黄建永
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：杜克大学更多>>
- 发文基金：天津市卫生局科技基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 诱导非典型蛋白激酶C基因沉默增加胶质瘤干细胞化疗药物敏感性的研究
- 2015年
- 目的通过诱导非典型蛋白激酶C（aPKC）基因沉默增加胶质瘤干细胞对化疗药物的敏感性，为根治胶质瘤干细胞提供理论支持。方法流式细胞术分离大鼠c6胶质母细胞瘤侧群细胞，RNA干扰（RNAi）技术沉默c6侧群细胞aPKC表达，MTT和锥虫蓝实验检测单纯疱疹病毒-胸苷激酶（HSV-tk）／更昔洛韦（GCV）对c6侧群细胞的杀伤效果；建立裸鼠皮下胶质瘤模型，测量肿瘤体积，肿瘤组织块称重，原位凋亡法检测细胞凋亡。结果c6侧群细胞aPKC基因被有效沉默后，可显著增加其对HSV-tk／GCV药物的敏感性，表现为细胞凋亡和死亡数明显增加（P〈0．05）；体内实验显示肿瘤体积和重量较对照组明显减小（P〈0．05），细胞凋亡明显增加（P〈0．05）。结论通过诱导aPKC基因沉默可进一步增加胶质瘤干细胞对化疗药物HSV-tk／GCV的敏感性，为胶质瘤干细胞的基因治疗提供了新的方法选择。
- 刘晓智于士柱姜忠敏黄建永苏治国李罡张琳李艳霞刘振林
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞蛋白激酶C
- 恢复胶质瘤细胞间隙连接通讯抑制肿瘤性脑水肿病情进展
- 2013年
- 1．材料：鼠胶质瘤细胞株C6购自上海肿瘤研究所，CX43表达质粒由天津市神经病学研究所馈赠；雄性SD大鼠购自中国军事医学科学院动物中心，饲养于天津医科大学实验动物中心。
- 刘晓智刘振林于士柱黄建永陈镭盛凤姜忠敏
- 关键词：胶质瘤细胞株细胞间隙连接通讯肿瘤性病情进展脑水肿
- 连接蛋白CX43与水通道蛋白4联合诱导胶质瘤性脑水肿形成的偶联机制被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨细胞间连接蛋白43(connexin 43,CX43)与水通道蛋白4(aquaporin 4,AQP4)在联合诱导成胶质细胞瘤性脑水肿形成过程中的功能偶联机制。方法:在大鼠颅内建立C6胶质瘤脑移植模型,磁共振成像检测成瘤及水肿情况,免疫荧光法和蛋白质印迹法检测肿瘤内部及瘤周CX43和AQP4的表达特点。体外采用低渗环境培养C6胶质瘤细胞和正常胶质细胞后,反转录PCR法比较2种细胞中CX43和AQP4的mRNA表达变化趋势;采用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)技术分别沉默C6胶质瘤细胞和正常胶质细胞中AQP4和CX43的表达,检测另一基因的表达变化。结果:C6胶质瘤脑移植模型中,胶质瘤内部CX43表达缺失和AQP4表达水平轻度增高,瘤周则表现为CX43表达水平轻度增高和AQP4明显高表达。体外实验发现,低渗环境下正常胶质细胞和C6胶质瘤细胞中AQP4和CX43的mRNA水平随时间的延长均有不同程度的升高,但正常胶质细胞的变化程度明显低于肿瘤细胞,且CX43的变化时间窗落后于AQP4。siRNA沉默C6细胞的AQP4表达后,其CX43表达水平的升高程度明显下降(P<0.05);沉默正常细胞的CX43表达后,其AQP4水平则无明显变化(P>0.05)。结论:AQP4和CX43在胶质瘤内部及其边缘存在2种不同的致脑水肿机制,CX43可能是AQP4的潜在下游调控因子。
- 姜忠敏于士柱刘振林黄建永盛凤李宝江张亮刘晓智
- 关键词：神经胶质瘤连接蛋白43脑水肿
- Par-6／aPKC极性蛋白重排促进胶质瘤侧群细胞快速增殖与分化被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨Par-6/非典型蛋白激酶C（atypical protein kinase C,aPKC）极性蛋白重分布是否能促进胶质瘤侧群细胞快速增殖与分化.方法 实验分为对照组、无义序列组和siR-PKCξ组3组.免疫细胞荧光方法检测aPKC、Par-6和TRIM32（tripartite motif-containing protein 32 gene）在细胞中的定位,绘制细胞球体生长曲线,Ki67免疫荧光方法检测细胞核增殖活性,免疫荧光方法检测细胞标记蛋白的表达.结果 与对照组和无义序列组比较,siR-PKCξ组PKCζ蛋白表达水平明显降低（0.07±0.03,P＜0.01）,Par-6极性消失,TRIM32发生核转移.基因转染24 h,siR-PKCξ组Ki67阳性百分率为（48.65±11.34）％,均高于其他两组（P＜0.05）,转染72 h,siR-PKCζ组低表达CD133和Nestin,高表达GFAP（P ＜0.05）,β-tubulinⅢ和myelin表达无明显变化（P＞0.05）.结论 通过诱导Par-6/aPKC极性蛋白重排可促进胶质瘤侧群细胞快速增殖与分化.
- 刘晓智姜忠敏于士柱黄建永怀鹏李艳霞刘振林
- 关键词：神经胶质瘤细胞极性RNA干扰
