冀慧莹
- 作品数：11 被引量：38H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 藏红花素对人膀胱移行细胞癌T24细胞裸鼠移植瘤的实验研究被引量：8
- 2008年
- 目的检测藏红花素(crocin)对人膀胱移行细胞癌T24细胞株裸鼠移植瘤的作用。方法12只裸鼠右后腿背侧皮下接种T24移植瘤细胞后随机分为PBS对照组(6只)和50mmol/L藏红花素治疗组(6只)。从接种后第28d开始,每3d一次于肿瘤局部注射给予PBS或藏红花素,每3d测量1次肿瘤大小,并绘制移植瘤生长曲线;处理后第21d杀鼠摘取移植瘤,光镜、电镜观察肿瘤组织形态改变;RT-PCR检测Bcl-2、Bax mRNA表达;SP-免疫组织化学法分析sur-vivin、cyclinD1蛋白表达。结果藏红花素对人膀胱癌T24细胞裸鼠移植瘤的生长具有抑制作用,抑制率达28·7%。HE染色结果显示肿瘤标本内出现片状坏死灶;电镜观察可见凋亡的形态学改变;RT-PCR检测结果显示Bcl-2的表达水平下降,而Bax的表达水平上调;免疫组化结果显示经藏红花素处理后survivin、CyclinD1的表达下调。结论藏红花素能够抑制人膀胱癌T24细胞裸鼠移植瘤的生长,作用的分子机制与下调Bcl-2、survivin、cyclinD1和上调Bax基因表达有关。
- 赵培罗春丽吴小候胡宏波吕纯芳冀慧莹
- 关键词：藏红花素裸鼠BAXSURVIVINCYCLIND1
- 藏花素促膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的研究被引量：2
- 2008年
- 目的研究藏花素诱导膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡的作用及分子机制。方法通过MTT比色法分析藏花素对T24细胞增殖的影响;应用光镜观察细胞形态学的改变;Annexin V-FITC/PI荧光双标流式细胞术检测T24细胞周期动力学和凋亡诱导率的影响,RT-PCR和Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达变化。结果藏花素能明显抑制T24细胞的增殖,并可导致其形态学的改变;随藏花素作用时间的延长,G0/G1期细胞比例逐渐增加,S期和G2/M期细胞比例逐渐减少,早期凋亡细胞逐渐增多,同时可以上调Bax和下调Bcl-2的基因表达水平。结论藏花素可明显抑制T24细胞的生长,诱导肿瘤细胞凋亡,可能与Bcl-2和Bax等凋亡调控基因有关。
- 赵培罗春丽胡宏波吕纯芳冀慧莹
- 关键词：细胞凋亡BCL-2BAX
- shRNA沉默PLCε基因表达对肾癌细胞增殖的抑制及作用机制
- 2008年
- 目的:探讨经短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术沉默磷脂酶Cε(phospholipase C epsilon,PLCε)基因表达后对肾癌786-0细胞增殖的抑制及其作用机制。方法:脂质体介导重组质粒(pGenesil-PLCε)和空质粒(pGenesil-NP)转染786-0细胞48 h后,RT-PCR检测PLCεmRNA的表达;MTT法检测转染24、48和72 h后细胞增殖的抑制率;转染48 h后采用FCM方法分析细胞周期;RT-PCR和免疫细胞化学法分析转染48 h后p27和Ki67的表达情况。结果:转染重组质粒后可明显抑制PLCεmRNA的表达,其抑制率为69.7%;转染24、48和72 h后细胞增殖抑制率分别为21.2%,31.6%和32.7%;FCM结果显示转染重组质粒后细胞周期的分布发生了改变,G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,细胞阻滞于G0/G1期,并出现了亚二倍体"凋亡峰"。RT-PCR和免疫细胞化学结果均表明p27表达上调,而Ki67表达下调。结论:RNA干扰技术阻断PLCε基因表达后可抑制肾癌786-0细胞增殖,其作用机制可能是诱导p27表达上调和Ki67表达下调。
- 谢建红罗春丽郭永灿冀慧莹吕纯芳荀春华
- 关键词：肾细胞基因沉默磷脂酶C细胞增殖
- 藏花素对膀胱移行细胞癌的增殖抑制作用被引量：7
- 2008年
- 目的:研究藏花素(Crocin)对膀胱移行细胞癌是否具有增殖抑制作用。方法:MTT法检测藏花素对T24细胞增殖的影响;应用形态学手段观察细胞形态学的改变;流式细胞术检测肿瘤细胞周期动力学。荷瘤小鼠模型建立,测定藏花素处理后荷瘤小鼠体内抑瘤率。结果:藏花素能明显抑制T24细胞的增殖,并可导致其形态学的改变;藏花素作用后G0/G1期细胞比例逐渐增加,S期和G2/M期细胞比例逐渐减少;对照组裸鼠肿瘤的平均体积明显大于藏花素处理组裸鼠肿瘤的平均体积,其差异具有显著性(P<0.05),裸鼠生长抑制率为27.8%。结论:体内外实验证明,藏花素对膀胱移行细胞癌的增殖有抑制作用。
- 罗春丽赵培胡宏波吕纯芳冀慧莹吴小候
- 关键词：膀胱移行细胞癌T24细胞增殖抑制
- 藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:应用基因表达谱芯片研究藏花素(crocin)对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响。方法:MTT法测定藏花素对T24细胞的生长抑制率,选出藏花素最佳作用时间和浓度,运用高通量的基因表达谱芯片检测藏花素作用T24细胞前后基因表达谱的变化,筛选差异表达基因。RT-PCR和免疫细胞化学验证上调基因p21^(WAF1)和下调基因cyclinD1。结果:MTT实验结果显示3 mmol·L^(-1)藏花素作用T24细胞48 h的抑制率与对照组相比有显著意义(P<0.05)。基因芯片检测发现3 mmol·L^(-1)藏花素作用T24细胞48 h引起该细胞系基因表达谱广泛地改变,其中表达差异2倍以上的基因共836个,这些差异表达基因的功能涉及多个方面,最为明显的是与细胞生长调节相关的细胞周期调节基因、细胞凋亡调控基因、DNA复制相关基因等类型。RT-PCR检测其中的细胞周期调节相关基因p21^(WAF1)和cyclinD1,结果与基因芯片相符。同时免疫细胞化学结果从蛋白表达水平上佐证p21^(WAF1)和cyclinD1变化与芯片结果一致。结论:藏花素可以诱导T24细胞基因表达谱广泛的改变,并可能通过调控细胞周期相关基因的表达来抑制T24细胞的增殖。
- 吕纯芳罗春丽冀慧莹赵培
- 关键词：膀胱移行细胞癌基因表达谱芯片
- 靶向沉默PLCε联合藏花素抑制膀胱癌BIU-87细胞增殖作用及机制研究
- 第一部分
目的：研究藏花素对膀胱癌BIU-87细胞的抑制作用及机制，为藏花素在肿瘤治疗中的应用奠定理论基础。
方法：MTT法测定藏花素抗增殖作用，FCM分析细胞周期分布，RT-PCR技术测定Cycli...
- 冀慧莹
- 关键词：膀胱癌BIU-87细胞细胞增殖靶向沉默
- 文献传递
- RNAi沉默PLCε对Crocin抑制人膀胱癌BIU-87细胞增殖作用调控的研究
- 2008年
- 目的:观察RNAi沉默膀胱癌BIU-87细胞磷脂酶C-ε(Phospholipase C epsilon,PLCε)表达后对藏花素(Crocin)抑制人膀胱癌BIU-87细胞增殖作用的影响。方法:将携有siRNA基因的真核表达质粒PGenesil-PLCε转染BIU-87细胞后,分为5组:未转染组、pGenesil-NP阴性质粒组、pGenesil-PLCε质粒组、Crocin组、pGenesil-PLCε联合Crocin组。MTT法观察不同处理组对BIU-87细胞的生长抑制作用。RT-PCR法检测转染后对PLCεmRNA表达的影响及各处理组PCNA(Proliferating cell nuclear antigen)、CyclinD1 mRNA表达。Western-blot检测PCNA、CyclinD1蛋白表达。结果:RNAi可抑制BIU-87细胞78.06%的PLCεmRNA表达。pGenesil-PLCε联合Crocin组可增强Crocin对BIU-87细胞的生长抑制作用,48h抑制率达45.30%,且与pGenesil-PLCε质粒组和Crocin组相比较有显著性差异(P<0.01)。RT-PCR和Western-blot结果显示与RNAi沉默PLCε组比较,RNAi PLCε联合Crocin组明显下调了PCNA、Cyclin D1基因和蛋白的表达(P<0.05);较单独Crocin组比较,RNAi PLCε联合Crocin组显著降低了PCNA基因和蛋白的表达(P<0.05),降低了Cyclin D1蛋白的表达(P<0.05),Cyclin D1 mRNA表达变化两组间无显著性差异(P>0.05)。结论:沉默PLCε基因可增强Crocin对BIU-87细胞的抑制作用,其机制与进一步下调PCNA、CyclinD1的表达有关。
- 冀慧莹吴绮思郭永灿吕纯芳赵培罗春丽
- 关键词：RNA干扰膀胱癌CROCIN增殖
- 藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞增殖和凋亡的影响及作用机制研究被引量：11
- 2008年
- 目的:研究藏花素(crocin)对膀胱移行细胞癌(TCCB)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法:用crocin处理后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析其对T24细胞增殖的影响;流式细胞术检测T24细胞周期动力学和凋亡诱导率。建立人膀胱癌T24细胞株裸鼠移植瘤动物模型。随机分为对照组和处理组。50 mmol.L-1crocin处理后,观察其对肿瘤的抑制作用;电镜观察肿瘤组织形态改变;SP-免疫组织化学法分析Bcl-2,Bax,survivin,Cyclin D1蛋白表达。结果:Crocin能明显抑制人膀胱癌T24细胞的生长,并使T24细胞呈明显的G0/G1期阻滞现象;T24细胞早期凋亡率随crocin作用时间的延长而逐渐增加。Crocin对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长具有抑制作用,电镜观察可见细胞凋亡的形态学改变,免疫组化结果显示,经Crocin处理后Bcl-2,survivin,Cyclin D1的表达下调,而Bax的表达上调。结论:Crocin对人膀胱癌T24细胞株的体内外增殖均具有良好的抑制作用,其机制可能是改变细胞周期分布和诱导细胞凋亡,作用机制与下调Bcl-2,survivin,Cyclin D1基因表达和上调Bax的基因表达有关。
- 赵培罗春丽吴小候胡宏波吕纯芳冀慧莹
- 关键词：膀胱癌细胞凋亡细胞周期
- RNAi沉默PLCε基因对膀胱癌BIU-87细胞株的增殖调控作用被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨RNA干扰技术沉默PLCε基因表达对膀胱癌BIU-87细胞株增殖的抑制作用.方法 构建靶向PLCε基因特异性shRNA重组质粒pGenesil-PLCE,经脂质体介导转染BIU-87细胞株,蛋白质印迹法、RT-PCR方法检测PLCε在癌细胞蛋白及mRNA水平的表达,噻唑盐法观察重组质粒对BIU-87细胞增殖的抑制作用,免疫细胞化学染色分析增殖细胞核抗原（PCNA）含量改变,流式细胞仪检测细胞周期分布.结果 构建的重组质粒pGenesil-PLCε能明显抑制PLCE基因表达,且能明显抑制BIU-87细胞增殖;转染重组质粒0、24、48和72 h后细胞增殖抑制率分别为2.01%、32.85%、39.78%、37.19%,重组质粒组与对照组、阴性质粒组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）.细胞内PCNA表达下调了33.08%;G0/G1期细胞（71.50±4.48）%与空白对照组（40.75±2.30）%、阴性质粒组（40.00±1.76）%比较明显增多,G2/M期细胞（8.16±0.51）%与空白对照组（31.20±1.76）%、阴性质粒组（35.94±1.58）%相比减少.差异均有统计学意义（P〈0.01）,细胞阻滞于G0/G1期,细胞增殖状态受到明显抑制.结论 PLCε基因在促进膀胱癌细胞增殖中发挥莺要作用,可能成为膀胱癌生物学治疗潜在的分子靶点.
- 郭永灿罗春丽蔡晓钟谢建红欧俐苹赵懿吕纯芳冀慧莹吴小候
- 关键词：膀胱肿瘤RNA干扰
- 藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞VEGF-C表达水平的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:研究藏花素(Crocin)对膀胱移行细胞癌T24细胞血管内皮生长因子C(Vascular endothelial growth factor,VEGF-C)表达水平的影响。方法:采用MTT法测定不同浓度及不同时间藏花素对T24细胞抑制率,选出最佳药物浓度和最佳作用时间。用RT-PCR和基因芯片分别检测最佳作用时间和最佳药物浓度作用前后T24细胞VEGF-C的表达。结果:MTT显示藏花素抑制T24细胞生长具有时间和剂量依从性,3mmol/L藏花素作用48h对T24细胞的抑制率最高。RT-PCR显示藏花素组VEGF-C表达明显减少,基因芯片扫描结果中藏花素组VEGF-C表达也显著下调。结论:藏花素抑制T24细胞增殖,可能与下调VEGF-C的表达,从而减少肿瘤血管的生成有关。
- 吕纯芳罗春丽冀慧莹赵培
- 关键词：膀胱移行细胞癌
