陈琦
- 作品数：108 被引量：440H指数：11
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- 生地对大鼠肺间质成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的作用被引量：22
- 2008年
- 目的:研究生地对原代分离的大鼠肺间质成纤维细胞(fibrob last,Fb)Ⅰ、Ⅲ型胶原(ColⅠ、ColⅢ)表达的影响。方法:生地经提取分离后得到不同部位的提取物。大鼠肺间质成纤维细胞经原代分离传代后,加入不同浓度的生地提取物及生地注射液作用72 h,采用RT-PCR的方法测定其中Ⅰ、Ⅲ型胶原的量。结果:水提醇沉上清液中以低聚糖为主的部分除个别浓度外,其余浓度对ColⅠ表达均有抑制作用,高浓度对ColⅢ表达有一定的抑制作用;醇沉沉淀部分2×10-2g/mL的浓度对ColⅠ表达抑制作用明显,各浓度对ColⅢ表达均有抑制作用;生地注射液各浓度均对ColⅠ的表达均有抑制作用,低浓度(5×10-3g/mL)对ColⅠ、ColⅢ表达均有明显抑制作用。结论:生地中某些成分能够抑制大鼠肺间质成纤维细胞ColⅠ、ColⅢ的表达,是生地对肺纤维化起治疗作用的机制之一。
- 刘力唐岚徐德生陈琦
- 关键词：纤维化
- 脓毒症大鼠肺组织c-FLIP的变化及乌司他丁对c-FLIP的影响被引量：5
- 2010年
- 目的观察脓毒症大鼠的肺组织中c-FuP的变化情况，并探讨乌司他丁对c-FLIP水平的影响。方法将30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机（随机数字法）分为假手术组（Sham组）、脓毒症模型组（CLP组）及乌司他丁治疗组（UTI组），每组10只。Sham组不结扎穿刺盲肠，余同CLP组；CLP组采用盲肠结扎并穿刺法造模；UTI组造模后立即经阴茎静脉注射乌司他丁注射液（50000U／kg）。12h后处死大鼠并采取肺组织，光镜下观察形态学变化；Western-Blot法检测c-FLIP蛋白表达，RT-PCR法检测c-FLIP基因表达。应用SPSS11．5进行统计学分析，多组比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。结果脓毒症组光镜下肺泡腔内中性粒细胞和大量红细胞渗出，c-FLIP蛋白和基因表达较假手术组显著降低（P〈0．05）；用乌司他丁治疗后，光镜下病理改变减轻，c-FLIP蛋白和基因表达较脓毒症组显著升高（P〈0．05）。结论脓毒症中c-FLIP在肺组织中的表达下降，提示肺组织的细胞凋亡增加。乌司他丁能上调脓毒症大鼠肺组织中c-FLIP的表达。
- 沈蕾孙正达陈琦曹同瓦祝禾辰
- 关键词：脓毒症动物模型C-FLIP乌司他丁RT-PCR
- 瞬时转染SARS-CoVM基因对大鼠肺成纤维细胞生长特性及生物学功能的影响
- 2005年
- 目的通过观察转染SARS-CoV M基因的大鼠肺间质成纤维细胞(fibrob last,FB)生长及功能的改变,初步探讨SARS病毒通过肺组织损伤而引发肺纤维化的可能机制和途径。方法碱裂解法扩增纯化质粒,酶消化法分离大鼠肺间质成纤维细胞;采用脂质体介导的方法瞬时转染M基因入FB;采用RT-PCR法和W estern b lot鉴定转染结果;四唑盐(MTT)比色法和流式细胞技术(FCM)检测转染后的大鼠肺成纤维细胞的生长情况;采用半定量RT-PCR和Realtim e PCR检测转染后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)基因转录水平的变化。结果与转染空载体的成纤维细胞相比,转染M基因的成纤维细胞在转染48 h时生长明显增强,G0/G1期比例下降,S期比例增高;转染M基因后MMP-2的转录明显增强。结论成功地将携带有M基因的真核表达质粒瞬时转染入大鼠肺间质成纤维细胞,目的基因在肺间质成纤维细胞中表达并具有与SARS-CoV M相似的抗原性;SARS-CoV M蛋白可能促进肺间质成纤维细胞生长;并促进MMP-2的表达。
- 刘乾陈琦蒋涛王震闫明霞许祖德
- 关键词：瞬时转染基质金属蛋白酶-2肺纤维化
- 饰胶蛋白聚糖对大鼠肾系膜细胞生长的抑制作用及其信号转导途径的研究被引量：4
- 2005年
- 目的探讨饰胶蛋白聚糖(DCN)对大鼠系膜细胞(MsC)生长的抑制作用及其信号转导分子MAPKs和p21表达的影响。方法经脂质体介导将DCN基因转染体外培养的大鼠MsC,筛选和鉴定后,收集阳性细胞克隆的培养上清(DCN上清),将其加入正常MsC的培养液中,采用流式细胞仪检测细胞周期。用Western印迹法分别检测MAPKs,包括细胞外调节激酶(ERK)1/2、应激活化蛋白激酶(SAPK),氨基末端激酶(JNK)和p38和p21蛋白表达;用免疫荧光法观察p21在细胞中的表达。结果DCN上清明显抑制正常MsC的增殖,G2-M期细胞数明显减少,仅为对照组的35%(P<0.05);磷酸化ERK1/2及SAPK/JNK表达增强,分别为对照组的2.2倍、1.4倍及1.7倍、1.8倍;磷酸化p38无明显变化。DCN抗体呈浓度依赖性抑制磷酸化ERK1/2、SAPK/JNK的表达上调。DCN上清还可使细胞p21的表达明显增强,而DCN抗体也同样呈浓度依赖性地抑制其上调表达的作用,ERK1/2及SAPK/JNK通路抑制剂U0126和circumin均可抑制其上调表达的作用,分别为对照组的64%和61%;而p38通路抑制剂SB203580则对其无影响。结论DCN对肾MsC的生长有抑制作用,其机制可能经ERK1/2、SAPK/JNK和p21蛋白介导。
- 冯秀艳张志刚赵仲华陈琦郭慕依
- 关键词：蛋白聚糖类信号转导丝裂素激活蛋白激酶系膜细胞饰胶蛋白聚糖信号转导途径
- 乳腺导管内增生性病变的克隆性分析
- 2008年
- 目的检测乳腺导管内增生性病变的克隆性起源。方法采用激光捕获显微切割技术精确分离增生组织和周围正常组织中的导管上皮细胞，抽提其基因组DNA。以限制性内切酶HpaⅡ消化前后的基因组DNA为模板，荧光PCR法扩增人雄激素受体（HUMARA）外显子1，在DNA测序仪上毛细管电泳，并分析HUMARA两个位点的荧光强度。结果101例组织标本中，有68例PCR扩增HUMARA外显子1成功，并且该位点为杂合性，其中9例普通导管内增生（UDH）和5例导管上皮内肿瘤（DIN）1A在HpaⅡ消化前后的PCR产物均有2条，且荧光强度相近，即它们的X染色体失活是随机的，呈多克隆性。3例UDH、13例DIN1A、28例DIN1B和10例原位癌在HpaⅡ消化前后扩增出1条或2条强度差别较大的条带，提示它们为单克隆起源。结论DIN1A、1B和原位癌为单克隆起源，属于肿瘤性增生。
- 李华陈琦朱荣顾栋桦朱虹光
- 关键词：导管内增生性病变克隆性
- 喉结核61例报告被引量：16
- 2008年
- 目的探讨喉结核的发病趋势和临床变化。方法回顾性分析复旦大学附属眼耳鼻喉科医院1993年1月至2006年4月间61例喉结核的临床资料。结果患者年龄17~88岁,平均(51.13±17.05)岁;病程8d^2年。声嘶为其主要症状(81.97%),全身症状不明显。声带为其主要病变部位,病变类型以增生型为主。34例喉部多部位病灶中55.9%(19/34)并发活动性肺结核,27例喉部单一病灶中62.96%(17/27)肺部正常。54例经病理活检确诊,余7例未行活检,但胸片均提示有急性粟粒性肺结核。初诊误诊率为65.57%(40/61)。全部患者确诊后均转至结核病院进行治疗。失访5例,其余56例均治愈。结论当今喉结核的局部病变形态不典型,全身症状不明显;原发性喉结核发病率有增多趋势,发病年龄有增高的趋势。对喉结核的诊断除详细了解病史及症状外,活组织病理检查是该病确诊的重要手段。
- 陈琦周蔚王薇
- 关键词：结核活组织检查
- 人端粒酶逆转录酶在喉鳞状细胞癌中表达与c-myc的相关性
- 2006年
- 目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA在喉鳞状细胞癌中和病理分级、临床参数的关系以及和c-myc的相关性。方法用原位杂交法检测40例喉鳞状细胞癌中hTERT mRNA的表达,用免疫组织化学法检测c-myc蛋白。结果喉正常组织、不典型增生、鳞癌组织中hTERT mRNA的阳性率分别为0%(0/10)、10%(1/10)、80%(32/40),喉鳞癌中hTERT mRNA的阳性率明显高于正常组织(P<0.05)和不典型增生(P<0.05),hTERT mRNA水平与c-myc的表达呈显著相关(r=0.5422,P<0.01)。喉鳞癌中hTERT mRNA表达水平与病理分级不相关(P>0.05),与年龄、性别、TNM分期和淋巴结转移情况不相关(P>0.05)。结论喉鳞癌中hTERT mRNA的阳性率明显高于正常组织和不典型增生,有助于喉部良恶性病变的鉴别,c-myc的过度表达可能是喉鳞癌端粒酶活性升高的一个重要机制。
- 顾栋桦王纾宜唐峰朱腾芳郑莉陈琦朱虹光
- 关键词：喉肿瘤人端粒酶逆转录酶
- 稳定表达饰胶蛋白聚糖基因的大鼠肾小球系膜细胞株的建立被引量：8
- 2001年
- 目的 研究将饰胶蛋白聚糖 (decorin ,DCN)基因转染大鼠肾小球系膜细胞的可行性。方法 RT PCR法扩增大鼠DCN基因 ,构建重组真核表达质粒 pcDNA3.1A DCN ,采用脂质体将其转入大鼠MsC ,经G418筛选阳性克隆 ,Westernblot及RT PCR法鉴定。结果 成功构建重组真核表达质粒 pcDNA3 .1A DCN ,转染MsC并筛选出 2个阳性克隆株。结论 构建载有DCN基因的MsC载体 。
- 王慧君张志刚陈广平林文生陈琦郭慕依
- 关键词：肾小球系膜细胞饰胶蛋白聚糖基因转染DCN
- 醛糖还原酶参与大鼠MsC表达iNOS和NO及其调控机制的研究被引量：3
- 2008年
- 目的采用醛糖还原酶抑制剂(aldose reductase inhibitor,ARI)抑制醛糖还原酶(aldose reductase,AR)活性,观察其对大鼠系膜细胞(mesangical cells,MsC)在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNFα)作用后表达诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthesis,i NOS)的影响,并对这一现象进行初步的机制探讨。方法实验分为对照组、Sorbinil作用组、Zopolrestat作用组。分别采用NO测试盒检测亚硝酸盐含量;免疫荧光、Western blot检测i NOS表达;Real-ti me PCR检测iNOS mRNA,对比正常生长MsC及ARI(Sorbinil和Zolpor-estat)预处理的MsC在TNFα作用不同时间后上述指标的变化。分别采用非放射性标记的分光光度检测法检测转录因子NFκB p65亚基试剂盒(colori metric nonradioactive NFκB p65 transcription factor assay kit)以及Western blot的方法对以上各组细胞进行转录因子NFκB活性检测,及其上游通路IκB信号通路活化情况检测。结果与正常MsC相比,TNFα可上调培养大鼠MsC中i NOS mRNA和蛋白的表达,以及NO合成水平,但此作用可以被两种ARI不同程度地抑制;抑制TNFα导致的NFκB的活化及IκBα信号通路的磷酸化,并具有一定的时间相关性。结论AR参与调控TNFα诱导i NOS表达上调的过程,且此调控可能是通过影响转录因子NFκB的活性以及上游信号通路的活化而实现的。
- 瞿俊杰蒋涛林伊凤李慧陈琦张农
- 关键词：醛糖还原酶肿瘤坏死因子Α诱导型一氧化氮合酶NFΚB
- Caveolin-1过表达诱导喉鳞癌HEp2细胞凋亡
- 2010年
- 目的探讨caveolin-1对喉鳞状细胞癌细胞系HEp2凋亡的影响。方法通过脂质体法把caveolin-1基因导入喉鳞癌细胞系HEp2细胞,筛选出稳定高表达caveolin-1的克隆,用荧光实时定量反转录-聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)和免疫印迹法鉴定;流式细胞仪检测细胞周期与凋亡;Real-time RT-PCR检测survivin的mRNA水平;免疫印迹法检测细胞BCL-2和survivin蛋白的表达;用分光光度法方法检测caspase-3相对活性。结果成功筛选到稳定高表达caveolin-1的克隆,命名为HEp2-CAV1;与对照组相比,更多的HEp2-CAV1细胞处于G0/G1期,凋亡率增加,caspase-3相对活性水平上升2.72倍(P<0.05),survivinmRNA的表达水平减少74%(P<0.01),survivin与BCL-2蛋白表达水平明显减少。结论Caveolin-1能够促进喉鳞状细胞癌细胞株HEp2的凋亡,BCL-2和survivin的表达下调可能是其促凋亡的重要机制之一。
- 顾栋桦平金良陈琦朱荣
- 关键词：喉肿瘤凋亡
