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TLR2基因标签SNP的筛选及其与创伤脓毒症风险性的关联性: 目的利用单倍域(haplotype Block)和标签SNP的最新理论和技术,从整个TLR2基因范围内筛选出与脓毒症易患性密切关联的标签SNP位点和单倍型,进行基因分型和关联研究。从而更加深刻地了解脓毒症的发病机制,还可...; 陈客宏曾灵刘庆黄苏娜蒋建新

TLR9基因目的SNPs与创伤脓毒症易感性的关联研究: 陈客宏顾玮曾灵周健蒋东坡张连阳都定元刘庆蒋建新

MD-2基因启动子区-1064、-1625 SNP对启动子活性的影响被引量：5: 2007年; 目的探讨MD-2基因启动子区-1064、-1625SNP位点碱基变异对启动子活性的影响。方法通过PCR和定点突变技术,构建了含MD-2基因基础启动子及-1625G和-1064G突变启动子,以双荧光素酶报告系统观察SNP对MD-2基因启动子活性的影响。结果化学发光结果显示,在U937细胞中,-1625G突变启动子活性比MD-2基础启动子活性高11.4%,差异显著。而-1064G突变启动子与MD-2基础启动子活性无明显差异。结论-1625C→G碱基变异可增强MD-2基因启动子活性,但-1064SNP对靶基因启动子活性无明显影响。; 单佑安刘庆董蕻顾玮蒋建新; 关键词：MD-2 启动子单核苷酸多态性

促肾上腺皮质素释放激素基因敲除小鼠的繁殖与基因型鉴定: 目的探讨促肾上腺皮质素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)基因敲除小鼠饲养、繁殖及基因型鉴定方法。方法从Jackson实验室引进CRH基因敲除小鼠,于层流隔离环境饲养,依照遗...; 王海燕刘庆钟河江杨策严军黄苏娜程英蒋建新

HMGB1基因标签SNP的筛选及其与严重创伤后脓毒症的关联性: 曾灵蒋建新顾玮周健蒋东坡张连阳都定元胡平陈客宏刘庆

去甲肾上腺素增强大鼠腹腔巨噬细胞免疫功能被引量：1: 2009年; 周建云严军杨策刘庆程英蒋建新; 关键词：细胞免疫功能去甲肾上腺素交感神经末梢免疫调控作用交感神经系统

巨噬细胞趋化检测方法的建立及皮质酮对其趋化功能的影响被引量：1: 2009年; 目的建立改良Boyden趋化小室(Boyden chamber)法检测巨噬细胞趋化功能的方法,探讨皮质酮对大鼠腹腔巨噬细胞趋化功能的影响。方法分离成年Sprague-Dawley(SD)大鼠腹腔巨噬细胞。应用48孔Boyden chamber趋化板检测趋化功能。下室加入27μL的10nM FMLP作为趋化剂或含1%牛血清清蛋白的RPMI-1640作为阴性对照,将50μL不同细胞密度的大鼠腹腔巨噬细胞悬液(3、6、12×106/mL)置于上室以确定最适细胞密度,将趋化装置置于5%CO2、37℃细胞培养箱内孵育2、3h以确定最适孵育时间。同时,以0、10、501、000ng/mL皮质酮处理大鼠腹腔巨噬细胞,应用Boyden chamber法检测巨噬细胞趋化功能。结果巨噬细胞对10nM FMLP趋化剂呈细胞密度依赖性增加,上室巨噬细胞密度为6×106/mL时为最适细胞密度,并且最适孵育时间为3h。低浓度皮质酮(10、50ng/mL)处理大鼠腹腔巨噬细胞其趋化指数显著高于对照组(P<0.01),而高浓度皮质酮(1 000ng/mL)处理后巨噬细胞趋化指数与对照组相比差异不明显。结论成功建立了改良Boyden chamber法检测巨噬细胞趋化功能方法,皮质酮可呈剂量依赖性地影响巨噬细胞趋化功能,在无免疫刺激状态下,低浓度皮质酮能增强巨噬细胞趋化功能。; 钟河江王海燕刘庆蒋建新杨策严军黄苏娜杨天德; 关键词：巨噬细胞皮质酮

汉族人髓样分化蛋白2基因启动子区多态性与严重创伤后并发症易感性的关系被引量：6: 2007年; 目的探讨中国汉族人髓样分化蛋白2(MD-2)基因启动子单核苷酸多态性及其与严重创伤患者多器官功能衰竭和脓毒症易感性之间的关系。方法应用限制性片段长度多态性-聚合酶链式反应技术,检测105例严重创伤患者(其中42例并发脓毒症)MD-2基因启动子-1625C/G单核苷酸多态性位点基因型。并对所有患者进行多器官功能障碍综合征(MODS)评分。结果-1625G等位基因携带者MODS评分显著高于C等位基因携带者(显性遗传模式P<0.001,隐性遗传模式P>0.05)。携带G等位基因型的创伤患者比C等位基因携带者并发脓毒症的可能性高(OR值为0.477,95%可信区间为0.266-0.855,P<0.05)。携带G等位基因型的创伤患者死亡率显著高于C等位基因携带者(显性遗传模式P<0.05,隐性遗传模式P>0.05)。结论汉族人严重创伤后多器官功能衰竭、脓毒症的易感性与MD-2基因启动子-1625C/G单核苷酸多态性相关。-1625G可能是严重创伤后并发症发生的危险因素。; 顾玮单佑安刘庆周健蒋东坡姚元章张连阳都定元高劲谋董蕻杨策朱佩芳王正国蒋建新; 关键词：多器官功能障碍综合征

X盒结合蛋白1在低浓度皮质酮对巨噬细胞免疫功能调控中的作用被引量：1: 2009年; 目的探讨X盒结合蛋白1(X-box binding protein1,XBP1)在低浓度皮质酮对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能调控中的作用。方法分离培养成年健康雄性C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞,应用XBP1-RNAi慢病毒或阴性对照慢病毒感染小鼠腹腔巨噬细胞,采用荧光显微镜观察感染效率,感染3、5d后收集巨噬细胞提取总RNA,应用RT-PCR检测小鼠腹腔巨噬细胞XBP1mRNA表达水平和干扰效率。XBP1-RNAi慢病毒或阴性对照慢病毒感染离体培养的小鼠腹腔巨噬细胞3d后,再应用低浓度皮质酮(50ng/ml)处理小鼠腹腔巨噬细胞1h,分别应用ELISA法及激光共聚焦显微镜检测小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中TNF-α生成及其吞噬功能变化。结果当复感染指数(multiplicity of infection,MOI)值≥6时,XBP1-RNAi慢病毒能有效地感染小鼠腹腔巨噬细胞,感染效率>75%。应用RT-PCR检测发现XBP1-RNAi能有效地抑制小鼠腹腔巨噬细胞XBP1基因表达。通过选择性地沉默XBP1基因表达,低浓度皮质酮(50ng/ml)对巨噬细胞吞噬功能增强的作用受到抑制,巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数均显著下降(P<0.01),而且对TNF-α分泌增强的作用也受到抑制,显著低于阴性对照慢病毒组(P<0.01)。结论采用RNA干扰选择性地沉默XBP1,能有效地抑制低浓度皮质酮对巨噬细胞吞噬和TNF-α生成增强的作用。; 钟河江周建云蒋建新王海燕杨策严军刘庆程英; 关键词：糖皮质激素巨噬细胞 RNA干扰免疫功能

TLR2基因标签SNP的筛选及其与创伤脓毒症风险性的关联性: 陈客宏顾玮曾灵周健蒋东坡张连阳都定元刘庆蒋建新

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刘庆

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