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基于SYBR Green I的双链DNA定量方法被引量：21: 2008年; 基于SYBR Green Ⅰ荧光染料与双链DNA（dsDNA）结合产生荧光的原理,建立一种高精度、高通量的双链DNA定量方法。将梯度稀释后的基因组DNA及已知浓度的λDNA与等体积的SYBR Green Ⅰ（4×）充分混合后,利用荧光定量PCR仪采集荧光信号,以ROX（1×）作为校正染料进行定量分析;同时利用紫外分光光度计对样品进行平行测定,比较该方法与紫外分光光度法的检测限与准确度。紫外分光光度法的检测限为2ng/μl,而SYBR Green Ⅰ荧光定量法的检测限可达到0.015ng/μl,并且在0.015-2ng/μl范围内,SYBR Green Ⅰ荧光强度与λDNA浓度呈线性关系（R2=0.9999）,比紫外分光光度法灵敏100倍以上,并可准确定量低纯度的DNA样品。此方法具有重复性好、高通量的特点,仅需少量的生物样本即可满足定量要求,为分子生物学研究及临床检验等多个领域提供了一种可靠的dsDNA定量方法。; 刘歆徐根明郭江峰丁先锋高晓莲; 关键词：SYBR 双链DNA 基因组DNA

DNA阵列芯片上的DNA二聚体并行热力学研究及其在SNP基因分析中的应用: 本文根据DNA二聚体的热力学性质,在DNA阵列芯片上测定其解链曲线,用数学的方法获得它的Tm(解链温度值),根据Tm值的不同来进行SNP分析。结果表明，用特殊设计的寡聚DNA阵列芯片进行并行热力学研究,可测得其DNA二聚...; 李征高晓莲; 关键词：基因芯片基因检测基因分析; 文献传递

一种利用原位合成微流体芯片的检测方法: 本发明公开了一种利用原位合成微流体芯片的检测方法，包括以下步骤：1)利用现有模式植物上公开报道的非编码小RNA的序列，优选miRNA的序列信息，依据其正义链或其负义链序列设计互补的寡核苷酸杂交探针；2)用原位合成方法制备...; 陈集双尹雪鸿竺锡武朗秋蕾高晓莲杨文征杜志游; 文献传递

SHP-2蛋白NSH2结构域的原核表达和同位素标记: 2010年; SHP-2蛋白是一种含有两个SH2结构域的磷酸酶。SHP-2的N端SH2结构域是细胞因子或病毒因子激活该蛋白的分子内靶点。对shp2基因进行信息学分析,设计引物通过PCR克隆出人SHP-2蛋白N端SH2结构域(NSH2)的DNA序列。重组到原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功高效率表达了可溶性NSH2蛋白。对蛋白进行15N同位素标记和纯化,并浓缩获得达到进行核磁滴定法结构研究的蛋白样品。; 牛皋郭江峰高晓莲张耀洲; 关键词：SHP-2 SH2结构域同位素标记 HSQC

SH2域S、HP2 cDNA的克隆鉴定和在大肠杆菌中的表达及其与CagA的相互作用: 2005年; 目的研究SH2(Src同源体2)域和SHP2(含2个SH2域的蛋白酪氨酸磷酸酶)蛋白的基因克隆和表达。方法根据GeneBank中SH2和SHP2的基因序列设计引物,以PCR法扩增出SH2和SHP2基因,将其插入pQE30质粒中,转化进E.coli感受态细胞中,筛选阳性克隆并研究其表达。结果所克隆的目的基因片断经PCR法鉴定和序列分析证明正确。结论已成功地扩增SH2和SHP2基因并克隆到pQE30载体上,转化大肠杆菌菌株有表达,并探讨其与CagA(细胞毒性关联的基因A抗原)的相互作用及导致胃细胞癌变的原因。; 李征盛妮晶高晓莲; 关键词：SH2 克隆 CAGA 相互作用

DNA阵列芯片上的DNA二聚体并行热力学研究及其在SNP基因分析中的应用: 2005年; 目的用DNA阵列芯片进行SNP的探测。方法根据DNA二聚体的热力学性质,在DNA阵列芯片上测定其解链曲线,用数学的方法获得其解链温度(Tm)值,再根据Tm值进行SNP分析。结果用特殊设计的寡聚DNA阵列芯片进行并行热力学研究,测得其DNA二聚体的解链曲线,计算出Tm值,并进行了SNP分析。结论可用DNA阵列芯片成功地进行高通量的SNP基因分析。; 李征朱兵高晓莲; 关键词：DNA SNP分析热力学研究

SH2域和SHP2 cDNA的克隆、鉴定及其在大肠杆菌中的表达研究: 研究SH2域和SHP2蛋白的基因克隆和表达.根据GenBank中SH2和SHP2的基因序列设计引物,以PCR法扩增出SH2和SHP2基因,将其插入pQE30质粒中,转化进E.coli感受态细胞中,筛选阳性克隆并研究其表达...; 李征盛妮晶高晓莲; 关键词：SH2 大肠杆菌基因克隆; 文献传递

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高晓莲