于海燕
- 作品数:4 被引量:21H指数:2
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- 发文基金:国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 大黄素通过激活PPARγ促进HepG2细胞葡萄糖摄取被引量:18
- 2007年
- 目的 构建PPARγ和PPARγ应答元件(PPRE)荧光素酶系统,并确定大黄单体成分大黄素是否能够通过激活PPARγ促进HepG2肝细胞葡萄糖摄取。方法 (1)构建PPARγ和PPRE荧光素酶系统并对20余种中药成分进行筛选;(2)将能够激活PPARγ和PPRE系统的大黄素与HepG2肝细胞进行培养,分别用RT-PCR/Southern杂交测定PPARγmRNA的表达;(3)用Western印迹法测定大黄素处理后的HepG2细胞的PPARγ和葡萄糖转运蛋白2(Glut2)的表达水平;(4)测定大黄素作用后的HepG2细胞对2-脱氧-[^3H]-D-葡萄糖摄取率。结果 (1)在筛查的中药成分中,大黄素作用24h后,呈剂量(0.04~180μmol/L)依赖性地增强COS-7细胞PPRE荧光素酶活性,其中90μmol/L浓度时达到最高值,为对照组的4倍(P〈0.01),而10μmol/L浓度的吡格列酮作用强度为对照组的6倍(P〈0.01);(2)大黄素在90μmol/L浓度时刺激HepG2细胞PPARγmRNA表达水平增加2.7倍(P〈0.01);(3)大黄素的作用呈剂量和时间依赖性地刺激HepG2细胞PPARγ和Glut2蛋白的表达水平。其中,PPARγ蛋白水平在90μmol/L和作用16h刺激作用最强,约为对照组的3.1—3.8倍(P〈0.01);Glut2蛋白水平在90μmol/L和作用16h刺激作用最强,约为对照组的2.5—4.3倍(P〈0.01);(4)HepG2细胞的葡萄糖摄取率在90μmol/L浓度的大黄素作用24h后,约为对照组的5倍(P〈0.01)。结论 研究结果显示大黄素刺激HepG2肝细胞PPARγ和Glut2蛋白表达,并促进葡萄糖的摄取。
- 杨丽娟于海燕母义明汪保安窦京涛陆菊明潘长玉
- 关键词:大黄素PPARΓ葡萄糖转运蛋白2
- 饱和脂肪酸对主动脉平滑肌细胞内二脂酰甘油合成和蛋白激酶C活性的影响被引量:3
- 2005年
- 目的:通过测定各种脂肪酸对体外培养的牛主动脉平滑肌细胞二脂酰甘油(DAG)和蛋白激酶C(PKC)水平的影响,探讨脂肪酸对动脉粥样硬化(AS)发生的可能作用机制。方法:分离牛主动脉平滑肌细胞在体外培养,分别用浓度为200μmol/L的饱和脂肪酸软脂酸和硬脂酸、不饱和脂肪酸油酸和花生四烯酸处理后,然后将细胞分别用分离液和细胞裂解液处理,通过液闪计数仪测定32P磷酸的cpm值(1cpm=6.17×108Bq),计算DAG和PKC。结果:饱和脂肪酸软脂酸和硬脂酸(200μmol/L)分别作用24h后,牛主动脉平滑肌细胞内的DAG水平分别为927.2和1533.3pmol/106个细胞,与对照组(190pmol/106个细胞)有显著性差异(P<0.01)。油酸增加细胞内DAG水平,为334.4pmol/106个细胞(P<0.01)。花生四烯酸对细胞内DAG含量无明显影响。酰基辅酶A抑制剂TriacsinC能够完全抑制软脂酸对DAG的刺激作用。此外,软脂酸和硬脂酸均能刺激细胞内PKC活性,分别为553.7和557.2cpm,对照组为394cpm(P<0.05)。结论:饱和脂肪酸可能通过其代谢产物酰基辅酶A促进主动脉平滑肌细胞内DAG的合成和提高PKC活性,这可能与AS有关。
- 于海燕井口登与志母义明潘长玉
- 关键词:饱和脂肪酸蛋白激酶C主动脉
- 中药通过激活PPARs治疗糖尿病胰岛素抵抗机制的研究及新型胰岛素增敏剂的筛选
- 第一部分:PPAR和PPRE表达载体的构建和荧光素酶筛选系统的建立
目的:进行PPARγ、PPARα、PPRE表达载体的构建、扩增与提取,组建具有较高灵敏性的PPRE荧光素酶筛选系统。方法:用RT-PCR方法扩...
- 于海燕
- 关键词:糖尿病胰岛素中药筛选增敏剂
- 大黄酸改善胰岛素敏感性的作用及其机制研究
- 2008年
- 改善胰岛素敏感性对防治2型糟尿病(T2DM)有重要意义。我国中医药治疗糖碌病效果显著但机制尚不甚清楚,本课题组从改善胰岛素敏感性的角度人手,先后通过药物筛选、细胞和动物实验3个部分研究中药大黄单体成分——大黄酸对糖尿病的治疗作用,其机制可能与上凋机体外周组织的过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)-γ及葡萄糖转运蛋白(GLUT)表达,从而促进外周组织葡萄糖摄取并改善机体胰岛素敏感性有关。本文将分别对这3部分实验内容进行介绍并就大黄酸改善胰岛素敏感性的作用机制展开讨论。
- 母义明迟铖杨丽娟金苗苗于海燕
- 关键词:大黄酸胰岛素敏感性过氧化物酶体增殖物活化受体葡萄糖转运蛋白2型糖尿病