鲁毅
- 作品数：12 被引量：11H指数：2
- 供职机构：河南科技学院更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省科技成果转化计划项目河南省教育厅科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- FOXL2基因的研究进展被引量：2
- 2015年
- FOXL2基因（wingedhelixforkheadtranscriptionfactorgene2，FOXL2）是近年来发现的一种转录因子，属于翼状螺旋／叉头转录因子超家族成员，其在眼睑、胚胎及成体卵巢颗粒细胞中呈现特异性表达，与性别决定、卵巢早衰、不孕不育、肿瘤及小眼睑裂综合征等相关。翼状螺旋／叉头转录因子家族是一种转录调节核蛋白，内含一个特定的forkheadDNA结合域，
- 刘静韩丽李任峰鲁毅徐萍陈玲丽勾肖晶闫艺婷杨猛王三虎
- 关键词：卵巢颗粒细胞DNA结合域特异性表达性别决定转录调节超家族
- FOXL2与脊椎动物性别决定研究进展被引量：2
- 2012年
- FOXL2是最早影响脊椎动物卵巢分化的转录因子,其与芳香化酶及SOX9基因相互作用,在脊椎动物的性别决定方面有很大影响。为此,阐述了FOXL2的结构及其生物学功能,并着重介绍了FOXL2与脊椎动物性别决定关系的最新研究进展。
- 鲁毅李任峰徐萍李学斌刘卫王三虎
- 关键词：脊椎动物芳香化酶SOX9基因性别决定
- 来航鸡FOXL2基因的克隆与原核表达被引量：3
- 2013年
- 根据GenBank已发表的红色原鸡FOXL2基因序列(登录号NM_001012612.1)设计引物,以来航鸡全血为模板,PCR扩增出其基因全长编码区,经BamHⅠ-HindⅢ双酶切后定向克隆于pET28a原核表达载体,获得pET28a-FOXL2重组原核表达载体。将携带有重组原核表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过0.5mmol/L IPTG进行诱导表达,经过SDS-PAGE电泳检测,显示诱导表达蛋白大小大约为37 000,与预期表达蛋白大小一致。Western blot-ting检测显示该蛋白为His融合蛋白,表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出了目的融合蛋白。为进一步探索该基因的生物学功能奠定了基础。
- 徐萍李任峰赵坤鲁毅王三虎
- 关键词：来航鸡克隆原核表达
- 来航鸡FOXL2蛋白单克隆抗体的制备
- 2013年
- 目的:制备来航鸡FOXL2蛋白的单克隆抗体。方法:利用生物信息学的方法分别预测来航鸡FOXL2蛋白最有可能的线性表位,并人工合成多肽,高效液相色谱分析其纯度,与KLH偶联后免疫小鼠制备其单克隆抗体,用间接ELISA方法和免疫印迹进行筛选,然后对筛选出来的细胞株进行一般性质测定、亲和常数测定、IC50测定。结果:合成多肽纯度>95%,细胞融合后,其平均融合率为75%,并用间接ELISA方法和Western blot筛选出1条可与FOXL2蛋白发生明显反应的细胞株C2;经测定,C2细胞株上清效价为1/128,腹水效价为1/256,其亚型属于IgG1,杂交瘤细胞染色体为102条,腹水单抗的蛋白含量为1.576 g/L,其亲和常数为2.12×106L/mol,IC50值为0.082 47μg/L。结论:成功制备了FOXL2蛋白单克隆抗体,为下一步深入研究FOXL2蛋白奠定基础。
- 鲁毅徐萍李任峰李超英李学斌王三虎陈明艳刘卫邓佳霖
- 关键词：来航鸡FOXL2单克隆抗体表位
- 来航鸡FOXL2基因的真核表达及纯化
- 2016年
- 【目的】对来航鸡FOXL2基因进行真核表达及纯化,为其生物学功能研究奠定基础。【方法】根据GenBank已发表的来航鸡FOXL2基因序列(GenBank登录号:JF_708868.1)设计引物,以来航鸡全血DNA为模板,PCR扩增FOXL2基因,经EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切后定向克隆于pPICZαA中,获得pPICZαA-FOXL2真核表达载体。将pPICZαA-FOXL2转化毕赤酵母菌GS115,用甲醇进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting检测。【结果】克隆了918bp的FOXL2基因;成功构建了pPICZαA-FOXL2真核表达载体;实现了FOXL2基因在毕赤酵母菌GS115中的融合表达,获得了分子质量约为37ku的重组蛋白FOXL2,经Western blotting检测其具有较好的生物学活性。【结论】成功地在毕赤酵母中表达了来航鸡FOXL2基因。
- 刘静韩丽李任峰徐萍鲁毅杨猛王三虎
- 关键词：来航鸡真核表达
- 一种猪流行性腹泻病毒快速早期诊断试纸
- 本实用新型公开了一种猪流行性腹泻病毒快速早期诊断试纸，它包括支撑层，保护膜，在支撑层上方依次设有样品垫、结合垫、硝酸纤维素层和吸水垫；采用经过Ni‑NTA亲和层析和凝胶过滤层析纯化后的重组N蛋白标记胶体金作为检测探针设于...
- 李任峰田香勤荆焕芳李晓晗韩俊伟鲁毅王自良马金友
- 文献传递
- 猪瘟病毒NS2-3抗原集中区基因的原核表达及鉴定
- 2013年
- 为获得猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)NS2-3抗原集中区蛋白,并建立CSFV抗体快速检测方法。本研究以CSFV全长基因组质粒为模板,PCR扩增NS2-3抗原表位集中区,利用扩增片段和克隆载体,构建重组表达质粒,命名为pET32a-NS2-3-1。重组表达质粒转化Rosetta(DE3)细胞,利用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western-blot鉴定重组表达产物。结果表明,重组质粒pET32a-NS2-3-1在28℃诱导5h得到高效表达,重组蛋白能够与兔抗CSFV阳性血清发生反应。获得CSFVNS2-3抗原集中区蛋白,并且获得的重组蛋白具有抗原性,能够作为CSFV抗体检测的抗原。
- 刘卫朱艳平宁红梅银梅郭东光鲁毅王选年
- 关键词：猪瘟病毒抗原表位原核表达免疫印迹
- RNAi的抗病毒机制及应用被引量：2
- 2011年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)能够在转录水平、翻译水平和转录后水平上抑制病毒的复制,这为临床治疗病毒性疾病奠定了理论基础。近年来,RNAi技术发展迅速,使得RNAi技术应用于病毒性疾病的治疗成为可能。本文从RNAi抗病毒的作用机制及RNAi在抗动物病毒性疾病方面的应用等方面进行综述,并对RNAi在抗病毒方面的应用前景进行展望。
- 鲁毅李任峰徐萍王三虎田献礼
- 关键词：RNA干扰抗病毒
- 一种基于重组S1蛋白检测猪流行性腹泻病毒IgA抗体的ELISA方法
- 本发明公开了一种基于重组S1蛋白检测猪流行性腹泻病毒IgA抗体的ELISA方法，本发明对PEDV流行毒株（CH/HNQX‑3/14）的部分S1基因（包含499‑638 aa,748‑755 aa和756‑771 aa 3...
- 李任峰田香勤鲁毅荆焕芳李晓晗韩俊伟王自良马金友柳东阳
- 文献传递
- 来航鸡FOXL2基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2012年
- 为了研究来航鸡FOXL2基因的结构及功能,根据GenBank上登录的红色原鸡FOXL2基因序列设计引物,对来航鸡FOXL2基因进行了克隆、测序,并对该序列进行生物信息学分析。结果表明:克隆得到的来航鸡FOXL2基因全长为1 130 bp(GenBank登录号为JF708868),包含1个918 bp的完整开放式阅读框,编码305个氨基酸,其CDS编码区的核苷酸序列与红色原鸡、人、牛、野猪、家鼠、欧洲兔、蟾蜍、斑马鱼及罗非鱼的FOXL2基因对应序列的同源性分别为99.8%、80.0%、80.4%、80.3%、80.5%、81.5%、77.7%、71.8%、75.5%,推导的氨基酸序列同源性分别为99.7%、64.7%、64.7%、65.4%、63.5%、63.8%、79.7%、78.3%、79.9%;FOXL2编码蛋白主要存在于细胞核中,存在1个保守结构域,不含信号肽、跨膜结构域和剪切位点,并存在2个蛋白质激酶C磷酸化位点、1个cAMP和cGMP依赖的蛋白激酶磷酸化位点、2个N-糖基化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和4个N-豆蔻酰化位点,预测最佳抗原表位候选区域为45～49位(SQKPP)、147～152位(RPPPTH)和169～173位(SPPKY)。
- 徐萍李任峰赵坤王三虎何宏轩鲁毅
- 关键词：来航鸡克隆
