何大澄 作品数:105 被引量:537 H指数:13 供职机构: 北京师范大学 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 理学 农业科学 更多>>
ICF45单克隆抗体的制备及其鉴定 2016年 本研究利用RT-PCR的方法扩增出人ICF45基因片段并将其构建至原核表达载体p ET-30a,随后将此质粒转化,用IPTG诱导大量表达ICF45蛋白。利用纯化的ICF45蛋白免疫BALB/c小鼠后,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,采用间接酶联免疫ELISA筛选阳性克隆,最终获得了2株分泌ICF45抗体的杂交瘤细胞。Western Blot、免疫荧光和免疫组化结果均显示其分泌的抗体能特异性识别ICF45蛋白,并且该抗体灵敏度高、特异性强。本研究获得的ICF45单克隆抗体,为深入阐明ICF45在人类细胞周期调控和肿瘤发生发展中的作用机制提供了重要的工具。 伊力亚尔.尼加提 王珊珊 王俊坡 商瑜 何大澄关键词:蛋白纯化 单克隆抗体 ELISA SELDI蛋白质芯片技术在蛋白质组学中的应用 被引量:46 2002年 本文介绍了SELDI(Suface-enhanced Laser Desorption/Ionization)蛋白质芯片技术的工作原理,讨论了不同类型的蛋白质芯片在蛋白质组学中的应用。 何大澄 肖雪媛关键词:蛋白质组学 SELDI 蛋白质芯片 细胞骨架通过YAP调控癌细胞中S100A7、S100A8和S100A9的表达中的应用 本发明公开了细胞骨架通过YAP调控癌细胞中S100A7、S100A8和S100A9的表达中的应用。本发明提供了能够促进微丝解聚的物质在如下(a)或(b)中的应用:(a)促进癌细胞中S100A7蛋白和/或S100A8蛋白和... 肖雪媛 李允广 孔菲 王睿 戚志 何大澄 孙锁柱文献传递 SiLAD:一种蛋白质组学动态分析的新技术 被引量:2 2010年 随着蛋白质组学的产生和发展,对蛋白质组表达水平的差异和变化进行体内的和动态的分析已势所必然地成为蛋白质组学研究的发展趋势。但是传统差异蛋白质组学方法只能提供细胞或组织内各种蛋白累积总量的信息,而不是真正意义上的蛋白质差异表达分析。 SiLAD(^(35)S in vivo Labeling Analysis for Dynamic Proteomics)技术正是基于这种需求而在本实验室创立的。SiLAD技术由于其在差异检出的灵敏度和时间分辨率方面的明显优势,以及除提供蛋白质组表达动态以外,可以提供蛋白质代谢等相关动态变化的更多信息,所以可适用于对多种生物过程进行的动态蛋白质组学研究。本文对SiLAD技术的原理及特点进行简要综述。 何立壬 何大澄关键词:差异表达蛋白 钙结合蛋白S100A7在肺癌中的选择性表达 被引量:5 2009年 背景与目的S100A7是S100蛋白家族成员,它的过表达与一些癌的发生和转移密切相关,本文旨在探讨S100A7在肺癌中的差异表达。方法采用RT-PCR、Western blot和免疫组化等技术探讨了S100A7蛋白在肺癌及其癌旁组织中的表达差异。结果S100A7只在肺鳞癌和大细胞肺癌组织中有表达,而在肺腺癌、小细胞肺癌及其他亚型的肺癌组织、癌旁组织和正常肺组织中不表达;并发现S100A7蛋白的表达在高分化的癌细胞中较强。结论S100A7蛋白可选择性地在不同亚型的肺癌中表达,很可能成为肺癌亚型诊断的标志蛋白之一。 张颢 刘丹慧 孙锁柱 刘吉福 武珊珊 毛颖 李明颖 冯盛 肖焱光 何大澄 肖雪媛关键词:肺肿瘤 病理学 p14^(ARF)对人黑色素瘤细胞增殖的影响及其作用机理的初探 被引量:10 2004年 ARF (alternativereadingframe)作为INK4a/ARF的 β转录产物 ,能够稳定p5 3,诱导细胞周期阻断或凋亡 .利用高表达p1 4 ARF的人黑色素瘤细胞模型 ,探讨了ARF抑制细胞增殖的分子作用机理 .研究发现p1 4 ARF高表达能将细胞周期阻断在G1和G2期 ,p5 3,p2 1 cip1 和p2 7kip1 蛋白水平明显增强 ,而p ERK1 / 2 ,CyclinD1和CyclinE蛋白水平下降 ,明显抑制细胞生长 .提示p1 4 ARF能通过ERK (extracellularsignal regulatedkinase) 彭丽霞 张伟 柳惠图 何大澄 高萍关键词:人黑色素瘤细胞 P14^ARF 细胞周期 多西环素作用前后小鼠胸腺上皮细胞蛋白质表达谱的变化 2011年 目的:探讨多西环素(doxycycline,Dox)作用前后小鼠胸腺上皮MTEC1细胞系蛋白质表达谱的差异,为阐明多西环素对胸腺细胞作用的机制奠定基础。方法:利用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(surface enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)分析H4和WCX2芯片捕获的多西环素作用前后差异蛋白表达谱,然后利用蛋白质序列数据库搜索和分析表达改变的蛋白。结果:SELDI-TOF蛋白芯片中H4芯片捕获了13种表达增高蛋白,5种蛋白表达降低。WCX2芯片捕获了14种表达增高蛋白,4种蛋白表达降低。共有5种蛋白在两种芯片中均显示表达增高,其中与细胞增殖和凋亡有关的蛋白为硫氧还原蛋白(thioredoxin,Trx)。结论:多西环素对MTEC1细胞的蛋白表达具有调控作用,有可能促进MTEC1细胞抵抗凋亡。 禚娅 刘慧 蒋砚秋 何大澄 陈慰峰 邵启祥关键词:多西环素 蛋白质芯片 采用蛋白质组学技术筛选与肺腺癌转移相关的标志蛋白 被引量:4 2007年 本文应用表面增强基质辅助激光解析离子化-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)对一系列转移能力递增的肺腺癌细胞CL1-0,CL1-2,CL1-3 CL1--5和CL1-5F4进行蛋白质谱检测。采用H4和WCX2两种具有表面修饰的蛋白芯片筛选差异蛋白,Biomarker Wizard软件分析结果显示H4和WCX2芯片共捕获到32个差异蛋白,其中15个蛋白在细胞随着转移能力增强而逐渐表达降低,相反17个蛋白则随着细胞转移能力的增强表达逐渐升高。在上述筛选到的32个差异蛋白中有2个蛋白可被两种芯片共同捕获。上述研究结果将为揭示肺癌发生和转移的分子机理提供有价值的实验数据。 田甜 郝佳 徐安健 肖雪媛 何大澄关键词:肺腺癌 标志分子 SELDI-TOF-MS 不同上样方式对双向电泳图谱质量的影响比较 蛋白质组技术难点之一是如何获取尽可能多的细胞或组织的蛋白信息。双向电泳蛋白斑点数目直接反映了实验蛋白质组信息的完整性。除样品制备外,蛋白上样方式对双向电泳图谱的质量和完整性有直接的影响。实验论文从以下三个方面考察不同的蛋... 丁勤学 刘进 何大澄关键词:双向电泳图谱 文献传递 一个在肺癌中缺失的基因的筛选与初步研究 肺癌为当前世界各地最常见的恶性肿瘤之一。我国近30年来肺癌发病率明显上升,其发病率与死亡率已占常见恶性肿瘤的首位。我们利用mRNA差异显示(DDRT-PCR)技术筛选肺癌组织与相应病人距癌组织5cM处的癌旁支气管上皮细胞... 刘丹慧 陈少松 罗崇林 肖雪媛 何大澄关键词:肺癌细胞系 支气管上皮细胞 文献传递