离产生明显影响,酸性条件下分离的效果好,适当的流速和操作压有利于提高色谱柱的分辨率,保证色谱柱的反复正常使用。
- 胡晓倩陈来同陈雅蕙聂力嘉
- 关键词：凝胶过滤蛋白质分离
- 用重组DNA技术获得高疗效的胰岛素类似物制剂被引量：1
- 1996年
- 尽管胰岛素是治疗胰岛素依赖型糖尿病的特效药物,但在生理条件下它却很难发挥象体内分泌胰岛素的作用,即便用大家公认的速效型和长效型制剂也是如此。采用重组DNA技术,可按合理的设计方案,制备出具有与常规胰岛素制剂不同的药物动力学和药物学性质的胰岛素类似物产生高的治疗效果,使人们多年的梦想变为现实。这些类似物包括在注射部位吸收很慢的长效胰岛素。从胰岛素的临床结果分析,我们可以断言,下一代胰岛素制剂将是通过工业生物技术精心合理设计,由重组DNA技术获得的高疗效胰岛素类似物制剂。
- 陈来同胡美浩
- 关键词：胰岛素类似物
- 全文增补中
- SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法被引量：10
- 2011年
- 目的建立一种操作简便、快速、灵敏度高、无毒的蛋白质电泳染色方法。方法利用考马斯亮蓝G-250(CBB G-250)在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后对蛋白质条带进行染色,对不同染色条件进行探讨,并与考马斯亮蓝R-250(CBB R-250)染色法进行比较。结果 CBB G-250染色法试剂无毒,背景浅,经改良其灵敏度与CBB R-250染色法相当,达到0.1～0.5μg。结论 CBB G-250染色方法简单经济,灵敏度能够满足一般要求,适用于蛋白质电泳结果的快速分析。
- 胡晓倩陈来同赵健
- 关键词：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法灵敏度
- 去B链羧端三肽人胰岛素原的基因构建和表达
- 1995年
- 用改进的寡核苷酸诱导突变法将人胰岛素原基因（ＢＣＡ）删除编码Ｂ链羧端三肽（２８～３０残基）的碱基片段，得到去Ｂ链羧端三肽胰岛素原的基因（Ｂ￣（－３）ＣＡ）。为了便于表达产物的蛋白质后加工，又用ＰＣＲ的方法在Ｂ链Ｎ端起始Ｍｅｔ与Ｐｈｅ密码子之间增加了编码Ｌｙｓ的３个碱基，得到改造后基因ＬＢ￣（－３）ＣＡ。将ＬＢ￣（－３）ＣＡ克隆到表达质粒ｐＢＶ２２０上，在大肠杆菌系统中热诱导表达，表达率为１２％。表达产物经蛋白质后加工，得到的去Ｂ链羧端三肽人胰岛素（ＤＴＥＩＢ２８～３０人胰岛素）其受体活性和放免活性分别是猪胰岛素的４５％和４９％。
- 黄春媚陈来同陈仁馨胡美浩
- 关键词：胰岛素基因表达
- 在大肠杆菌表达体系中以包涵体形式存在的真核生物蛋白质的分离、复性和二硫键的形成被引量：10
- 1997年
- 在大肠杆菌中表达的含有二硫键真核生物的重组蛋白，往往以包涵体的形式存在。存在于包涵体的重组蛋白，因分子内及分子间二硫键的错配，而常常导致重组蛋白无生物活性。着重介绍了一些从包涵体中分离有正确配对的二硫键重组蛋白新的技术条件，总结了含有二硫键真核生物重组蛋白的不同分离和复性步聚及方法，并对重组蛋白在体外折叠的机理进行了探讨．
- 陈来同茹炳根
- 关键词：重组蛋白包涵体复性大肠杆菌二硫键
- 教师在生物化学实验教学中的作用探讨被引量：6
- 2008年
- 在生物化学实验教学中教师必须转变观念，与时俱进，钻研业务，加强师德修养，树立为人师表的良好形象。通过传授实验技术为学生今后一生的发展奠定基础，使教师成为学生的良师益友。
- 陈来同胡晓倩
- 关键词：师德修养教育观念师生关系
