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CCL21通过上皮间质转化促进胰腺癌Panc-1细胞的迁移被引量：10: 2015年; 目的研究C-C趋化因子配体21(CCL21)促进胰腺癌细胞迁移的作用机制。方法 TranswellTM检测不同浓度CCL21对胰腺癌Panc-1细胞的趋化作用;实时定量PCR检测穿梭到下室的胰腺癌细胞C-C趋化因子受体7(CCR7)mRNA的表达水平;Western blot法和免疫荧光法检测穿梭至TranswellTM下室胰腺癌细胞CD133及上皮间质转化(EMT)的特定蛋白表达。以TranswellTM小室的上室细胞作为对照组。结果在(0、50、100、200)ng/m L CCL21的趋化作用下,穿梭到下室的Panc-1细胞数分别为(13.00±3.00、78.00±9.00、161.00±11.00、281.00±17.00),四组细胞数差异具有统计学意义;随着CCL21浓度增高,穿梭到下室的细胞数增多;CCL21趋化到下室的Panc-1细胞比未穿梭的上室Panc-1细胞CCR7 mRNA的表达水平增高。穿梭到下室的Panc-1细胞CD133、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、波形蛋白(vimentin)、上皮性钙黏素(E-cadherin)蛋白相对表达量分别为(0.46±0.03、0.42±0.04、2.94±0.15、0.12±0.02),与上室细胞相比,差异均具有统计学意义。结论 CCL21对高表达CCR7的胰腺癌干细胞具有趋化作用。CCL21通过EMT及上调MMP-9促进胰腺癌干细胞的转移。; 刘庆陈芳芳段唐海朱海涛谢小东吴荧荧张志坚王冬青; 关键词：CCL21 胰腺癌肿瘤干细胞细胞迁移

澳洲茄边碱对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响被引量：3: 2015年; 目的探讨澳洲茄边碱(SM)对HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制。方法用不同浓度SM 5、10、15和20μg/ml分别处理HepG2细胞3、6、12和24h,并设不加药的对照组。采用MTT法检测HepG2细胞增殖,DAPI染色法观察细胞核形态的变化,流式细胞术检测细胞凋亡和周期,Western blot法检测B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)及Ki67的蛋白表达。结果与对照组相比,SM呈剂量依赖性地抑制HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡,将细胞周期阻滞于G2/M期,并且上调Bax和Caspase-3蛋白表达,下调Bcl-2和Ki67蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论 SM能有效抑制HepG2细胞的增殖,促进细胞凋亡的发生;SM上调Bax和Caspase-3表达,下调Bcl-2和Ki67表达,细胞周期阻滞于G2/M期可能是其发挥上述作用的机制。; 谢晓东吴荧荧黄文斯刘庆王颖朱海涛张礼荣王冬青; 关键词：HEPG2细胞

多聚赖氨酸修饰SPIO标记骨髓间充质干细胞体外磁共振成像研究被引量：1: 2013年; 目的利用多聚赖氨酸(PLL)修饰的超顺磁性氧化铁粒子(SPIO),即超顺磁性氧化铁纳米粒子(SPIOPLL)标记大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),探讨其对BMSCs生物学特性的影响以及3.0 T磁共振成像(MRI)上T2信号的改变。方法将传代培养BMSCs与不同铁浓度的SPIO-PLL溶液共同孵育24 h后行普鲁士蓝染色,观察BMSCs对不同浓度SPIO-PLL的摄取,确定SPIO-PLL标记干细胞的最佳浓度。同时采用四唑盐比色法分析不同浓度SPIO-PLL溶液对大鼠BMSCs生长活性的影响。取最适浓度的SPIO-PLL标记BMSCs,经3.0 T MRI,观察T2WI信号的改变。结果 SPIOPLL标记BMSCs生物活性没有明显影响,与未标记细胞的生长活性比较,差异无统计学意义(P>0.05);同时铁浓度不同(10、40、80μgFe/mL)的SPIO-PLL溶液标记细胞成像可使T2WI图像信号降低,3种浓度的信号变化率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SPIO-PLL可以标记BMSCs,且对BMSCs的生物学活性没有影响,MRI T2WI序列可敏感显像磁性标记的干细胞,有望为MRI和光学成像活体示踪BMSCs提供技术基础。; 刘慧慧谢晓东吴荧荧刘庆陈芳芳蔡小威许云飞张礼荣朱海涛; 关键词：聚赖氨酸生物学标记间质干细胞磁力学

miR-21转染对卵巢癌细胞株A2780/Taxol紫杉醇耐药性的影响及机制探讨被引量：2: 2013年; 目的探讨microRNA-21(miR-21)在卵巢癌化疗耐药中的作用及机制。方法荧光定量RT-PCR法检测miR-21在人卵巢癌细胞株A2780及A2780/Taxol的表达水平,合成miR-21的干扰序列,以脂质体为载体转染A2780/Taxol细胞;MTT法检测细胞转染前后对紫杉醇的耐药性;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测磷酸酶基因(PTEN)、BAX及Bcl-2蛋白。结果 miR-21表达下调后,A2780/Taxol对紫杉醇的IC50值明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显增加(P<0.05),细胞内PTEN、BAX蛋白表达水平增加,Bcl-2表达降低。结论 miR-21在人卵巢癌耐药株中呈高表达,其可能是介导人卵巢癌耐药的主要因素之一,具体机制可能是降低PTEN、BAX及升高Bcl-2来介导肿瘤细胞耐药。; 赵天李月峰刘庆陈芳芳卢辉群朱彦朱海涛王冬青; 关键词：紫杉醇耐药细胞株

体外间歇性低氧对胰腺癌细胞的干性维持作用: 2014年; 目的探讨体外间歇性低氧对胰腺癌细胞的干性维持作用。方法胰腺癌细胞Panc-1分为两组:A组予正常有氧培养;B组予间歇性低氧培养,1%O2、94%N2培养12h后20%O2培养12h,循环4次。培养24、48、72、96h,荧光显微镜下观察两组细胞形态学特征,免疫荧光检测CD133表达阳性细胞数,Western blot检测CD133、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和LC3-Ⅱ蛋白表达。结果Panc-1细胞在正常有氧环境下呈梭形贴壁生长。而在间歇性低氧环境中,部分Panc-1细胞形态逐渐由上皮样细胞形态向间充质样细胞形态转变。随着低氧时间的延长,B组CD133表达阳性细胞数量逐渐增多。B组CD133及Bcl-2蛋白表达含量呈先减低后逐渐增高趋势,呈时间依赖性,与A组比较有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。B组48hLC3-Ⅱ蛋白含量高于A组(P<0.01)。结论随着对低氧环境的逐渐适应,胰腺癌干细胞通过基因突变和高表达抗凋亡蛋白而存活。; 陈芳芳刘庆朱海涛张礼荣于明吴莹莹周月鹏张志坚王冬青; 关键词：胰腺癌肿瘤干细胞间歇性低氧

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刘庆