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应用可调控Notch1干扰载体诱导HeLa细胞增殖抑制被引量：2: 2007年; 背景与目的:Notch信号转导途径与细胞增殖与分化的调控密切相关,它的功能失调在肿瘤细胞的增殖分化中发挥着重要的作用。本研究构建了针对Notch1的可调控RNA干扰载体,并从分子水平及细胞水平上研究其对HeLa细胞的影响。方法:利用受CRE重组调控的RNA干扰载体pSico和pSicoR构建针对GAPDH和Notch1的shRNA表达载体,以pBS185-CRE作为CRE蛋白的表达载体,将HeLa细胞分为pSico、pSico/CRE、pSicoR和pSicoR/CRE4组,分别转染相应质粒,RT-PCR和Westernblot法检测干扰效率,CBF-1荧光素酶报告载体检测细胞内活性Notch信号水平,MTS实验检测细胞增殖状态。结果:各组细胞在转染重组质粒pSico(R)-GAPDH和pSico(R)-Notch1后,EGFP的表达均表现出明显的CRE依赖性;RT-PCR和Westernblot实验显示,pSico(R)-Notch1载体能在CRE蛋白的调控下抑制Notch1基因的表达,CBF-1荧光素酶报告载体实验可见,Notch1的干扰作用使细胞内Notch信号水平下降;MTS实验可见Notch1干扰引起的HeLa细胞增殖抑制。结论:由可调控RNA干扰载体介导的CRE依赖性Notch1表达降低能降低细胞内Notch信号水平并抑制HeLa细胞增殖。; 俞海黄盛林赵小平卢健钱关祥葛盛芳; 关键词：NOTCH HELA细胞 CRE

Notch信号传导途径与肿瘤基因治疗相关性的研究: 恶性肿瘤是人类死亡的主要原因之一，手术、放疗和化疗等传统的治疗方法对肿瘤治疗的效果不甚理想。从根本上来说，恶性肿瘤的发生和发展仍然源于体内基因表达的异常，因此，基因治疗才是人类彻底征服肿瘤的希望。关于肿瘤的基因治疗研究包...; 俞海; 关键词：NOTCH 信号传导途径基因治疗肿瘤治疗; 文献传递

RNA干扰阻断Notch途径对肿瘤生长的影响: 恶性肿瘤是人类死亡的主要原因之一,手术、放疗和化疗等传统的治疗方法对肿瘤治疗的效果不甚理想。从根本上来说,恶性肿瘤的发生和发展仍然源于体内基因表达的异常,因此,基因治疗才是人类彻底征服肿瘤的希望。关于肿瘤的基因治疗研究包...; 俞海葛盛芳钱关祥; 文献传递

过表达Notch1对肿瘤细胞增殖的影响被引量：4: 2007年; 目的通过在肿瘤细胞内过表达Notch1胞内段活性部分,模拟细胞Notch途径的上调,检测细胞增殖状态的变化。方法利用包含Notch1胞内段的逆转录病毒感染实验细胞。通过CBF-1报告载体检测细胞内Notch信号的激活程度,MTS法检测细胞增殖情况,并对细胞的周期分布进行检测。结果Notch1胞内段的表达引起Notch信号在不同细胞中的上调,并引起Hela和HepG2细胞的增殖抑制和BGC-823细胞的增殖加速,而对Chang细胞的增殖没有明显影响。结论Notch信号的上调能引起不同肿瘤细胞增殖状态的变化,对Notch在肿瘤基因治疗中的应用具有重要意义。; 俞海葛盛芳卢健钱关祥; 关键词：NOTCH 肿瘤基因治疗

Notch途径与宫颈癌细胞系的增殖调控被引量：4: 2006年; 近年来在许多肿瘤细胞系中发现Notch基因的表达失常,失控的Notch信号对维持肿瘤细胞表型性起着重要作用。在宫颈癌细胞中,异常上调的Notch信号通路由人乳头瘤病毒(HPV)相关蛋白“E6/7”介导,并能与之发生协同作用维持肿瘤的生长及异型性,另一方面,激活的Notch1又能通过抑制Fos蛋白家族进而抑制“E6/7”的表达,并能通过抑制E47蛋白引起细胞增殖抑制。结合对不同时期宫颈癌细胞的研究结果,目前认为低水平的Notch1表达对维持发生癌变的角质细胞的生存相当重要,过多或过少的Notch1信号都会对细胞增殖造成负面影响。; 俞海钱关祥葛盛芳; 关键词：NOTCH 肿瘤宫颈癌细胞

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俞海