刘明阳
- 作品数：6 被引量：19H指数：2
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- 猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp7蛋白的表达与纯化被引量：2
- 2012年
- 为了解nsp7重组蛋白的免疫学活性,采用RT-PCR的方法从猪繁殖与呼吸道综合症病毒(PRRSV)BJ-4毒株中扩增得到nsp7基因,将基因连接到pET-28a载体并转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达,利用Ni-NTA进行亲和纯化,通过SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行分析和鉴定,通过间接ELISA方法研究了重组蛋白的免疫学活性。结果表明,成功制备了nsp7重组蛋白,间接ELISA结果表明,重组蛋白具有良好的免疫活性,为建立nsp7特异性抗体的间接ELSIA检测方法及PRRS诊断试剂盒的研制奠定了基础。
- 刘永晖张改平乔松林刘明阳蒋志政王蕊万博鲍登克王爱萍
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒原核表达
- 猪伪狂犬病毒的分离与鉴定被引量：8
- 2013年
- 从河南某发病猪场大批死亡仔猪的脾、肾及脑组织中分离到1株猪伪狂犬病毒(PRV)毒株,该毒株经细胞连续传代培养后,接种PK-15细胞能够产生明显的细胞病变(CPE),且能被PRV阳性血清中和。病毒对氯仿、乙醚敏感,56℃水浴30min能使其灭活。将所分离的病毒接种家兔和小鼠,均出现明显的伪狂犬病临床症状。PCR鉴定结果表明,用gp50基因序列引物能够从该毒株上扩增出目的条带,将测序结果与GenBank中的5株PRV毒株进行比对分析,同源性达99%。证实所分离病毒为猪伪狂犬病毒。
- 潘霄刘明阳李学伍郭成留邓瑞广张改平
- 关键词：猪伪狂犬病毒
- 新霉素免疫膜层析检测方法研究被引量：2
- 2011年
- 【目的】研制新霉素(neomycin,NEO)免疫膜层析快速检测试纸。【方法】建立分泌抗新霉素单克隆抗体(NEO mAb)杂交瘤细胞株,用胶体金免疫膜层析试验(GICA)制备NEO残留快速检测试纸(NEO-Strip),并对其性能进行鉴定。【结果】抗新霉素单克隆抗体的亲和力常数为3.75×1010 mol.L-1;制备的NEO-Strip目测限为50 ng.mL-1;试纸可特异性检测NEO,与庆大霉素、链霉素、妥布霉素、紫苏霉素、莱克多巴胺、沙丁胺醇、泰乐菌素和氯霉素等其它药物均无交叉反应性;就定性检测而言,其结果与高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS-MS)完全一致;不同的基质液对试纸的敏感度影响甚微。【结论】建立了特异的NEO免疫层析检测方法。
- 王爱萍李发弟胡骁飞史兆国周景明杜晓明王林林禹乐乐刘明阳
- 关键词：新霉素单克隆抗体胶体金试纸条
- PRRSV毒株的分离鉴定及单克隆抗体的制备
- 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive andrespiratory syndrome virus，PRRSV)引起的一类传染性疾病，以母猪流产、仔猪死亡及呼吸系统紊乱为临...
- 刘明阳
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒单克隆抗体基因序列
- 文献传递
- 抗猪FcγRⅡb多抗阻断猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体依赖增强作用研究被引量：6
- 2012年
- 为验证猪FcγRⅡb在抗体依赖增强(ADE)作用中的功能,从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性血清中提取IgG并制备F(ab′)2片段,将104 TCID50的PRRSV病毒与80μg/mL的F(ab′)2片段或抗PRRSV阳性血清(中和效价1/5.9,经128倍稀释)混合,共同感染猪肺泡巨噬细胞(PAM)和Marc-145细胞,发现亚中和滴度的阳性血清能显著增强病毒对PAM的感染,但不能增强病毒对Marc-145细胞的感染;而F(ab′)2片断不能增强病毒感染;用兔抗猪FcγRⅡb多抗孵育PAM细胞,再用上述病毒与阳性血清复合物感染PAM,结果阳性血清对病毒感染的增强作用受到明显抑制。表明猪FcγRⅡb能够介导PRRSV ADE作用。
- 蒋志政张改平刘明阳乔松林刘永晖王蕊万博鲍登克王爱萍
- 关键词：阻断
- 8株猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的变异分析被引量：1
- 2013年
- 本研究拟初步了解中原地区近期猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异情况。对2011—2012年间从河南及周边省份发病猪场分离的8株PRRSV毒株Nsp2基因变异区进行RT-PCR扩增,同时对主要结构蛋白GP5基因进行克隆测序并与GenBank中登录的中国历年来流行的PRRSV代表毒株的GP5蛋白序列进行遗传进化分析,对主要氨基酸基序进行比对分析。结果表明,2011—2012年在中原地区分离的8株PRRSV分离株均为Nsp2缺失变异株,GP5基因与2006年中国高致病PRRSV代表毒株JXA1同源性较高。
- 刘明阳张改平郝慧芳乔松林万博鲍登克郭成留王爱萍
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5进化
