陈雪丹
- 作品数：13 被引量：30H指数：2
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海外青年学者合作研究基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 食管鳞癌中miR-203的表达及其调控机制探讨
- 第一部分miR- 203在食管鳞癌中的表达检测及功能探讨
研究背景
食管癌是发生在食管粘膜上皮组织的肿瘤,是一类严重影响人类健康的高致死性肿瘤。其组织学类型主要包括腺癌、鳞状上皮癌和未分化癌,其中鳞状上皮...
- 陈雪丹
- 关键词：食管鳞癌TCF4
- 文献传递
- 分子遗传学研究生课程改革初探
- 2010年
- 分子遗传学是21世纪生命科学前沿学科，也是经典遗传学的发展前沿。研究生的教学应以培养学生创新意识，提高其综合科研素质作为目的。本文以此为宗旨，从教学内容、方法、考核手段等方面着手，对新时期研究生分子遗传学的改革进行探讨。
- 许雪青白云陈雪丹王燕
- 关键词：分子遗传学课程改革教学内容生命科学
- 原代培养的小鼠星形胶质细胞CD46、CD55、CD59的表达及炎症刺激因子对其的影响被引量：2
- 2006年
- 目的通过体外培养小鼠大脑皮层星形胶质细胞,明确补体调节蛋白CD46、CD55、CD59在原代小鼠大脑皮层星形胶质细胞上的表达情况,及炎症因子对CD46、CD55、CD59表达的影响,为研究补体系统在AD中的作用打下基础。方法原代纯化培养小鼠星形胶质细胞,用RT PCR,免疫荧光的方法,分别在mRNA水平、蛋白质水平,检测炎症因子刺激前以及LPS、IFNγ单独或协同刺激后,CD46、CD55、CD59的表达情况。结果RT PCR检测到CD59mRNA的表达,CD46、CD55的表达不明确,未刺激组和刺激组无明显差别;免疫荧光结果示CD59阳性,CD46、CD55弱阳性。结论保护素CD59在原代小鼠星形胶质细胞上显著表达,可能可以保护星形胶质细胞免受补体的溶破效应的杀伤。
- 陈雪丹白云熊加祥宋敏
- 关键词：原代培养小鼠星形胶质细胞CD46CD55CD59
- 基质金属蛋白酶8在食管鳞癌中的表达及其临床意义被引量：1
- 2011年
- 目的探讨食管鳞状细胞癌中基质金属蛋白酶-8(matrix metalloproteinase 8,MMP-8)的表达及其与肿瘤浸润、转移的关系。方法实时荧光定量PCR方法检测67例食管鳞癌组织和27例远癌组织中MMP-8 mRNA的表达;Western blot法检测其中15例食管鳞癌组织及其配对的15例远癌组织中MMP-8蛋白的表达,统计分析MMP-8表达水平与食管鳞癌的临床分期以及浸润转移的关系。结果①MMP-8在食管鳞癌组织和远癌组织中均有不同程度的表达,在癌组织的表达水平显著低于远癌组织(mRNA表达水平P=0.003,蛋白表达水平P=0.031)。②T1、T2、T3、T4期食管鳞癌组织中MMP-8 mRNA表达存在显著差异(P=0.002),MMP-8表达随着肿瘤浸润程度的加深而升高;MMP-8蛋白表达量在T1～T4期中也呈增加的趋势。③MMP-8 mRNA和蛋白表达水平在食管鳞癌的不同淋巴结转移组之间没有显著差异。结论 MMP-8在食管鳞癌组织中低表达,但又随肿瘤浸润加深而表达升高,可能反映了MMP-8在食管鳞癌发生和浸润中的不同作用。
- 王冬梅郭洪陈雪丹官兴颖刘丹白云
- 关键词：食管鳞状细胞癌基质金属蛋白酶8
- ICOS通过survivin维持T细胞分裂及存活
- 2007年
- 有关T细胞共刺激分子信号转导方面的研究远落后于其功能研究,为探讨T细胞活化后诱导表达的共刺激分子ICOS(induciblecostimulate)维持T细胞存活、抑制活化后T细胞凋亡的作用是否与survivin相关,利用survivin重组腺病毒感染活化但不提供共刺激信号的T淋巴细胞,或者在活化后提供ICOS信号的条件下人工给予优势抑制survivin突变基因,CCK-8及TUNEL法分别检测活化晚期上述T细胞存活及凋亡情况.结果显示,T细胞活化后2～6天,ICOS抗体刺激可以明显增强survivin表达,survivin可维持无ICOS信号的T细胞存活减少其凋亡,突变型survivin在ICOS信号存在下抑制T细胞存活使其凋亡增加.结果提示,活化后表达的共刺激分子ICOS通过survivin维持T细胞分裂和存活.
- 杨晓亚白云王艳艳许雪青陈雪丹
- 关键词：ICOSSURVIVINT淋巴细胞
- B7-H1慢病毒的制备及其在B16F10细胞中的表达鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的构建小鼠B7-H1分子慢病毒表达载体并包装成感染性病毒颗粒,获得稳定表达B7-H1的B16F10细胞。方法以小鼠B7-H1的测序质粒为模板,PCR扩增B7-H1全长,装入pLenti6/V5-D-TOPO慢病毒表达载体,经过测序证实其序列与标准序列完全一致。将B7-H1表达载体用L ipofectam ineTM2000转染293FT细胞,包装成感染性病毒颗粒,感染B16F10细胞后,加入含B lastic id in(终浓度为4.0μg/m l)的RPM I1640培养基,筛选出稳定表达B7-H1蛋白的B16F10细胞株。结果PCR扩增得到编码小鼠B7-H1的877 bp基因片段,与预期大小一致。B7-H1重组慢病毒感染B16F10细胞后,用B7-H1单抗进行免疫组化检测,荧光显微镜观察显示B7-H1分子表达于B16F10细胞。FACS测定B16F10细胞荧光阳性率为36%。结论成功构建了B7-H1慢病毒表达载体,包装出感染性病毒颗粒,重组慢病毒感染B16F10细胞后表达出有活性的B7-H1膜表面蛋白,为进一步研究B7-H1分子在器官移植、自身免疫性疾病以及肿瘤免疫逃逸机制中的作用奠定了基础。
- 张立群段文元许雪青黄钢陈雪丹白云
- 关键词：B7-H1慢病毒基因治疗
- miR-203受到CEBPB及TCF4调控并通过靶向抑制survivin、AKT2、NP63表达来促进细胞分化
- 已有研究发现miR-203在细胞分化过程中发挥促进分化的作用,可能是通过靶向抑制deltaNP63来抑制干性(stemness)来实现。本研究对96例临床食管鳞癌标本进行研究发现,miR-203在高分化组中表达显著高于低...
- 陈雪丹李俊霞张坤王凯许雪青白云
- 关键词：分化
- 文献传递
- 降钙素基因相关肽对人脐带间充质干细胞成骨分化的影响
- 2018年
- 目的探讨降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)在人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymalstem cells,HUMSCs)向成骨细胞分化过程中的作用及机制。方法体外培养HUMSCs细胞,加入0、10-9、10-8、10-7mol/L浓度的CGRP诱导其向成骨细胞分化,分别在第7、9、11、14天时采用茜素红染色检测成骨分化程度,实时定量PCR和Western blot检测ERK、RUNX2、OSTERIX的mRNA和磷酸化的ERK、RUNX2、OSTERIX的蛋白表达。结果 HUMSCs高表达CD73、CD90、CD105等间充质干细胞表面抗原,但不表达CD14、CD20、CD34、CD45等上皮和造血干细胞的表面抗原,可诱导向成骨细胞分化,随着时间延长矿化结节数量增加(P<0.05);随着CGRP浓度的升高,矿化结节减少,ERK、RUNX2、OSTERIX的mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。结论 CGRP通过ERK信号通路抑制HUMSCs向成骨细胞的分化,并呈现出浓度和时间依赖性。
- 高振吴琴郭俊峰李铀陈雪丹高强国张纲
- 关键词：降钙素基因相关肽人脐带间充质干细胞成骨细胞细胞分化
- 基于miR30的靶向DcR_3慢病毒干扰载体的构建及鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的构建基于miR30的靶向DcR3慢病毒干扰载体。方法人工设计针对DcR3编码区的干扰序列,使其转录后RNA结构类似于miR30结构,茎杆序列替换成DcR3序列,送上海生物工程技术服务有限公司合成。以该序列为模板,分别利用携带EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物行PCR扩增,通过酶切连接的方式将插入片段连入p201慢病毒载体骨架中。经酶切和测序鉴定后,用包装质粒pMD2G及包膜质粒psAX2共同转染293FT细胞进行病毒包装。病毒包装上清液加入培养的人食管鳞癌细胞系KYSE150细胞中,用FACS分选后进行RT-PCR和Western blot检测DcR3表达情况。结果构建了针对DcR3的3条慢病毒干扰载体,成功包装出病毒,并不同程度地抑制了DcR3蛋白的表达。结论基于miR-30的DcR3能有效抑制DcR3表达,为进一步研究DcR3功能打下了基础。
- 熊刚许雪青陈雪丹郭洪李娟王凯蒋耀光
- 关键词：DCR3RNA干扰慢病毒
- 鼠ICOSIg融合蛋白腺病毒的制备及其对胰岛细胞系NIT-1的感染被引量：1
- 2006年
- 目的制备mICOSIg腺病毒,研究其对胰岛细胞系NIT-1的感染情况,及可否使后者正确表达分泌mICOSIg。方法从pMIG-ICOSIg质粒上切下ICOSIg融合蛋白的表达框,插入pAdtrack-CMV中构建腺病毒穿梭质粒pAdmICOSIg,在Adeasy-1大肠杆菌中进行同源重组,随后转染293细胞进行病毒颗粒包装。收集病毒后感染NIT-1细胞,用免疫印迹证实mICOSIg在NIT-1细胞中的正确分泌表达。结果ICOSIg编码框被正确构建到pAdtrack-CMV中,并经测序证实无误。目的病毒成功包装出来,并能有效感染胰岛细胞系NIT-1,免疫印迹证实培养上清中存在正确大小的mICOSIg融合蛋白。结论成功制备了mICOSIg腺病毒,该病毒能有效将mICOSIg转入胰岛细胞系NIT-1,并能准确分泌mICOSIg蛋白。为研究1型糖尿病中ICOS信号通路在T细胞破坏胰岛细胞中的作用提供了有效的研究手段。
- 许雪青王丰陈雪丹熊加祥段文元白云
- 关键词：ICOS腺病毒胰岛细胞
