刘芳 作品数:22 被引量:70 H指数:4 供职机构: 上海市公共卫生临床中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术委员会资助项目 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
MRSA气溶胶诱导烫伤SKH-1无毛小鼠皮肤感染合并肺炎模型 2013年 目的探讨烫伤条件下,建立MRSA气溶胶致SKH-1无毛小鼠皮肤感染合并肺炎模型的方法及其评价指标。方法 48只SKH-1无毛小鼠,随机分成PBS对照组,单纯感染组和烫伤合并感染组。合并感染组小鼠皮肤烫伤后,MRSA(ST-239)气溶胶呼吸道感染,采用体重、血常规、菌血症率、皮肤和脏器荷菌量、病理组织学变化和分子生物学等指标对模型进行综合评价。结果与其他两组相比,合并感染组小鼠第3天体重下降明显;白细胞数显著增多;菌血症率达100%;皮肤和肺荷菌量较高,分别达108CFU/g和106CFU/g;镜下观察皮肤和肺炎症病变明显;免疫组化结果显示皮肤组织内CD138呈阳性表达;multi-PCR测定感染组织内nuc和mecA基因均为阳性。结论 SKH-1无毛小鼠烫伤再辅以MRSA气雾攻击的方式,可成功建立能够模拟临床上烧烫伤患者继发MRSA肺炎的动物模型,此模型对于抗MRSA药物药效评价研究具有重要临床应用价值。 刘巧玲 朱萍妹 杨玉琴 刘芳 陈颖 周文江 周光兴关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 气溶胶 烫伤 肺炎 三聚氰胺致大鼠泌尿系统组织损伤的实验观察 被引量:1 2010年 目的 为三聚氰胺泌尿系统组织损伤的研究建立动物模型. 方法 60日龄SPF级SD大鼠分为4组,3组分别给予三聚氰胺1.0、0.5、0.25 g/kg,连续灌胃6周;空白对照组每天灌胃10 g/L甲基纤维素溶液.于6周末处死动物,采用肉眼和体视显微镜观察大鼠肾脏、输尿管和膀胱形态改变,计算各脏器系数,同时检测大鼠血液生化指标,并利用小动物活体Micro CT对大鼠肾脏进行扫描,观察肾脏形态改变. 结果 给药6周末各组大鼠膀胱结石发生率为66.6%(20/30),肾脏结石发生率为56.6%(17/30).给药6周各组大鼠肾脏均肿大呈灰黄色,肾内均出现条索状黄色沉淀物,融合成片状或颗粒状,并在皮质和髓质之间形成黄色弧形光环,给药6周各组肾脏质量和脏器指数均显著性升高,血清CREA、BUN、磷、镁含量升高(P<0.01). 结论 使用0.5~1.0 g/kg三聚氰胺连续灌胃给药6周,可诱发部分SD大鼠产生不同程度的泌尿系统结石. 杨华 刘芳 秦波音 周文江关键词:三聚氰胺 尿结石 疾病模型 结核分枝杆菌动物建模试验中ABSL-3实验室内生物安全评估 被引量:1 2012年 目的通过在动物生物安全三级(ABSL-3)实验室内对结核分枝杆菌(MTB)动物建模过程采样监测,为实验室生物安全评估提供依据。方法在经中国合格评定国家认可委员会(CNAS)认可并由卫生部批准的,可从事MTB等高致病性病原微生物实验动物研究工作的ABSL-3实验室内实施MTB动物建模,在实验过程中进行空气和物体表面采样。用快速分子诊断和常规病原学方法对样本进行特异性检测分析。结果生物安全三级(BSL-3)实验室使用后的清场工作可以大大减少实验室环境的细菌量,BSL-3实验室在日常使用中也会存在少量的环境微生物,由于负压强度和使用频率的差异,核心区的环境洁净度明显高于准备间。70%乙醇喷洒消毒及擦拭可以使准备间物体表面的细菌量检出率从59.26%下降到9.38%;核心区物体表面的环境细菌检出率从6.59%下降到1.52%,核心区MTB检出率从10.99%下降到0。在ABSL-3实验室和生物安全柜双重负压环境下,可避免空气中MTB气溶胶污染。结论 ABSL-3实验室的负压环境和正确的防护及消毒措施对实验室操作人员的生物安全有重要的防护作用。 朱召芹 范齐文 胡香南 刘芳 郭建 宰淑蓓 杨华 宋志刚 吴文娟关键词:生物安全评价 结核分枝杆菌 呼吸道合胞病毒感染加重哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力的观察 被引量:8 2015年 目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染加重哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力变化的影响。方法 6-8周龄雄性BALB/c小鼠30只,随机分为空白组、卵清蛋白(OVA)组(哮喘模型组)、OVA/RSV组(RSV+哮喘模型组),每组10只。OVA组用OVA致敏和激发;OVA/RSV组在OVA致敏后隔日用RSV滴鼻,连续3次,复制急性病毒感染哮喘模型;空白组予等量PBS。末次激发24h后,用小鼠动物呼吸机(Buxco RC系统)检测小鼠气道阻力;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学分析;留取肺组织进行H-E染色、PAS染色、VG染色,观察肺组织炎症反应。结果 OVA组小鼠肺组织有炎性细胞浸润,气道可见黏液分泌物,气道周围可见胶原增生。OVA/RSV组小鼠肺组织有明显炎性细胞浸润,肺泡腔明显狭窄,毛细血管扩张充血,气道可见明显黏液分泌物,气道周围胶原增生明显。OVA组、OVA/RSV组肺功能和BALF嗜酸粒细胞比例(EOS%)与空白组相比差异有统计学意义(P〈0.05,P〈0.01),OVA/RSV组气道阻力及BALF中EOS%与OVA组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 RSV感染能明显加重哮喘模型小鼠肺部组织炎症反应,同时使小鼠气道阻力明显增高。 景晓平 程伟伟 刘芳 杨华 何丽关键词:呼吸道合胞病毒 哮喘 气道炎症 气道阻力 小鼠脑内不同脑区中一氧化氮合酶免疫阳性神经元的分布、形态特征和起源 2012年 目的:研究小鼠前脑一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性(nNOS阳性)神经元在成年小鼠大脑的分布、形态特征和起源。方法:免疫组织化学显色观察nNOS阳性神经元在成年小鼠大脑中分布及其形态特征;BrdU标记新生神经元,研究脑内nNOS阳性神经元产生的时间;通过Nkx2.1(NK2homeobox 1)-Cre和Shh(Sonichedgehog)-Cre转基因小鼠与基因报告小鼠杂交后追踪其子代细胞的方法,观察成年小鼠脑内nNOS阳性神经元的起源。结果:nNOS阳性神经元在小鼠大脑中广泛表达;Brdu实验结果表明,皮质和纹状体中nNOS阳性神经元主要在胚胎期13.5d到14.5d产生,而隔区/钭角带中的这部分神经元则主要在胚胎期11.5d到12.5d产生;大部分皮质、纹状体和隔区/DB中的nNOS阳性神经元来源于Nkx2.1子代细胞,另外有部分来源于Shh子代细胞。结论:成年小鼠大脑中分布大量的nNOS阳性神经元;不同区域的这些神经元在胚胎发育的不同时间产生;脑内nNOS阳性神经元主要来源于Nkx2.1子代细胞,部分来源于Shh子代细胞。 黄增金 刘芳关键词:NNOS BRDU 纹状体 隔区 神经发生 一种生物安全罩 本实用新型属生物实验室设备技术领域,涉及一种医学和兽医实验室用,气溶胶设备的生物安全罩。所述生物安全罩,包括内置气溶设备的操作室和与所述操作室相邻的排风隔离室,其特征在于:所述排风隔离室顶部置有管道与排风机组连接,排风机... 周文江 刘芳 杨玉琴 曹明波 范小勇 杨华 沈艳 秦波音 彭秀华 徐春华文献传递 Ⅱ型糖尿病并发结核病小鼠模型的建立及评价 被引量:1 2013年 目的建立Ⅱ型糖尿病并发结核病小鼠模型,对其肺组织病变过程进行评价。方法高脂高糖饲料喂养C57BL/6J小鼠,腹腔注射STZ,建立Ⅱ型糖尿病小鼠模型。采用滴鼻的方式将结核分枝杆菌H37Rv接种至糖尿病小鼠体内,建立糖尿病并发结核病小鼠模型。分别于感染后的1~8周、10周及12周解剖小鼠,肉眼观察小鼠肺脏病变情况,活菌菌落计数,肺组织行HE及抗酸染色,镜下观察病理学改变。结果肉眼观察发现,随着感染时间的增长肺部感染情况逐渐加重,至第8周时病灶达到全肺的80%,第10周时病变范围开始缩小;感染8周后HE染色肺组织出现典型的肉芽肿结构,至第10周部分病变肺组织出现修复现象;抗酸染色可见结核分枝杆菌。结论从大体病变、菌落计数及病理改变等方面对小鼠模型进行评价,发现糖尿病并发结核病小鼠模型较单一的结核病小鼠模型具有病变出现早,病程进展快等特点,与临床患者的某些阶段表现类似,因此实验构建的糖尿病并发结核病小鼠模型基本成功。 刘芳 杨华 周晓辉 冯艳玲 周文江关键词:结核病 并发感染 小鼠模型 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎小鼠感染模型的建立与评估 被引量:12 2011年 目的本研究采用临床分离鉴定的ST239型耐甲氧西林金黄葡萄球菌(MRSA)感染BALB/c小鼠,建立小鼠肺炎模型,对小鼠的临床症状、肺载菌量与组织病理学变化进行时相性监测,并用该模型验证万古霉素对小鼠的治疗效果。方法取35只小鼠随机分成MRSA感染组、药物组和对照组,通过滴鼻方式分别滴入50μL细菌(前两组)与PBS(对照组);感染一天后对药物组用同样的方式滴入万古霉素,CT检测肺部的变化,并对肺载菌量和组织病理学变化进行观察。结果与对照组比较,CT和细菌计数等结果表明MRSA感染组和药物组的肺组织有明显的炎症反应,载菌量较高;与感染组相比,药物组小鼠肺部的载菌量明显降低,气管和肺部的组织病理学症状明显减轻。结论本实验结果表明小鼠MRSA肺炎模型成功建立,并可用于药物疗效的比较评估。该模型的建立,将为进一步研究临床分离的MRSA的病原特性、发病机理、治疗方法等,提供可靠的小动物模型。 王星 周文江 沈艳 刘芳 杨华 高谦 王德成关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 肺炎 小鼠模型 不同感染途径建立的结核分枝杆菌急性肺感染小鼠模型的比较 被引量:1 2012年 目的比较3种不同感染途径建立的结核分枝杆菌急性肺感染小鼠动物模型,为结核病研究中动物模型的建立、选择与实际应用提供实验依据。方法将结核分枝杆菌标准株H37Rv稀释至1×10。菌落形成单位(cfu)/mL,分别采用尾静脉注射、滴鼻、气雾攻击方式感染小鼠,感染后6周,观察肺组织病变情况、菌落计数,肺组织行HE染色、抗酸染色,免疫组织化学检测肺组织TNF-a单位面积表达量。数据行t检验。结果气雾攻击组、滴鼻组和尾静脉组小鼠肺部结核分枝杆菌数分别为(6.290±0.028)、(6.150±0.021)和(6.120±0.008)lgcfu/mL,对照组肺部无结核分枝杆菌;各感染组与对照组比较,差异均有统计学意义(t-3.762,P〈0.01),但不同感染途径感染组间差异无统计学意义(P〉0.05)。各感染组小鼠肺组织均有病理学改变,抗酸染色阳性。单位面积TNF-a表达量在尾静脉注射组、滴鼻组和气雾攻击组分别为0.049×10^6、0.759×10^6和1.042×10^6,差异有统计学意义(t=2.504,P〈0.05)。结论气雾攻击感染方式建立的小鼠急性肺结核病模型较尾静脉注射和滴鼻方式更为有效。 刘芳关键词:气雾剂 实验动物从业人员环境健康安全管理体系中生物安全培训的重要性 被引量:9 2018年 环境健康安全(environment health and safety,EHS)管理体系是指环境、健康、安全的组织结构,以及相关责任、流程和资源等相结合的统一管理系统,而生物安全是EHS管理体系中的重要内容之一。本文从实验动物从业人员EHS管理体系的角度探讨生物安全管理及相关培训在其中的重要作用,拟从EHS管理体系,实验动物从业人员职业风险分析以及生物安全培训等方面进行简要综述。 宋志刚 刘芳 任晓楠 金玫蕾 李顺 顾明媚 佘佳磊 周晓辉