任凯
- 作品数：23 被引量：33H指数：4
- 供职机构：西安医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金陕西省教育厅科研计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学经济管理更多>>
- 转染NEP基因对Aβ_(25-35)诱导神经元凋亡的保护作用被引量：1
- 2008年
- 目的研究转染NEP基因对神经毒物质Aβ25-35诱导神经元凋亡的保护作用。方法培养大鼠脑皮层神经元,用Aβ25-35作用神经元制备凋亡模型,NEP基因转染神经元。通过MTT法及流式细胞分析法观察NEP基因过表达对Aβ诱导神经元凋亡的保护作用。通过RT-PCR检测目的基因NEP,APP,以及凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA的表达,Western-Blot测定APP和Aβ的蛋白表达。结果MTT和流式细胞分析法观察,发现在Aβ25-35作用下转染NEP组神经元活,性显著增高(P<0.05),凋亡率降低。RT-PCR及Western Blot结果显示,转染NEP组神经元APP基因的表达明显减少,Aβ的生成减少;同时促凋亡基因Bax表达降低,Bcl-2基因表达增高。结论转染NEP基因能保护Aβ所致的神经元凋亡。
- 张亚伦丁岩邵世滨杨玲玲任凯段珊曾季平崔行
- 关键词：神经元原代培养中性内肽酶
- 神经特异性启动子PDGF-EGFP载体的构建及组织表达特异性鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的构建含有神经特异性启动子PDGF的绿色荧光蛋白真核表达载体,并进行组织特异性鉴定。方法提取人外周血基因组DNA,采用PCR技术扩增PDGF-B链上游启动子序列,将其定向克隆至增强型绿色荧光蛋白报告基因表达质粒pEGFP-1中,构建真核表达载体pPDGF-EGFP。将重组载体转染至人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH,以及4种其他组织来源细胞系,观察绿色荧光蛋白表达以鉴定其神经特异性。结果成功构建表达载体pPDGF-EGFP,经转染显示pPDGF-EGFP在人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH中高表达,而在其它4种非神经组织来源细胞株中极少量表达或未见表达。结论重组真核表达载体pPDGF-EGFP有较高的神经组织特异性,为进一步研究神经系统疾病的靶向基因治疗奠定了基础。
- 任凯丁岩崔云燕杨玲玲张静崔行
- 关键词：血小板源性生长因子细胞株
- 鞘脂激活肽NP上调AR基因表达及功能影响前列腺癌细胞增殖的研究
- 鞘脂激活蛋白原(Prosaposin)是一种高度保守的热稳定糖蛋白(65-72kDa,527氨基酸),其基因位于10号染色体长臂(q21-22),全长17kb,有14个外显子。鞘脂激活蛋白原经水解后产生4种小的热稳定糖蛋...
- 任凯
- 关键词：雄激素受体前列腺肿瘤细胞株
- 文献传递
- 完善高校生物技术专业课程教学的关键举措阐释被引量：1
- 2021年
- 生物技术专业是普通高等学校的本科专业,主干学科包括医学、生物学和农学,具有很强的专业性,重点培养生物科学与技术的复合型人才。在生物技术知识广泛应用于社会各个领域的背景下,高校积极对生物技术专业课程开展教学创新与改革尤为关键。本文以生物技术概论课程教学为例,具体阐述高校生物技术专业课程教学的关键举措,以期为生物技术专业教师提供些许教学上的建议。
- 丁岩任立刚任凯
- 关键词：高校生物技术专业课程教学
- 神经营养肽NP14基因的合成及其在大肠杆菌中的高表达
- 2007年
- 目的:根据鞘脂激活蛋白原神经营养序列设计并构建短肽(neurotrophic peptide,NP)多拷贝串连表达载体,利用基因工程的方法制备短肽NP。方法:根据大肠杆菌的偏爱密码子设计并合成NP的碱基片段,通过PCR方法合成串联双拷贝2NP片段,经平端连接克隆到载体pUC18中。利用EcoT14I酶切pUC18-2NP后可产生非镜相对称黏性末端,与表达载体pETEcoT一次连接反应,得到一系列含有不同片段拷贝数的表达载体pETE-coT-multiNP,经PCR-array方法进行阳性克隆筛选、测序鉴定后转化入大肠杆菌BL21(DE3)进行原核表达。结果:经IPTG诱导后,在BL21(DE3)菌中高效表达了2、4、8拷贝融合蛋白,并在每个单拷贝之间加入了溴化氢的切割位点,使融合蛋白切割后能够得到单拷贝的短肽。结论:短肽NP在大肠杆菌中获得高效表达,为进一步研究其生物活性奠定了基础。
- 张之勇苑辉卿姜安丽蔡捷任凯胡晓燕孔峰张建业
- 关键词：融合蛋白质类原核表达
- 没药倍半萜抑制前列腺癌细胞的增殖活性初探被引量：5
- 2007年
- 目的初步探讨没药两个倍半萜单体化合物抑制前列腺癌细胞增殖的作用机制。方法应用倍半萜单体化合物处理人前列腺癌细胞株LNCaP后,MTT检测化合物对细胞增殖的影响;流式细胞术进一步分析细胞周期时相的变化;反转录PCR(RT-PCR)检测细胞周期相关蛋白p21WAF/CIP1(p21)和cyclinD的表达水平。结果两个没药倍半萜单体化合物对前列腺癌细胞均有显著的抑制活性(P<0.001),使细胞停滞于G0/G1期;并且能在mRNA水平诱导p21的表达,同时降低cyclinD的表达。结论没药倍半萜化合物抑制前列腺癌细胞增殖,可能是通过上调p21的表达、下调cyclinD蛋白的表达来实现的。
- 王小玲孔峰许爱辉吉恺蔡捷任凯苑辉卿
- 关键词：没药前列腺癌细胞株细胞周期蛋白D
- 国有商业银行改革方向与法人治理结构的完善
- 全文共分四部分.第一部分、导言.第二部分是国有商业银行改革方向的论述,在归纳以往改革发展,指出其不足和问题的情况下,提出国有商业银行下一步的产权改革方向.第三部分针对商业银行特殊的资本结构,论述了商业银行法人治理结构模式...
- 任凯
- 关键词：国有商业银行法人信息披露小股东利益国家股
- 文献传递
- 医学院校研究生分子生物学实验教学实践与探索被引量：9
- 2014年
- 为提高硕士研究生医学分子生物学实验技术教学质量,探索教学新模式,体现教与学的良好对接,在教学内容的选择、教学方法的改进、考核体制的建立等方面结合实践进行了探索,为研究生今后的科学研究和实际应用奠定基础。
- 任凯成凡
- 关键词：医学分子生物学实验教学硕士研究生
- Saposin C抑制雄激素受体的多泛素化以及在蛋白酶体中的降解(英文)
- 2014年
- 本研究旨在证实鞘脂活化蛋白C(saposin C)对雄激素受体(AR)多泛素化降解的影响及其机制.通过将真核表达载体saposin C转染LNCaP细胞,发现saposin C上调AR的蛋白水平和转录激活活性.进一步将野生型和突变型泛素质粒Ubwt和UbK48R分别与saposin C共转染LNCaP细胞发现,saposin C能够促进AR蛋白的单泛素化形式的稳定性,抑制AR的多泛素化修饰及其在蛋白酶体中的降解.其分子机制是saposin C、Ub和AR三者形成复合体,抑制了AR的进一步多泛素化过程.同时还发现,在这一机制中,细胞内低浓度的雄激素(0.1 nmol/L)与saposin C具有协同作用.
- 任凯任立刚丁岩张雅利
- 关键词：雄激素受体
- PSA启动子介导的TAT-p21^(WAF1/CIP1)融合蛋白在前列腺癌细胞中的特异表达及活性初探被引量：1
- 2008年
- 目的:设计并构建含有前列腺组织特异性抗原(PSA)启动子的TAT-p21WAF1/CIP1融合蛋白真核表达载体(pPSA-TAT-p21),使由TAT蛋白转导结构域(TAT)介导的抑癌基因蛋白p21WAF1/CIP1(p21)能够在前列腺癌细胞中实现特异性的跨膜转运,增强p21对前列腺癌的抑制作用。方法:利用PCR技术构建含有PSA启动子、TAT蛋白转导序列和p21读码框架的真核表达载体pPSA-TAT-p21,并进行酶切、测序鉴定。脂质体法在前列腺癌LNCaP细胞和大肠癌HT-29细胞中转染上述表达载体及对照质粒后进行反转录PCR(RT-PCR),检测p21的mRNA以及蛋白在不同细胞中的表达情况。MTT法检测转染pPSA-TAT-p21后LNCaP细胞的增殖情况。结果:成功构建pPSA-TAT-p21真核表达载体。RT-PCR和Western blotting结果显示PSA-TAT-p21在前列腺癌细胞中有明显表达,在大肠癌细胞中基本不表达,呈现特异性的表达,而由CMV启动子介导的p21(pCMV-21)对照组在两个细胞株中均有表达。细胞增殖实验结果显示,含有TAT蛋白转导结构域的PSA-TAT-p21的融合蛋白对前列腺癌细胞增殖的抑制作用明显高于不含TAT的PSA-p21蛋白。结论:pPSA-TAT-p21能够在前列腺癌细胞中特异性地高效表达,为前列腺癌基因的靶向治疗提供了实验依据。
- 蔡捷苑辉卿孔峰任凯王小玲吉恺胡晓燕张建业
- 关键词：LNCAP细胞HT-29细胞
