马小慧
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 供职机构:清华大学更多>>
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- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 小鼠visfatin抗体的制备及应用
- 2009年
- 目的:制备高效价抗visfatin抗体,探测visfatin在前脂肪细胞成脂分化过程中在空间上表达情况。方法:克隆鼠内脂素visfatin基因的蛋白编码区全长序列,构建其原核表达载体pET28a-visfatin,然后在E.coli(BL21)中诱导大量以包涵体形式表达,提取包涵体并用Ni-NTA亲和层析柱纯化蛋白,并以此为抗原免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。以纯化后的抗血清为一抗,Western blot检测小鼠肝、肌肉等组织中visfatin的分布。结果:SDS-PAGE及Western blot显示原核表达载体pET28a-visfatin在大肠杆菌中诱导表达,融合蛋白能够被抗hismAb识别。免疫新西兰大白兔获得抗体效价在1∶25600以上。结论:用制备得到的抗体对小鼠心、肝、肺、脾、脂肪、肌肉组织样品做Western blot鉴定,结果表明visfatin在各组织中均有表达,其中脾和脂肪组织中表达量高于其他组织。
- 马小慧蔡国平
- 关键词:原核表达抗血清制备
- 鼠源内脂素的表达及其对前脂肪细胞系3T3-L1的作用研究
- 内脂素(Visfatin)是一种由腹部脂肪组织分泌的相对分子质量为52,000的脂肪因子,其反向转录序列与前B细胞克隆增强因子一致。对内脂素的研究发现它与细胞增殖分化、炎症反应有关。此外,新的研究表明内脂素具有类胰岛素功...
- 马小慧
- 关键词:成脂分化
- 文献传递