黄梅清 作品数:72 被引量:306 H指数:9 供职机构: 福建省农业科学院 更多>> 发文基金: 福建省科技计划项目 福建省属公益类科研院所基本科研专项 福建省农科院青年科技人才创新基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 理学 更多>>
番鸭呼肠孤病毒人工感染雏番鸭肝的蛋白质组学分析 被引量:1 2017年 应用蛋白质组学技术研究人工感染番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的番鸭肝和健康对照番鸭肝的蛋白质组差异,为深入研究MDRV的致病机制奠定理论基础。通过二维双向凝胶电泳技术和MALDI-TOF-TOF质谱仪分析获取MDRV感染组与健康对照组之间的差异表达蛋白质,并运用蛋白质搜索鉴定软件Mascot 2.3.02鉴定蛋白质。结果共鉴定出38个差异表达蛋白质。比较感染组和健康对照组结果,感染组番鸭肝中有10个表达下调的蛋白质和17个表达上调的蛋白质,7个表达蛋白质仅出现在健康对照组,4个表达蛋白质仅出现在感染组。MDRV感染组的番鸭肝有肝细胞、神经细胞和肌肉细胞受损现象,同时存在细胞修复机制。差异蛋白质组学为MDRV分子发病机制的分析提供了一个新途径。 朱果真 黄梅清 程晓霞 程晓霞 陈仕龙 郑敏 俞伏松关键词:番鸭呼肠孤病毒 番鸭 蛋白质组学分析 猪繁殖与呼吸综合征病毒灭活疫苗安全性和免疫原性测定 被引量:9 2007年 选用猪繁殖与呼吸综合征病毒福建分离株(PRRSV Fuzhou 01株)为制苗种毒。病毒经Marc 145细胞增殖、超速离心浓缩、甲醛灭活后,分别制成新型佐剂IMS1312灭活疫苗和油乳剂灭活疫苗,两种疫苗病毒含量约为108.0TCID50.mL-1。30头25日龄的PRRSV抗体阴性的断奶猪被随机分成5组,每组6头,用于检测疫苗的安全性和免疫原性。结果表明两种疫苗首次免疫断奶仔猪后14 d可以检测到抗体,二免14 d抗体水平达到高峰,一免180 d后抗体水平可以维持在1∶320。两种佐剂苗在4℃放置12个月均不分层,并对断奶仔猪具有良好的安全性和免疫原性。 王隆柏 魏宏 陈少莺 车勇良 庄向生 陈仕龙 林长光 周伦江 黄梅清关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 灭活疫苗 安全性 免疫原性 食源性致病菌快速检测技术及其应用研究进展 被引量:20 2018年 随着食品工业的发展,食品安全成为人们日益关注的公共健康问题。在影响食品安全的因素中,病原微生物是最主要的因素之一。因此,建立食源性致病菌的快速检测技术对确保食品安全和保障人类健康意义重大。传统的食源性致病菌检测方法,如微生物培养法和菌落技术法耗时费力,远不能满足食品安全快速检测的要求。目前已报道多种食源性致病菌的快速检测方法,如免疫学技术、分子生物学技术、生物传感器技术等。本文综述了国内外食源性致病菌的快速检测技术及其应用研究进展,比较分析各项检测技术的特点,为新的食源性致病菌检测技术的开发提供参考。 陈秀琴 黄梅清 郑敏 陈少莺关键词:食源性致病菌 免疫学技术 分子生物学技术 猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲型FJ0602株的分离及其ORF7的序列分析 被引量:28 2008年 应用Marc-145细胞从福建某猪场疑似猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病死猪脾脏和淋巴结中分离到一株病毒。该分离毒经Marc-145细胞6次传代后出现稳定的细胞病变(CPE),为105.25 TCID50/mL;间接免疫荧光试验表明,感染分离毒的CPE细胞仅与抗PRRSV单克隆抗体反应并出现特异性的胞浆荧光;致病性试验表明试验猪接种分离毒后14 d内都表现为体温正常、生长良好,没有出现PRRS的发病症状;序列测定表明分离毒的ORF7基因与LV、AMERVAC、B13、Ningbo42株的核苷酸同源性分别为96.64%、98.45%、95.09%、98.45%,氨基酸同源性分别为98.44%、99.22%、95.31%、99.22%,与VR2332、CH-1a株的ORF7基因差异较大,核苷酸同源性为58.84%、60.45%,氨基酸同源性为55.30%、56.82%,该分离毒与LV、AMERVAC、B13、Ningbo42株在基因型上同属于欧洲型毒株,命名为PRRSV-FJ0602。本研究首次证实欧洲型PRRSV在福建省存在。 黄梅清 车勇良 陈少莺 江斌 魏宏 王隆柏 陈仕龙 周伦江 庄向生关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 番鸭细小病毒和鹅细小病毒双重实时荧光定量PCR检测引物 本发明提供一种番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)双重实时荧光定量PCR检测引物及方法,其中,MDPV引物序列如下:上游引物P1:TAATGGTGGCAGGAATGCACAGTTC,下游引物P2:TGTTACC... 林甦 陈少莺 王劭 黄梅清 程晓霞 俞博 肖世峰文献传递 番鸭细小病毒和鹅细小病毒双重实时荧光定量 PCR 鉴别诊断技术 本文件规定了鉴别检测番鸭细小病毒( Muscovy duck parvovirus,MDPV)和鹅细小病毒( Gooseparvovirus,GPV)双重实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain re... 林甦 王劭 陈少莺 陈秀琴 黄梅清 程晓霞 肖世峰 陈仕龙 林锋强感染新型鸭呼肠孤病毒的番鸭肝脏蛋白质组双向电泳方法的建立 被引量:1 2013年 为建立感染新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)的番鸭肝脏蛋白质组双向电泳(2-DE)方法。本研究通过对人工感染NDRV的雏番鸭肝脏病变的观察,对肝脏蛋白质提取裂解液的配方、样品上样量、一向等电聚焦(IEF)参数等条件的对比和优化,建立了有效的番鸭肝脏2-DE方法。结果表明:采用攻毒后病变最典型的第5天的番鸭肝脏作为研究样品;采用研磨-超声-裂解液(7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4%CHAPS、65 mmol/L DTT、40 mmol/L Tris-base、0.5%IPG buffer)法提取肝脏蛋白质,结合2D clean-up kit以及去拖尾DeStreak试剂纯化蛋白,按1100μg上样,设置IEF参数为:50 V 12 h、200 V 1.5 h、500 V 1 h、1000 V 1 h、8000 V 3 h、8000 V 60000 V h、500 V维持,采用胶体考马斯亮蓝染色,能获得分辨率高、重复性好的2-DE图谱。应用建立的2-DE方法和PDQest 8.0分析软件,发现26个与正常番鸭肝脏蛋白表达水平超过3倍的差异蛋白点。该方法的建立为进一步寻找NDRV感染宿主组织相关蛋白以及水禽呼肠孤病毒差异蛋白质组学研究提供了技术支持。 黄梅清 朱果真 陈仕龙 郑敏 程晓霞 陈少莺关键词:番鸭 肝脏 蛋白质组 新型鸭呼肠孤病毒 免疫新城疫活疫苗对大肠杆菌感染鸡群 血清生化指标变化的影响 2022年 为了研究鸡新城疫活疫苗紧急免疫控制鸡大肠杆菌病的效果,通过大肠杆菌人工感染30日龄蛋鸡,待出现病症后,紧急免疫新城疫Lasota弱毒活疫苗(Ⅳ系)4羽份,分别于免疫后第5 d、第10 d、第17 d,随机采集各组血样8份,分离血清,分别用比浊法、双缩脲法、溴甲酚绿法、黄嘌呤氧化酶法测定血清溶菌酶、总蛋白、白蛋白、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果显示:免疫10 d,试验组、对照组、空白组的溶菌酶值分别为121.81±21.76 U/mL、116.56±10.78 U/mL、112.27±12.02 U/mL,试验组与对照间差异显著;试验组、对照组的总蛋白和白蛋白都低于空白组,差异显著;此外,试验组总蛋白高于对照组,两者间差异显著;试验组与对照组的血清SOD值差异不显著。结果表明:新城疫活疫苗能有效提升血清的溶菌酶和蛋白质含量,提升机体非特异性免疫,对鸡大肠杆菌病有较好的防控和辅助治疗作用。 蔡羲 林琳 林琳 陈秀琴 黄梅清 江斌关键词:大肠杆菌 新城疫活疫苗 血清 生化指标 福建省禽源大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:2 2020年 为研究福建省禽源大肠杆菌分离株的耐药情况,通过采集疑似大肠杆菌病患禽的肝、脾、肺,经麦康凯琼脂培养基分离、伊红美蓝培养基鉴定、生物化学试验,结合临床诊断,结果分离到15株禽源大肠杆菌(鸡源10株、鸽源5株)。药敏试验结果表明,大部分菌株对复方新诺明、头孢菌素、四环素、林可霉素、多西环素耐药;部分菌株对多黏菌素B和呋喃唑酮中度敏感;大部分菌株对丁胺卡那霉素高度敏感。该研究可为福建省禽大肠杆菌病的防控提供理论依据。 陈秀琴 张世忠 江斌 江斌 郑敏 林琳 黄梅清关键词:大肠杆菌 敏感性 高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒间接免疫荧光鉴别方法的建立 被引量:13 2009年 应用2株针对猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的单克隆抗体(McAb-A61,McAb-C65)建立了对PRRSV美洲株、欧洲株和高致病性毒株进行鉴别的间接免疫荧光试验(IFA)方法,并与商品化的PRRSV RT-PCR鉴别试剂盒进行比较。结果显示,McAb-C65与PRRSV美洲株和高致病性PRRSV毒株均呈阳性反应;McAb-A61与PRRSV美洲株呈阳性反应,但不与高致病性PRRSV毒株发生反应;2株单抗都不与欧洲株反应;IFA与RT-PCR的符合率为100%。表明,建立的PRRS间接免疫荧光鉴别诊断方法可为临床高致病性PRRS的确诊提供可靠的验证手段。 陈仕龙 黄梅清 林天龙 江斌 庄向生 陈少莺关键词:单克隆抗体 间接免疫荧光试验