黎小瑛
- 作品数：81 被引量：274H指数：9
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因嵌合hpRNA载体一步快速构建及沉默效果的研究被引量：2
- 2016年
- 番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)严重威胁番木瓜种植业的发展,且目前没有十分有效的防治办法。病毒侵染植物依赖寄主因子的协助,真核翻译起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)是多种RNA病毒侵染植物的必需因子。以番木瓜eIF4E家族基因为研究对象,构建同时干扰其eIF4E和eIFiso4E基因的发卡RNA(hairpin RNA,hpRNA)载体,并将其导入到番木瓜叶肉原生质中。通过荧光实时定量检测发现,番木瓜中eIF4E和eIFiso4E基因的表达量分别下降了49.8%和67.6%,这为进一步研究番木瓜eIF4E家族基因对PRSV侵染的影响以及利用RNA干扰技术靶向植物基因的病毒防治新策略提供理论和实践依据。
- 霍鹏言普沈文涛黎小瑛周鹏
- 关键词：番木瓜原生质体EIF4E
- 番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因嵌合hpRNA载体一步快速构建及沉默效果的研究
- 番木瓜环斑病毒(PRSV)严重威胁番木瓜种植业的发展,且目前没有十分有效的防治办法。病毒侵染植物依赖寄主因子的协助,真核翻译起始因子4E(eIF4E)是多种RNA病毒侵染植物的必需因子。本研究以番木瓜eIF4E家族基因为...
- 霍鹏言普沈文涛黎小瑛周鹏
- 关键词：番木瓜HPRNA原生质体EIF4E
- 文献传递
- 甘薯羽状斑驳病毒海南分离物全基因组序列克隆及分析被引量：1
- 2020年
- 为了明确海南本地甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)种群的遗传进化关系及致病机理,本研究利用Small RNA测序技术对采自海南的甘薯样品进行鉴定,获得与SPFMV序列具有相似性的85个contigs,与NC_001841相似性较高。试验设计了5对共8条引物,分别为SPFMV-1F/1R、SPFMV-11F/1R、SPFMV-2F/2R、SPFMV-3F/3R和SPFMV-3F/33R PCR,扩增获得3987 bp、3710 bp、1996 bp、3369 bp和4730 bp目的片段。在此基础上再分段设计引物,进行基因全序列PCR扩增,序列拼接获得SPFMV-HN基因组全序列,其包含完整编码阅读框。本研究结果首次报道SPFMV海南分离物基因组全长,并且在P1区预测到另一个外框元件(pretty interesting sweet potato potyviral ORF,PISPO),聚合酶滑移机制可以产生带有额外核苷酸的转录变体,这些核苷酸可以翻译为P1N-PISPO和P3N-PIPO。本研究结果为进一步探究SPFMV致病分子机理和培育抗病甘薯品种奠定研究基础。
- 李嘉莹沈文涛庹德财朱国鹏黎小瑛言普周鹏
- 关键词：甘薯羽状斑驳病毒SMALL
- 番木瓜畸形花叶病毒hc-pro基因保守基序FRNK点突变对病症表现的影响被引量：1
- 2018年
- 为研究番木瓜畸形花叶病毒(PLDMV)hc-pro基因保守基序FRNK对病症表现的影响,本研究采用定点突变的方法,获得了PLDMV-DF的hc-pro基因保守基序FRNK的精氨酸(R)突变为异亮氨酸(I)的突变体克隆p35SPLDMV-GFP-R_(183)/I,该位点突变显著减轻了PLDMV在番木瓜上的病症表现,表明是影响其致病性的关键位点。本研究结果为利用交叉保护防控番木瓜畸形花叶病毒病提供了重要参考和材料。
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- 关键词：番木瓜侵染性克隆症状表现
- 基于Nimble Cloning的新型植物BiFC载体的构建和应用
- 2019年
- Nimble Cloning是一项新型的分子克隆技术,具有操作简单、使用灵活、克隆效率高、标准化克隆等优点,但Nimble Cloning需要使用配套的表达载体。本研究将pDOE系列的4个整合型BiFC载体上的SfiI位点去除,然后在这4个载体的多克隆位点处插入NC克隆框,构建了一套适用于Nimble Cloning的新型植物BiFC表达载体,命名为pNC-BiFC-VD系列载体。将pNC-BiFC-VD载体应用到植物蛋白互作研究中,分析了番木瓜eIFiso4E和病毒PRSV的vpg蛋白之间的互作,结果表明番木瓜eIFiso4E和PRSV-vpg在细胞核发生互作。该套新型植物BiFC表达载体有望在植物蛋白互作研究中得到广泛应用。
- 曾妍静沈文涛庹德财黎小瑛言普高新征周鹏
- 关键词：分子克隆
- 用于检测ANSSV的RT-LAMP检测引物及其应用、检测试剂和检测方法
- 本发明涉及生物技术及微生物检测技术领域，特别涉及用于检测ANSSV的RT‑LAMP检测引物及其应用、检测试剂和检测方法。该RT‑LAMP检测引物的序列如下：外引物ANSSV‑F3、外引物ANSSV‑B3、内引物ANSSV...
- 庹德财赵光远沈文涛周鹏言普黎小瑛
- 文献传递
- 利用ID-ELISA技术调查分析海南3种主要番木瓜病毒分布及感病情况被引量：1
- 2015年
- 利用PCR方法分别扩增番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)、番木瓜畸形花叶病毒(papaya leaf distortion mosaic virus,PLDMV)和番木瓜花叶病(papaya mosaic virus,Pa MV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因,并连接到原核表达载体p ET-28a上,获得重组质粒p ET28-PRSV-CP、p ET28-PLDMV-CP和p ET28-Pa MV-CP,通过转化、诱导表达后,经SDS-PAGE分析显示,这3种CP蛋白在大肠杆菌中高效表达,其中PRSV CP蛋白和PLDMV CP以包涵体形式存在,Pa MV CP以可溶蛋白形式存在。利用Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化获得了3种病毒的重组CP蛋白,并免疫大白兔获得高效价的抗体。Western blot检测结果表明,这3种抗血清与对应的诱导表达蛋白发生特异反应。再采用抗血清建立一种快捷、简便和低成本的ID-ELISA(Indirect enzymelinked immunosorbent assay)技术,并利用此技术对海南岛283个疑似感病的番木瓜样品进行检测鉴别,初步掌握了海南岛3种主要番木瓜病毒的分布及感病情况,为下一步该病的有效防治策略提供科学依据。
- 杨勇庹德财沈文涛言普黎小瑛周鹏王锐萍
- 关键词：外壳蛋白抗血清
- 番木瓜eIF4E和eIFis04E基因嵌合hpRNA载体一步快速构建及沉默效果的研究
- 番木瓜环斑病毒(PRSV)严重威胁番木瓜种植业的发展,且目前没有十分有效的防治办法.病毒侵染植物依赖寄主因子的协助,真核翻泽起始因子4E(eIF4E)是多种RNA病毒侵染植物的必需因子.本研究以番木瓜eIF4E家族基因为...
- 霍鹏言普沈文涛黎小瑛周鹏
- 关键词：番木瓜环斑病毒原生质体基因沉默
- 文献传递
- 海南地区番木瓜畸形花叶病毒的发现与鉴定被引量：5
- 2013年
- 利用马铃薯Y病毒属的简并引物对3个海南感病番木瓜植株的叶片进行RT-PCR检测,并将其克隆到T载体上进行测序和BLAST分析.结果表明：均获得了大小约1 700 bp的特异性条带,与预期大小基本一致;所得序列与GenBank中收录的番木瓜畸形花叶病毒（Papaya leaf distortionmosaicvirus,PLDMV）基因序列相似性达到88％～96％,序列包含部分NIb蛋白基因、外壳蛋白（CP）基因和3’端非编码区.这是首次报道在中国海南地区发现番木瓜感染了PLDMV.但是仅基于PLDMV外壳蛋白基因的系统进化分析结果还不足以证明在海南发现的PLDMV与其他地区的某一PLDMV株系为同一进化簇.
- 杨勇庹德财沈文涛言普黎小瑛周鹏
- 关键词：番木瓜系统进化树
- 用于检测ANRSV的RT-LAMP检测引物及其应用、检测试剂和检测方法
- 本发明涉及生物技术及微生物检测技术领域，特别涉及用于检测ANRSV的RT‑LAMP检测引物及其应用、检测试剂和检测方法。该检测引物的序列如下：外引物ANRSV‑F3、外引物ANRSV‑B3、内引物ANRSV‑FIP、内引...
- 庹德财沈文涛赵光远周鹏言普黎小瑛
- 文献传递
