冯晶
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：吉林省杰出青年科学基金国家自然科学基金吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肿瘤特异性抗CDK4胞内抗体的体内外抑瘤效应分析
- 徐洪亮杨丹李函蔚李兵直冯晶李桂英
- 关键词：CDK4胞内抗体肿瘤靶向抑瘤效应
- 人CDK4基因的原核表达及重组蛋白的纯化和复性被引量：2
- 2008年
- 将人CDK4基因克隆入原核表达载体pET28a(+)中,经酶切和测序鉴定正确的重组质粒pET28a-CDK4,转化E.coliBL21(DE3)后获得表达菌株.该表达菌株经IPTG诱导后,高效表达出带有组氨酸标签的以包涵体形式存在的融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的52.6%,包涵体经过洗涤、尿素变性溶解、His Trap HP Kit柱纯化、稀释复性,获得纯度达98%以上的蛋白.SDS-PAGE及Western blot分析表明,在分子量34 000处有一特异性蛋白条带.结果表明,已成功的表达和纯化纯度达98%的重组人CDK4蛋白.
- 曹玉华许晶晶陈勇王琪冯晶郝东云李桂英
- 关键词：原核表达包涵体
- 内质网滞留型抗CyclinD1胞内抗体在HeLa细胞中的表达分析
- 2008年
- 目的构建内质网滞留型的抗CyclinD1胞内抗体并鉴定其在肿瘤细胞中的表达活性。方法利用PCR技术将细胞内质网滞留信号及E-tag检测标签引入抗CyclinD1人源单链抗体,获得抗CyclinD1胞内抗体(AD5E)基因片段,通过分子克隆技术,构建重组真核表达载体pcDNA3.1-AD5E,限制性内切酶分析及DNA测序验证其序列及读码框正确后,利用脂质体介导法转染HeLa细胞,RT-PCR和间接免疫荧光实验分析该胞内抗体在肿瘤细胞中的表达活性。结果限制性内切酶分析及DNA测序发现,正确引入细胞内质网滞留信号和E-tag检测标签序列,该胞内抗体片段为876bp。RT-PCR及免疫荧光实验结果显示,仅在转染胞内抗体基因的HeLa细胞中存在该胞内抗体的表达,并且主要分布在细胞质区域。结论我们成功构建了在肿瘤细胞中能够有效表达的内质网滞留型的抗CyclinD1胞内抗体。
- 周立宏朱迅田宇陈勇曹玉华冯晶李桂英
- 关键词：CYCLIND1胞内抗体肿瘤
- 肿瘤特异性抗CDK4胞内抗体的体内外抑瘤效应分析
- CDK4作为细胞进入增殖周期第一个被激活的的周期蛋白依赖性蛋白激酶,是肿瘤治疗的潜在靶点。为了实现高效靶向失活肿瘤细胞CDK4,本研究制备了携带抗CDK4胞内抗体基因的肿瘤特异性真核表达载体pBg-NIS-AK通过细胞实...
- 徐洪亮杨丹李函蔚李兵直冯晶李桂英
- 关键词：CDK4胞内抗体肿瘤靶向抑瘤效应
- 文献传递
