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陈火胜: 作品数：32 被引量：120H指数：7; 供职机构：中山医科大学更多>>; 发文基金：美国中华医学基金会项目卫生部科学研究基金国家重点实验室开放基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学自然科学总论农业科学更多>>

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PCR－RFLP技术在检测登革病毒中的应用被引量：9: 1996年; 从登革病毒感染的Ｃ６／３６蚊细胞培养液，感染的白纹伊蚊及患者血清中提取病毒ＲＮＡ，用合成的一对引物通过逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增，取产物用ＨａｅⅢ，琼脂糖凝胶电泳，紫外透射观察。结果，扩增的产物及酶切片段均与预期的靶序列长度和限制酶谱分析相一致。故应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ（聚合酶链反应－限制酶酶切片段长度多态性分析）技术是诊断登革病毒感染的一种简易快速的新方法。; 刘先洲陈火胜郭辉玉; 关键词：登革热病毒 RFLP 反转录聚合酶链反应

核酸新技术——聚合酶链式反应: 1989年; 核酸杂交技术作为传染病、遗传病等疾病的基因诊断方法,正在更加广泛地应用于临床和科研工作中。但由于其敏感度的局限性,在某些诊断和分析中的应用仍未开展,或结果不甚理想。限制核酸杂交技术敏感度的一个主要原因,就是待检标本中的目的序列的含量太低或标本总核酸量太低。近两年多来,在解决这一难题中。; 陈火胜; 关键词：聚合酶

用套式多聚酶链反应技术监测乙型肝炎病毒的母婴垂直传播被引量：3: 1996年; 用套式多聚酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）技术对１６９对ＨＢｓＡｇ及ＨＢｓＡｇ／ＨＢｅＡｇ阳性孕妇及其新生儿外周血清进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ检测。１０３对ＨＢｓＡｇ阳性孕妇及其新生儿外周血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为７２．８％和３３．０％；６６对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ双阳性的孕妇及其新生儿外周血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为８６．４％和４３．９％。对５５例ＨＢｓＡｇ及ＨＢｓＡｇ／ＨＢｅＡｇ阳性产妇产后的初乳进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，结果ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率为３６．４％。结果表明ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ双阳性的孕妇及其新生儿外周血清ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率较ＨＢｓＡｇ单阳性的孕妇及其新生儿要高，其初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ的检出率也高。还对１０５例注射了乙肝疫苗及高价乙肝特异性免疫球蛋白的６月龄婴儿的外周血清进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，结果有２３例阳性。; 黄晓军黄雅蓉郑惠童符玉良陈火胜; 关键词：乙型肝炎病毒母婴传播聚合酶链反应

Epstein-Barr病毒疫苗的研究进展: 1991年; EB病毒(Epstein-BarrVirus,EBV)与鼻咽癌(NPC)、伯基特氏淋巴瘤(BL)及免疫抑制后淋巴瘤等有密切关系。早在1976年,Epstein首先提出了用疫苗预防EBV相关的恶性肿瘤或减少其发病率的设想。其依据是用病毒疫苗控制动物肿瘤发生有成功先例,如用马立克氏病毒的减毒株接种鸡群,可控制鸡恶性淋巴瘤的发生;接种灭活的狼疱疹病毒(Herpesvirus Saimiri)可预防猴恶性淋巴瘤等。近几年来,在EBV抗原性分析的基础上,发现膜抗原有免疫保护作用。在研制膜抗原亚单位疫苗及基因工程疫苗中。; 陈火胜谷淑燕; 关键词：EB病毒疫苗

登革4型病毒包膜蛋白基因的克隆和部分核苷酸序列测定: 1995年; 利用反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术分离并克隆了登革４型０１株病毒的包膜蛋白（Ｅ）基因，并测定了部分核苷酸序列，发现该株与国外发表的一株相应区域核苷酸序列的同源性为９３．４％，由此推测出氨基酸序列的同源性为９２．１％。; 黄晓军黎孟枫陈火胜曾庆郭辉玉侯云德; 关键词：包膜蛋白克隆核苷酸序列登革病毒

PCR法在疱疹病毒性脑炎诊断及疗效观察中的应用: 1996年; 选择疱疹病毒科病毒ＤＮＡ多聚酶基因高保守区中的一对引物，一次ＰＣＲ可同时扩增疱疹病毒科的４种病毒［单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ１）、单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ２）、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）、及巨细胞病毒（ＣＭＶ）］相应的ＤＮＡ片段。根据扩增产物分子的大小及对扩增产物酶切分析，可将标本中的４种病毒准确分型。用该法检测临床疑为病毒脑炎患者和其他中枢神经系统疾病患者（对照组）的脑脊液（ＣＳＦ），脑炎组ＣＳＦ阳性率３０％（９／３０），对照组ＣＳＦ阳性率６．７％（２／３０）；其中８例为ＨＳＶ１阳性，２例为ＣＭＶ阳性，１例为ＨＳＶ２阳性。２例病毒脑炎患者经用无环鸟苷抗病毒治疗７～１０ｄ后其ＣＳＦ中的ＨＳＶ１ＤＮＡ由阳转阴。由此说明ＰＣＲ法不仅可早期诊断疱疹病毒性脑炎，还可显示抗病毒药物的疗效。; 卓礼梅潘文彤邢诒刚陈火胜; 关键词：脑膜炎病毒性脑膜炎 PCR 单纯疱疹病毒

病毒核酸和蛋白分析的原理: 1989年; 病毒是由核酸和蛋白质两种基本成份所构成的一类最简单的特殊生物。它们严格地寄生于细胞内,以基因复制的方式进行繁殖。因而又有“分子生物”或“寄生分子”之称。病毒学作为一门相对独立学科的历史还不到40年,进展却比较迅速。这与现代分子生物学方法的运用是分不开的。由于核酸和蛋白是病毒的主要功能成份,所以,在病毒学研究中,对核酸和蛋白的分析显得特别重要。病毒学的各个研究领域都涉及病毒核酸和蛋白的分析。; 陈火胜郭辉玉; 关键词：病毒核酸蛋白

黄病毒逆转录-聚合酶链反应检测技术的建立和应用被引量：29: 1997年; 为了早期快速诊断黄病毒感染，在其ＮＳ１基因序列设计了一对通用引物，扩增序列长度为４１３ｂｐ；在登革病毒（ＤＥＮ）１，２，３，４型和乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）设计了各型的内引物，扩增序列长度分别是ＤＥＮ１型为２６２ｂｐ，ＤＥＮ２型为１８９ｂｐ，ＤＥＮ３型为３９２ｂｐ，ＤＥＮ４型为９７ｂｐ，ＪＥＶ为３２３ｂｐ。应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）成功地扩增了ＤＥＮ１－４型和ＪＥＶ基因部分片段，其扩增片段的大小与设计相符合。应用套式ＰＣＲ检测临床诊断为登革热的患者血清标本７８份，证实ＤＥＮ１型阳性１８份，ＤＥＮ２型阳性４８份，其中８份同时合并感染ＤＥＮ４型。采用套式ＰＣＲ检测临床诊断为乙型脑炎患者血标本４２份，证实乙型脑炎病毒感染者３５份。结果表明，该法能直接检测发病患者早期血标本中的病毒基因，并在２天内完成对黄病毒的鉴别诊断。; 方美玉陈翠华陈火胜田小东蒋廉华饶颐年郭辉玉; 关键词：聚合酶链反应黄病毒登革热病毒学

逆转录—多聚酶链反应扩增黄病毒核酸的研究被引量：19: 1994年; 黄病毒基因组为单链，正股ＲＮＡ，全长约１１Ｋｂ。在其ＮＳ１基因序列设计了一对通用引物，ＤＪＳ（＋）和ＤＪＡ（一）均为１７个硷基，扩增序列长度为４１３ｂＰ．应用逆转录一一多聚酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）成功地扩增了登革病毒（ＤＥＮ）１，２，３，４型和乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）基因部分片段，其扩增片段的大小与设计相符。采用该引物检测国内分离株ＤＥＮ１／（ＧＺ）、ＤＥＮ２（ＨＮ９１）和ＪＥＶ（Ａ２）株同样出现一条明显的扩增带（约４１３ｂＰ），说明该引物也适合于我国分离株。应用通用引物扩增黄病毒中的ＰＯＷ和ＬＧＴ均出现一条特异带。甲病毒属的辛德毕斯和基孔肯稚病毒应用该引物扩增后无特异性条带；扩增Ｃ６／３６细胞也无特异带。表明该通用引物特异性良好，对于今后黄病毒感染的临床快速诊断和进一步的分子病毒学研究均有重要意义。; 方美玉陈火胜陈翠华汤伟其郭辉玉饶颐年; 关键词：聚合酶链反应黄病毒核酸

通用引物PCR分离登革病毒2型cDNA及其插入方向鉴定: 1992年; 逆转录后采用聚合酶链反应(RT/PCR)扩增登革病毒2型中国海南98株(DEN_2HN98)部分包膜糖蛋白(E)基因,PCR产物钝端插入pUC18质粒,获得重组质粒pDEⅡ305。用pUC/M13测序用通用引物,PCR方法又从pDEⅡ305扩增分离DEN_2 E cDNA片段。通过一侧通用引物和另一侧DEN_2 E特异引物配对,引导酶促DNA扩增反应,鉴定了pDEⅡ305中cDNA片段的插入方向,结果与序列分析一致。本文首次报道通用引物PCR方法的建立,实验结果表明该技术可用于pUC/M13系统中插入片段的分离及其方向鉴定。; 陈火胜郭辉玉刘长秀汤伟琪石松邱重任黄晓军庄坚; 关键词：登革热病毒聚合酶链反应

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